目的近年鹽堿地克氏原螯蝦養(yǎng)殖業(yè)逐漸興起,但是鹽堿地水質(zhì)高鹽度是最嚴(yán)重的非生物脅迫之一,基礎(chǔ)理論研究又比較薄弱導(dǎo)致養(yǎng)殖不善,使得克氏原螯蝦大面積死亡,有些種類即使能存活,但生長差,產(chǎn)量較低而且不穩(wěn)定。因此,探明鹽堿脅迫條件下克氏原螯蝦對養(yǎng)殖水環(huán)境的應(yīng)激機制性, 利用基因工程提高克氏原螯蝦的耐鹽性,培育出適合在鹽化土地上生長的克氏原螯蝦品種是有效利用鹽堿化土地對于提高鹽堿地的克氏原螯蝦產(chǎn)量具有積極的指導(dǎo)作用。方法本實驗通過對淡水中生長的克氏原螯蝦（A型）和鹽水中生長的克氏原螯蝦（B型）進行Solexa高通量測序,構(gòu)建了其小RNA文庫,從而獲得了差異化的miRNA表達譜。通過分析測序結(jié)果,篩選出了受鹽脅迫下上調(diào)和下調(diào)的miRNA,并利用qRT-PCR的方法對測序的結(jié)果進行了驗證。結(jié)果：（1）Solexa測序一共獲得了469,044個長度為18-30 nt的小RNA序列。根據(jù)生物信息學(xué)的方法篩選長度在18-22nt的RNA,和十足目的動物基因組的比對,我們獲得了78種在整個動物界保守的miRNA,在這78種miRNA中8種在A型螯蝦的體內(nèi)特異性表達,18種miRNA在B型螯蝦的體內(nèi)特異性的表達... 

【文章來源】：南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1 克氏原螯蝦概況和研究綜述
        1.1 克氏原螯蝦生物學(xué)簡介
        1.2 克氏原螯蝦的經(jīng)濟價值
        1.3 鹽堿地克氏原螯蝦養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀
    2 miRNA研究進展概述
        2.1 miRNA的定義及發(fā)現(xiàn)歷程
        2.2 miRNA的加工成熟過程及作用機制
        2.3 miRNA的生物學(xué)意義及前景展望
第二章 克氏原螯蝦在鹽脅迫條件下差異化的microRNA表達譜的研究
    2.1 實驗材料
    2.2 主要試劑與儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 A型和B型克氏原螯蝦總RNA的提取
        2.3.2 Solexa測序
        2.3.3 miRNA的qRT-PCR定量檢測
        2.3.4 鹽度漸變(馴化)條件下的重復(fù)驗證
    2.4 數(shù)值的統(tǒng)計分析
    2.5 實驗結(jié)果
        2.5.1. 使用Solexa測序技術(shù)構(gòu)建克氏原螯蝦的小RNA文庫
        2.5.2 克氏原螯蝦的miRNA表達譜
        2.5.3 使用qRT-PCR技術(shù)確證克氏原螯蝦miRNA
        2.5.4 鹽度漸變實驗結(jié)果
    2.6 討論
第三章 不同蕪萍餌料組分對兩種社群規(guī)模的螯蝦生長影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 實驗分組
        3.1.3 實驗條件
        3.1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 最小社群實驗結(jié)果分析
        3.2.2 較大社群實驗結(jié)果分析
        3.2.3 小社群和較大社群的比較
    3.3 討論
第四章 小群體的規(guī)模對克氏原螯蝦生存和生長的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 實驗分組
        4.1.3 實驗方法
        4.1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 死亡事件發(fā)生率及個體存活率結(jié)果分析
        4.2.2 個體生長指標(biāo)結(jié)果及分析
    4.3. 討論
        4.3.1 實驗組群體規(guī)模設(shè)置
        4.3.2 各群體死亡事件發(fā)生率分析
        4.3.3 生長狀況分析
    4.4. 小結(jié)和應(yīng)用
        4.4.1 小結(jié)
        4.4.2 應(yīng)用
第五章 總結(jié)與展望
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間項目經(jīng)歷
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[4]小龍蝦的市場經(jīng)濟價值論述[J]. 鄧澤召.  現(xiàn)代商貿(mào)工業(yè). 2010(13)
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[6]克氏原螯蝦繁殖生物學(xué)研究[J]. 龔世園,呂建林,孫瑞杰,李浪平,何緒剛.  淡水漁業(yè). 2008(06)
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本文編號：3552167