肝臟是魚類的主要解毒器官,大部分外源及內(nèi)源性物質(zhì)在肝臟內(nèi)進(jìn)行代謝,因此極易受到多種肝毒物的損害。研究表明,許多化學(xué)物質(zhì)可以導(dǎo)致魚類的肝損傷。近年來,以肝膽體積及顏色異常為特征的"肝膽綜合癥"頻被報道,這是一種非傳染性疾病,發(fā)病率高,影響面積廣,嚴(yán)重影響了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。目前還沒有有效治療該疾病的藥物,因此,探尋防治魚類肝膽疾病的有效藥物具有非常重要的意義。本實驗通過體外模型及在體模型,探討枸杞多糖對四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷的保護(hù)作用。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:1、精密肝切片厚度及培養(yǎng)基pH對肝切片活力的影響:設(shè)置切片的厚度（200 μm、300 μm、400 μm 及 500 μm）及培養(yǎng)基 pH（6.8、7.0 及 7.2）,培養(yǎng) 0、8、16、24 及48小時后收集培養(yǎng)上清及切片。測定上清GOT、GPT和LDH活性和肝切片勻漿ATP含量。結(jié)果顯示:切片厚度為300 μm,pH為7.0時,可在培養(yǎng)基中保持活力>16 h,綜合上述實驗結(jié)果,肝切片的制備及培養(yǎng)條件設(shè)定為:300 μm,pH 7.0。2、肝損傷模型的構(gòu)建:用不同濃度的四氯化碳（4、8、12、16及32 mM）損傷肝切片... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１不同切片厚度在不同時間段對切片ＡＴＰ?（Ａ）、ＧＯＴ?（Ｂ）、ＧＰＴ?（Ｃ）和ＬＤＨ??（Ｄ）的影響??Ｆｉｇ．?２－１?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?出?ｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｌｉｃ?貨?ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ?ｏｎ?化?ｅ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ＡＴＰ?（Ａ），?ＧＯＴ?（Ｂ），?ＧＰＴ?（Ｃ）?ａｎｄ??

ｔｌｉｎｅ／ｈ?ｔｉｍｅ／ｈ??圖２－１不同切片厚度在不同時間段對切片ＡＴＰ?（Ａ）、ＧＯＴ?（Ｂ）、ＧＰＴ?（Ｃ）和ＬＤＨ??（Ｄ）的影響??Ｆｉｇ．?２－１?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?出?ｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｌｉｃ?貨?ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ?ｏｎ?化?ｅ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ＡＴＰ?（Ａ），?ＧＯＴ?（Ｂ），?ＧＰＴ?（Ｃ）?ａｎｄ??ＬＤＨ?（Ｄ）?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅｓ??注；數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示（ｎ＝３）；?Ｘ，ｙ，?ｚ表示在每個時間段不同巧度切片時的差異性ｉ?ａ，?ｂ，ｃ表??示每一切片巧度在不同培養(yǎng)時間的差異性；下同??Ｎｏｔｅ：?Ｖａｌｕｅｓ?ａｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ａｓ?ｍｅａｎｉＳＤ?（ｎ三３）．?Ｘ，?％?Ｚ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?化ｉｃｋｎｅｓｓｅｓ?ａｔ??ｖａｒｉｏｕｓ?ｔｉｍｅ?ｐｏｉｎｔ；?ａ，?ｂ，?ｃ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｔｉｍｅｓ?ａｔ?ｅａｃｈ?ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ；?Ｔｈｅ?ｓａｍｅ??ｂｅｌｏｗ??２．２不同ｐＨ對切片的影響??不同的培養(yǎng)ｐＨ對切片活力的影響如圖２－２所示。培養(yǎng)１６?ｈ，ｐＨ?７．２條件下??切片的ＡＴＰ消耗量顯著升高，說明在堿性環(huán)下，切片的活性顯著降低。??在ｐＨ?６．８和７．０條件下

２．１?ｅｃｕ對切片活力的影響??ＡＴＰ是檢測細(xì)胞代謝活力的重要指標(biāo)，在本實驗中用來評價不同濃度的ＣＣｋ??對切片活力的影響（圖３－１）。與空白組相比，經(jīng)過４?ｈ的共解育后，１６?ｍＭＣＣｋ??組ＡＴＰ的婿耗量顯著降低，表明１６１１１１＾［〇：心對切片產(chǎn)生了顯著地致毒作用，導(dǎo)??致了細(xì)胞代謝受阻，功能受損。??７００?１??１１１薩自??｜。。１１１圏圍圍圏圍??Ｃｔｒｌ?４?８?１２?１６?３２??ＣＣｂ／（ｍＭ）??圖３－１?ＣＣＩ４對ＡＴＰ含量的影響??Ｆｉｇ．?３－１?Ｅｆｆｅ別Ｓ?ｏｆ?ｃａｒｂｏｎｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ?０打?ＡＴＰ?ｃｏｎｔｅｎｔ．??注：數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示（ｎ＝３）；與空白組相比較，＊表示差異顯著（尸＜０．０５），＃表示差昇極顯??著（尸＜０．０１）；下同??Ｎ饑ｅ：?Ｖａｌｕｅｓ?ａｒｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ?ａｓ?ｍｅａｎ±?ＳＤ?（ｎ＝３）．?＊戶＜０．０５；?＃戶＜０．０１，ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉ化化己?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ；?Ｔｈｅ?ｓａｍｅ??ｂｅｌｏｗ??２．２?ＣＣＩ４?對＂ＧＯＴ、ＧＰＴ、ＡＫＰ?串日?ＬＤＨ?的影口向??１８??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]黃藥子配伍甘草對氧化應(yīng)激及大鼠肝臟CYP1A2、CYP2E1蛋白表達(dá)影響的研究[D]. 劉嬌.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[3]枸杞多糖的提取及其水解物的研究[D]. 李丹丹.齊魯工業(yè)大學(xué) 2014
[4]NF-kB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在H-ras12V轉(zhuǎn)基因小鼠肝腫瘤發(fā)生中的作用[D]. 陳紅.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2013
[5]細(xì)菌CYP450數(shù)據(jù)庫構(gòu)建與進(jìn)化分析[D]. 金超慧.上海交通大學(xué) 2013
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[10]CYP450組合探針模型的建立及其應(yīng)用于快速篩選中藥對CYP450的誘導(dǎo)作用[D]. 王丹.中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2008



本文編號：3525070