粘附是致病菌對(duì)宿主進(jìn)行感染的關(guān)鍵,病原菌通過粘附因子可在宿主的體表或特定組織定植,入侵增殖并發(fā)揮毒力。近年來,粘附已經(jīng)被認(rèn)為是致病菌的一個(gè)毒力因子。關(guān)于臨床病原菌粘附的研究得到廣泛關(guān)注,但水產(chǎn)病原菌粘附及粘附機(jī)制的研究還相當(dāng)欠缺。本研究以水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中重要的病原菌嗜水氣單胞菌W菌株為研究對(duì)象,首先采用改良后的間接ELISA法研究了嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）的粘附特性。結(jié)果表明,嗜水氣單胞菌對(duì)鰻鱺的表皮粘液具有良好的粘附作用,且其粘附能力受初始菌液的濃度、溫度、孵育時(shí)間、pH值、離子濃度以及營(yíng)養(yǎng)要素等環(huán)境因子影響。在充分了解嗜水氣單胞菌粘附特性的基礎(chǔ)上,通過轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽技術(shù)構(gòu)建嗜水氣單胞菌野生型菌株W的突變庫(kù),并從突變庫(kù)中篩選到9株粘附能力穩(wěn)定下降的突變菌株。PCR鑒定證明這些突變株為轉(zhuǎn)座子mini-Tn10插入突變,southern雜交證明這些突變株中mini-Tn10均為單位點(diǎn)插入。Genome walking技術(shù)擴(kuò)增突變株插入位點(diǎn)的側(cè)翼序列,經(jīng)過克隆、測(cè)序得到側(cè)翼基因序列信息。通過序列比對(duì)分析,結(jié)果顯示:121號(hào)突變株轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)均為flgC基因,45號(hào)... 

【文章來源】：集美大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

OD492與菌濃度的關(guān)系

圖 2.1 OD492與菌濃度的關(guān)系2.4.2 菌濃度與黏附量的關(guān)系由圖 2.2 可知，嗜水氣單胞菌對(duì)鰻鱺表皮黏液的黏附量隨著菌濃度的升高而逐漸增大直至接近飽和。菌濃度（x）與黏附量(y)的擬合曲線為 y = 0.135Ln(x) -0.936（R2= 0.986）。由此計(jì)算出嗜水氣單胞菌對(duì)鰻鱺表皮黏液的最大黏附量( em)和分離常數(shù)( kx)分別為 1×107CFU /mL 和 1.75×108CFU /mL。

集美大學(xué)碩士學(xué)位論文 嗜水氣單胞菌粘附相關(guān)基因鑒定及其功2.4.3 孵育時(shí)間對(duì)黏附的影響由圖 2.3 可知，嗜水氣單胞菌對(duì)鰻鱺表皮黏液的黏附量受孵育時(shí)間影響顯著，言隨孵育時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后降低的趨勢(shì)，并在孵育時(shí)間為 150min 達(dá)到峰值，黏附量極顯著高于其他孵育時(shí)間的黏附量（P < 0.01），其后黏附量隨著孵育時(shí)間的延長(zhǎng)而下降。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]嗜水氣單胞菌成膜相關(guān)基因鑒定及其功能研究[D]. 毛秀秀.集美大學(xué) 2011
[2]嗜水氣單胞菌J-1株W菌毛的提純、特性分析及其基因定位[D]. 朱興國(guó).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2000



本文編號(hào)：3495691