發(fā)布時(shí)間：2021-11-23 12:36

　　龍須菜（Gracilaria lemaneiformis）是一種重要的產(chǎn)瓊膠經(jīng)濟(jì)海藻，原產(chǎn)于山東和遼寧，在我國已成為繼海帶和紫菜后的第三大栽培海藻。隨著龍須菜栽培業(yè)的不斷發(fā)展，對(duì)龍須菜種質(zhì)提出了更高的要求，研究者們先后選育出耐熱品種981和07-2，使得龍須菜品質(zhì)得到了不斷改良，其耐高溫性能也不斷提高，帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)生態(tài)效益。然而，在龍須菜大規(guī)模栽培中，這兩個(gè)耐高溫品系也出現(xiàn)了種質(zhì)退化現(xiàn)象，為此，迫切需要研究龍須菜在高溫脅迫下的響應(yīng)機(jī)制，為選育性狀優(yōu)良、耐高溫性強(qiáng)的龍須菜新品系奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)室前期通過酵母雙雜交系統(tǒng)篩選高溫脅迫條件下鈣調(diào)素（CaM）結(jié)合蛋白，得到了金屬蛋白酶（metalloproteinase of Gracilaria lemaneiformis, GlMP）的表達(dá)序列標(biāo)簽，表明金屬蛋白酶可能是龍須菜CaM信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的一員，在龍須菜響應(yīng)高溫脅迫中發(fā)揮作用。本論文在此基礎(chǔ)上，首次克隆龍須菜的GlMP基因，并研究其在高溫脅迫下的表達(dá)模式，為探討龍須菜對(duì)高溫脅迫下的信號(hào)傳導(dǎo)途徑打下基礎(chǔ)，并為龍須菜耐高溫品系的選育提供可用的基因信息。本研究以野生型、981和0... 

【文章來源】：中國海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 龍須菜簡(jiǎn)介
    2 鈣-鈣調(diào)素信號(hào)系統(tǒng)
        2.1 信號(hào)傳導(dǎo)中的鈣
        2.2 鈣調(diào)素
        2.3 鈣調(diào)素結(jié)合蛋白
    3 金屬蛋白酶的研究進(jìn)展
    4 酵母雙雜交技術(shù)
    5 本論文研究目的及意義
第二章 龍須菜金屬蛋白酶基因的克隆及其在熱激下的表達(dá)模式分析和與CaM 間的相互作用驗(yàn)證
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 龍須菜 RNA 的提取
        2.2 龍須菜 DNA 的提取
        2.3 龍須菜 GlMP 基因克隆及分析
        2.4 Southern blotting 分析
        2.5 龍須菜 GlMP 與 CaM 相互作用的雜交驗(yàn)證
        2.6 高溫脅迫下野生型、981 和 07-2 三種龍須菜 GlMP 與 CaM 的轉(zhuǎn)錄分析
    3 討論
第三章 龍須菜高溫脅迫下 CaM 結(jié)合蛋白的篩查及相關(guān)生物信息學(xué)分析
    第一節(jié) 龍須菜高溫脅迫下 CaM 結(jié)合蛋白的篩查和分析
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果與討論
            2.1 誘餌質(zhì)粒 pGBKT7 – CaM 和 pGADT7-cDNA 文庫質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化
            2.2 酵母雙雜交
            2.3 陽性克隆的篩選及相關(guān)生物信息學(xué)分析
    第二節(jié) 龍須菜 GlMP 與 CaM 結(jié)合結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)及驗(yàn)證
        1 材料和方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑和儀器
            1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果與分析
            2.1 GlMP 開放閱讀框的克隆
            2.2 GlMP_F,GlMP_M ,GlMP_L和 GlMP_W與 CaM 結(jié)合驗(yàn)證
        3 討論
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]江蘺屬海藻龍須菜的基礎(chǔ)研究與大規(guī)模栽培[J]. 張學(xué)成,費(fèi)修綆,王廣策,林祥志,陳偉洲,隋正紅,徐滌,臧曉南.  中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(05)
[2]龍須菜新品系07-2的篩選及性狀分析[J]. 孟琳,徐滌,陳偉洲,張學(xué)成.  中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(S1)
[3]東海原甲藻鈣調(diào)蛋白的分離純化及鑒定[J]. 郭彩華,劉靜雯,盧珍華,詹玲玲.  集美大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(01)
[4]藻類高溫脅迫分子響應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 臧曉南,張學(xué)成,張璐,劉濱,任雪瑩,徐滌.  武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版). 2008(06)
[5]植物肌醇-1-磷酸合成酶的生物信息學(xué)分析[J]. 卓加金,汪曉峰.  生物技術(shù)通報(bào). 2008(S1)
[6]鈣不依賴性鈣調(diào)素結(jié)合蛋白的研究進(jìn)展[J]. 韋慧彥,郭振清,崔素娟.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2007(02)
[7]龍須菜海水栽培技術(shù)[J]. 陳偉洲.  科學(xué)養(yǎng)魚. 2006(12)
[8]植物中Ca2+調(diào)節(jié)的蛋白激酶的研究進(jìn)展[J]. 蕭蓓蕾,馮建英,賈�；�,李冬梅.  宜春學(xué)院學(xué)報(bào). 2006(04)
[9]龍須菜的有機(jī)酸組成及其細(xì)胞毒活性[J]. 梅文莉,戴好富,徐軍田.  中國海洋藥物. 2006(02)
[10]植物金屬蛋白酶的研究進(jìn)展[J]. 易博,黃蓓蓓,陸倍倍,余曉靜,陳萬生.  藥學(xué)實(shí)踐雜志. 2006(01)

博士論文
[1]植物鈣調(diào)素結(jié)合蛋白激酶的基因分離、鑒定及生物學(xué)功能分析[D]. 馬力.武漢大學(xué) 2004

碩士論文
[1]龍須菜高溫脅迫響應(yīng)的鈣調(diào)素信號(hào)傳導(dǎo)途徑的研究[D]. 張璇.中國海洋大學(xué) 2012



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