發(fā)布時間：2021-12-27 23:07

　　殼寡糖是殼聚糖的降解產(chǎn)物,其水溶性好,易吸收,能抗菌、抗腫瘤、提高機體免疫力。殼寡糖激活如巨噬細胞、脾臟T淋巴細胞等免疫細胞,活化的免疫細胞不僅產(chǎn)生活性氧、活性氮等活性物質(zhì),還能分泌細胞因子。相關(guān)研究表明,投喂殼寡糖可以增強魚類的免疫應(yīng)答及抗感染能力,但其具體的作用機制尚不清楚。因此,本研究通過體內(nèi)和體外兩種實驗方法,以殼寡糖作為免疫刺激劑探究其對團頭魴頭腎巨噬細胞免疫功能的影響。主要的研究結(jié)果如下:1通過團頭魴頭腎巨噬細胞的分離、純化、鑒定,獲得了純度超過98%的團頭魴頭腎巨噬細胞。2殼寡糖刺激巨噬細胞,吞噬含有GFP的大腸桿菌,通過熒光顯微鏡觀察和酶標(biāo)儀檢測殼寡糖組比對照組吞噬細菌數(shù)顯著增強,產(chǎn)生活性氧、活性氮、i NOS酶活顯著增強。一氧化氮合酶的m RNA及NADPH氧化酶五個亞基（p91phox、p22phox、p40phox、p47phox、p67phox）m RNA水平與對照組相比顯著提高。3投喂1%殼寡糖一周,投喂組分離的巨噬細胞產(chǎn)生活性氧、活性氮及IL-1βm RNA、TNF-αm RNA水平與對照組相比顯著性增強。4克隆團頭魴一氧化氮合酶（i NOS）基因的全長序列... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

B.分離細胞的電鏡照片標(biāo)尺：2μMFig.2-1B.ElectronmicrographoftheseparatedcellsScalebar:2μM

殼寡糖對團頭魴頭腎巨噬細胞免疫功能的影響保守氨基酸序列用黑色表示，缺失堿基用（-）標(biāo)注。下劃線標(biāo)示輔因子的結(jié)合位點。Fig 3-4 A Multiple Alignment of iNOS amino acid sequences among other fish.Amino acids identical in black are highlighted, and the dashes (-) stand for the missing ones.The sites for various cofactor binding were shown by underlined and labeled.

殼寡糖對團頭魴頭腎巨噬細胞免疫功能的影響結(jié)果糖對巨噬細胞存活率的影響選取不同濃度的殼寡糖作用巨噬細胞來探究其對巨噬細胞存TT 法，設(shè)置 5 個濃度的殼寡糖處理 96 孔板中的巨噬細胞，每孔以校準(zhǔn)誤差，實驗至少重復(fù)三次排除偶然性。實驗結(jié)果表明00 μg/ml 時細胞存活率沒有顯著性影響，當(dāng)其濃度為 200 μg/ml顯著性降低（圖 4-1）。因此，本研究中殼寡糖的濃度選擇在 0-存活率沒有影響。

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]藥物治療糖尿病的研究進展[J]. 蔣蘭琴.  醫(yī)藥與保健. 2014(02)
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[6]草魚誘導(dǎo)型一氧化氮合酶cDNA和啟動子的克隆及分析[J]. 汪新艷,趙太強,郭嘉聰,楊牧,周紅.  四川動物. 2011(04)
[7]殼寡糖對吉富羅非魚幼魚生長性能、非特異性免疫及血液學(xué)指標(biāo)的影響[J]. 孫立威,文華,蔣明,吳凡,劉偉,田娟,仲維瑋,張明明.  廣東海洋大學(xué)學(xué)報. 2011(03)
[8]殼寡糖對正常小鼠免疫功能的影響[J]. 蔡文娣,初金鑫,付辰煒,韓寶芹,劉萬順.  中國海洋藥物. 2010(04)
[9]殼寡糖的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)及其機制研究進展[J]. 熊宇龍,匡欣薇,陳衛(wèi)國,徐艷清,高勁松.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2009(09)
[10]殼寡糖對大腸桿菌的抑制作用[J]. 楊玉紅.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(16)

碩士論文
[1]殼寡糖對黃河鯉生產(chǎn)性能、免疫指標(biāo)和腸道菌群影響的研究[D]. 張國啟.河南工業(yè)大學(xué) 2012
[2]殼寡糖及其新型衍生物的制備和抗腫瘤活性初步研究[D]. 蔡圣寶.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2009
[3]VOHS、VOCC體外對LPS刺激的小鼠腹腔巨噬細胞TLR2/4通路機制的影響[D]. 宋美芳.成都中醫(yī)藥大學(xué) 2009



本文編號：3552917