克氏原螯蝦WSD的PCR診斷及組織病理損傷研究
發(fā)布時(shí)間:2021-12-24 00:08
【目的】近年來白斑綜合癥病毒(WSSV)嚴(yán)重威脅著克氏原螯蝦(Procambarus clarkii)的健康養(yǎng)殖,本研究旨在確定一例克氏原螯蝦暴發(fā)性死亡的病因!痉椒ā繉疾∥r進(jìn)行臨床癥狀觀察,取其鰓、心臟、肝胰腺、腸道、肌肉、眼睛等組織分別進(jìn)行套氏PCR檢測和組織病理學(xué)觀察!窘Y(jié)果】患病蝦臨床剖解特征表現(xiàn)為腸段中空無食物,腸壁透明,腸管較細(xì);套氏PCR結(jié)果顯示患病蝦體內(nèi)WSSV呈陽性;PCR產(chǎn)物測序并進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育樹分析顯示,該基因序列與WSSV的核苷酸序列同源性為100%,進(jìn)一步證實(shí)本次患病克氏原螯蝦體內(nèi)攜帶WSSV。病理組織切片顯示,該病靶器官主要為肝胰腺、心臟、鰓、腸道,患病蝦均表現(xiàn)為中度至重度壞死性肝胰腺炎、中度充血性鰓炎、中度壞死性心肌炎、以及輕度腸炎,肌肉組織未發(fā)現(xiàn)明顯病變!窘Y(jié)論】推斷造成本次克氏原螯蝦大量死亡的原因?yàn)閃SSV感染。
【文章來源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(02)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
PCR檢測WSSV
患病蝦組織病理學(xué)表現(xiàn)
將-80℃保存的鰓、肝胰腺、腸道和肌肉進(jìn)行混合勻漿,提取混合組織的DNA,用WSSV外引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳,結(jié)果顯示,所有樣品均擴(kuò)增出一條1 447 bp的特異性條帶(圖2A)。接著使用WSSV內(nèi)引物對樣品進(jìn)行套氏PCR檢測,所有樣品均擴(kuò)增出一條約940 bp的條帶(圖2B)。套氏PCR產(chǎn)物經(jīng)成都擎科梓熙生物技術(shù)有限公司進(jìn)行序列測定后,獲得長度為941 bp的序列。通過BLAST比對,顯示該序列與GenBank中WSSV有100%的同源性,確定本次患病克氏原螯蝦體內(nèi)檢測病毒為WSSV陽性。圖2 PCR檢測WSSV
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]湖北省潛江地區(qū)克氏原螯蝦白斑綜合征PCR診斷及組織病理學(xué)觀察[J]. 何琦瑤,汪開毓,劉韜,劉紹春,賀揚(yáng),葉彩燕,何晟毓,秦振陽,謝恒. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2018(01)
[2]對蝦白斑綜合癥病毒的概述[J]. 馬曉燕,李鵬,嚴(yán)潔,周開亞. 南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(04)
[3]白斑綜合征病毒江蘇分離株變異區(qū)和缺失區(qū)基因的序列比較[J]. 薛暉,王曉豐,丁正峰,唐建清. 中國水產(chǎn)科學(xué). 2011(05)
[4]檢測克氏原螯蝦白斑綜合征病毒(WSSV)的巢式PCR方法的建立與初步應(yīng)用[J]. 李文杰,周國勤,朱菲莉,王衛(wèi)東,周國平. 南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(02)
[5]克氏原螯蝦暴發(fā)性疾病病原及其傳播途徑的初步研究[J]. 陳昌福,楊軍,劉遠(yuǎn)高,何廣文. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(06)
[6]人工養(yǎng)殖克氏原螯蝦中出現(xiàn)的問題與對策[J]. 陳昌福. 漁業(yè)致富指南. 2008(17)
[7]蝦白斑綜合征病毒的研究進(jìn)展[J]. 于力,李慶章. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(06)
[8]白斑綜合征病毒浙江分離株在動(dòng)物模型克氏原螯蝦組織中的分布[J]. 魏克強(qiáng). 細(xì)胞生物學(xué)雜志. 2006(06)
[9]對蝦白斑綜合癥病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)VP24的定位研究[J]. 謝希賢,楊豐. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2006(03)
[10]家蠶蛹表達(dá)的重組Vp28疫苗對克氏原螯蝦的抗病毒保護(hù)效應(yīng)[J]. 魏克強(qiáng),許梓榮. 實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào). 2005(03)
碩士論文
[1]HD-3復(fù)方中草藥對凡納濱對蝦免疫酶影響和抗WSSV感染分析[D]. 景亞運(yùn).大連海洋大學(xué) 2016
本文編號(hào):3549449
【文章來源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(02)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
PCR檢測WSSV
患病蝦組織病理學(xué)表現(xiàn)
將-80℃保存的鰓、肝胰腺、腸道和肌肉進(jìn)行混合勻漿,提取混合組織的DNA,用WSSV外引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳,結(jié)果顯示,所有樣品均擴(kuò)增出一條1 447 bp的特異性條帶(圖2A)。接著使用WSSV內(nèi)引物對樣品進(jìn)行套氏PCR檢測,所有樣品均擴(kuò)增出一條約940 bp的條帶(圖2B)。套氏PCR產(chǎn)物經(jīng)成都擎科梓熙生物技術(shù)有限公司進(jìn)行序列測定后,獲得長度為941 bp的序列。通過BLAST比對,顯示該序列與GenBank中WSSV有100%的同源性,確定本次患病克氏原螯蝦體內(nèi)檢測病毒為WSSV陽性。圖2 PCR檢測WSSV
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]湖北省潛江地區(qū)克氏原螯蝦白斑綜合征PCR診斷及組織病理學(xué)觀察[J]. 何琦瑤,汪開毓,劉韜,劉紹春,賀揚(yáng),葉彩燕,何晟毓,秦振陽,謝恒. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2018(01)
[2]對蝦白斑綜合癥病毒的概述[J]. 馬曉燕,李鵬,嚴(yán)潔,周開亞. 南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(04)
[3]白斑綜合征病毒江蘇分離株變異區(qū)和缺失區(qū)基因的序列比較[J]. 薛暉,王曉豐,丁正峰,唐建清. 中國水產(chǎn)科學(xué). 2011(05)
[4]檢測克氏原螯蝦白斑綜合征病毒(WSSV)的巢式PCR方法的建立與初步應(yīng)用[J]. 李文杰,周國勤,朱菲莉,王衛(wèi)東,周國平. 南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(02)
[5]克氏原螯蝦暴發(fā)性疾病病原及其傳播途徑的初步研究[J]. 陳昌福,楊軍,劉遠(yuǎn)高,何廣文. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(06)
[6]人工養(yǎng)殖克氏原螯蝦中出現(xiàn)的問題與對策[J]. 陳昌福. 漁業(yè)致富指南. 2008(17)
[7]蝦白斑綜合征病毒的研究進(jìn)展[J]. 于力,李慶章. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(06)
[8]白斑綜合征病毒浙江分離株在動(dòng)物模型克氏原螯蝦組織中的分布[J]. 魏克強(qiáng). 細(xì)胞生物學(xué)雜志. 2006(06)
[9]對蝦白斑綜合癥病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)VP24的定位研究[J]. 謝希賢,楊豐. 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2006(03)
[10]家蠶蛹表達(dá)的重組Vp28疫苗對克氏原螯蝦的抗病毒保護(hù)效應(yīng)[J]. 魏克強(qiáng),許梓榮. 實(shí)驗(yàn)生物學(xué)報(bào). 2005(03)
碩士論文
[1]HD-3復(fù)方中草藥對凡納濱對蝦免疫酶影響和抗WSSV感染分析[D]. 景亞運(yùn).大連海洋大學(xué) 2016
本文編號(hào):3549449
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