發(fā)布時(shí)間：2021-12-16 18:31

　　蛋白質(zhì)的可逆磷酸化作用對(duì)于許多生物的生長(zhǎng)發(fā)育起著至關(guān)重要的調(diào)控作用,其中蛋白激酶和蛋白磷酸酶分別起著磷酸化和去磷酸化作用,蛋白磷酸酶-1（PP-1）是一種廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi)的蛋白磷酸酶,它能夠?qū)⒔z/蘇氨酸蛋白底物去磷酸化。在本論文中,我們將重點(diǎn)研究和闡述PP-1的催化亞基C的異構(gòu)體γ（Gama）基因（PP-1cy）在動(dòng)物胚胎的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的功能與作用。首先,我們運(yùn)用RACE克隆技術(shù)在金魚(yú)中克隆出丫基因的cDNA全長(zhǎng)；然后,運(yùn)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)γ基因在金魚(yú)不同胚胎發(fā)育時(shí)期和不同組織中]mRNA水平的表達(dá)；最后,在金魚(yú)受精卵中注射PP-1Cγ的Morpholino Oligomers （MO）或過(guò)表達(dá)PP-1cγ的質(zhì)粒載體,以此來(lái)分析研究PP-1cy在金魚(yú)的胚胎發(fā)育中所扮演的功能角色。具體研究結(jié)果如下：（1）金魚(yú)中PP-1cy基因的的cDNA全長(zhǎng)為1078bp,其中編碼區(qū)972bp,編碼一種含323個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。PP-1cγ蛋白的氨基酸序列進(jìn)行不同物種同源性比對(duì)結(jié)果表明：該蛋白序列與斑馬魚(yú)的同源相似度為96.9%,與小鼠的為96.5%,與人的為96.5%。該結(jié)果表明了PP-1c... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
第一章 前言
    1 蛋白質(zhì)磷酸化與去磷酸化
    2 蛋白激酶
    3 蛋白磷酸酶
        3.1 蛋白磷酸酶-1(PP-1)
        3.2 PP-1的催化亞基(PP-1c)
        3.3 蛋白磷酸酶-2A(PP-2A)
    4 本文研究概況
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 人工受精
        2.2 顯微注射
        2.3 總量RNA的提取
        2.4 反轉(zhuǎn)錄cDNA的獲得
        2.5 RACE克隆
        2.6 顯微鏡觀察及拍照
        2.7 石蠟切片
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
    1. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.1 PP-1cγ在金魚(yú)中全長(zhǎng)cDNA的克隆及同源分析
        1.2 PP-1cγ的mRNA水平表達(dá)分析
        1.3 PP-1cγ的顯微注射表型分析
    2. 結(jié)果討論
        2.1 金魚(yú)PP-1cγ cDNA的克隆以及其在胚胎不同時(shí)期及組織中的表達(dá)
        2.2 PP-1cγ基因在金魚(yú)胚胎發(fā)育不同時(shí)期中的功能研究
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PP-1催化亞基（PP-1c）在成體小白鼠不同組織器官中的分化表達(dá)與定位[J]. 劉文彬,聶磊,惠珊珊,胡小慧,馬慧,王玲,周磊,肖亞梅,李萬(wàn)程.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2011(05)
[2]金魚(yú)PP2A調(diào)節(jié)亞基PR55γ基因的克隆及表達(dá)分析[J]. 趙珺瓊,謝斯思,陳培超,鄒立軍,劉文彬,肖亞梅,劉少軍,劉筠,李萬(wàn)程.  水生生物學(xué)報(bào). 2011(03)
[3]PP2A-Aα/β在金魚(yú)及斑馬魚(yú)發(fā)育中的分化表達(dá)模式[J]. 劉姣,付淑君,胡雯峰,劉方元,傅永明,唐鴻釗,劉文彬,肖亞梅,劉筠,李萬(wàn)程.  水生生物學(xué)報(bào). 2011(03)
[4]PP-1與PP-2A在金魚(yú)眼（球）不同組織/細(xì)胞中的表達(dá)模式[J]. 劉文彬,胡小慧,惠珊珊,周潔,劉姣,肖亞梅,劉少軍,李萬(wàn)程.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2010(12)
[5]蛋白磷酸酶-2Ac在不同倍性魚(yú)6種組織中的分化表達(dá)模式[J]. 劉文彬,王道,周潔,肖亞梅,劉少軍,劉筠,李萬(wàn)程.  水生生物學(xué)報(bào). 2009(06)
[6]蛋白磷酸酶PP-1c在不同倍性魚(yú)6種組織中的分化表達(dá)模式[J]. 劉文彬,劉姣,馬海立,鄭春兵,付虎,袁丹,肖亞梅,劉少軍,劉筠,李萬(wàn)程.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2009(05)
[7]Ser/Thr蛋白磷酸酶PPP家族結(jié)構(gòu)研究新進(jìn)展[J]. 王柏婧,魏群.  中國(guó)科學(xué)（C輯:生命科學(xué)）. 2008(07)
[8]Ⅰ型蛋白磷酸酶研究進(jìn)展[J]. 王柏婧,謝秀杰,魏群.  微生物學(xué)報(bào). 2008(02)
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