中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）又稱河蟹、毛蟹,是我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖品種,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。但是,由于養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大,其病害也越來(lái)越嚴(yán)重,其中“顫抖病”作為中華絨螯蟹最嚴(yán)重的病害之一,已經(jīng)對(duì)其養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。王文等通過(guò)前期的研究證實(shí)了螺原體為中華絨螯蟹“顫抖病”的病原體,并命名為中華絨螯蟹螺原體（Spiroplasma eriocheiris）。前期研究表明,中華絨螯蟹螺原體通過(guò)鰓或表皮進(jìn)入體內(nèi),侵染其靶細(xì)胞—血淋巴細(xì)胞,并通過(guò)血液循環(huán)進(jìn)而侵染結(jié)締、神經(jīng)等組織引起中華絨螯蟹附肢顫抖。Tetraspanin屬于四次跨膜蛋白超家族（TM4SF）,參與基本的細(xì)胞過(guò)程,包括細(xì)胞生長(zhǎng)、粘附和分化,參與識(shí)別某些病原體的感染,在免疫反應(yīng)中發(fā)揮著重要的作用。本課題組前期利用iTraq技術(shù)篩選了中華絨螯蟹螺原體侵染前后中華絨螯蟹血淋巴細(xì)胞中差異表達(dá)的蛋白,其中Tetraspanin在中華絨螯蟹螺原體感染后表達(dá)量顯著降低。本碩士論文在此研究基礎(chǔ)上通過(guò)RACE技術(shù)擴(kuò)增得到了中華絨螯蟹Tetraspanin（EsTetraspanin）基因的全長(zhǎng),進(jìn)而分析了其序列特征、表達(dá)... 

【文章來(lái)源】：南京師范大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Tetraspanins富集的微區(qū)

圖 2.1 EsTetraspanin 的核酸序列和對(duì)應(yīng)的氨基酸序列。起始（atg）和終止（tag）密碼子用紅色標(biāo)記。 跨膜區(qū)域用粗體和斜體表示。 SEL 結(jié)構(gòu)加下劃線，LEL 結(jié)構(gòu)加陰影。 CCG基序用方框標(biāo)出，9 個(gè)潛在的棕櫚酰化位點(diǎn)用藍(lán)色標(biāo)出。Fig. 2.1 Nucleotide and deduced amino acid sequences (below) of EsTetraspanin cDNA from E.sinensis. Start (atg) and stop (tag) codon are marked in red. Transmembrane region is bold andindicated in italics. The SEL domain is underlined and the LEL domain is shaded. The CCG motifis boxed and 9 potential palmitoylation sites are in blue.

圖 2.2 EsTetraspanin 的氨基酸序列模型。每個(gè)圓圈中的字母代表一個(gè)氨基酸，包括 SEL，LEL，跨膜區(qū)和 N-，C-末端片段。保守基序（CCG）和潛在的棕櫚�；稽c(diǎn)突出顯示。Fig. 2.2 Model of sequence of EsTetraspanin in single-letter amino acid code of its loop domains,including SEL, LEL, transmembrane region and the N-, C- terminal fragments. Conserved motif(CCG) and potential palmitoylation sites are highlighted.2.3.3 多序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析BLAST 分析顯示 EsTetraspanin 與其他甲殼類動(dòng)物之間存在顯著的序列相似性（圖 2.3）。為了分析 EsTetraspanin 與其他 Tetraspanins 之間的進(jìn)化關(guān)系，我們構(gòu)建了一個(gè)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。如圖 2.4 所示，結(jié)果顯示 EsTetraspanin 在進(jìn)化上主要分為兩支。EsTetraspanin 主要與甲殼動(dòng)物，包括擬穴青蟹（Scyllaparamamosain）、羅氏沼蝦（Macrobrachiumrosenbergii）、南美白對(duì)蝦（Penaeusvannamei）和中國(guó)對(duì)蝦（Penaeuschinensis）等的 Tetraspanins 分為一支，而其他物種的 Tetraspanins則分為另一支。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]中華絨螯蟹螺原體侵染羅氏沼蝦血細(xì)胞過(guò)程中互作蛋白的篩選及功能研究[D]. 修云吉.南京師范大學(xué) 2015

碩士論文
[1]蜜蜂螺原體幾丁質(zhì)酶、幾丁質(zhì)脫乙酰酶基因的研究及螺原體對(duì)意蜂抗氧化相關(guān)酶的影響[D]. 危蓉萍.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]七鰓鰻CD82的原核表達(dá)、抗體制備及相關(guān)免疫組織化學(xué)研究[D]. 張曉萍.遼寧師范大學(xué) 2016
[3]中華絨螯蟹螺原體侵染兩種靶細(xì)胞模型的建立及互作相關(guān)蛋白的初步篩選[D]. 姚偉.南京師范大學(xué) 2013



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