溫度是影響魚類存活、攝食、生長、發(fā)育、繁殖等過程的重要環(huán)境因子。魚類對溫度的耐受能力決定了其時(shí)空分布范圍。隨著全球氣候變化和極端氣象的頻發(fā)，水生生物的耐熱性研究及耐熱品種的培育具有非常重要的研究意義和生產(chǎn)價(jià)值。然而，有關(guān)海水魚類的耐熱性研究還十分有限，耐熱性指標(biāo)也尚無統(tǒng)一的可靠標(biāo)準(zhǔn)。褐牙鲆（Paralichthys olivaceus Temminck&Schlegel，1846）是我國重要的海水養(yǎng)殖魚類，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，養(yǎng)殖區(qū)域也不斷南移。但受到夏季高溫期死亡頻發(fā)的影響，其養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)屢受損失。大西洋牙鲆（Paralichthys dentatusL.，1766）是大西洋海岸的重要漁獲種，具有更好的高溫耐受性。兩者的雜交子一代P. olivaceus×P. dentatus （以下簡稱雜交鲆）繼承了親本優(yōu)良的經(jīng)濟(jì)性狀，同時(shí)表現(xiàn)出生長快、耐高溫的特性。為了比較高溫對褐牙鲆和雜交鲆的影響，闡明雜交鲆優(yōu)于親本的耐熱性狀，同時(shí)豐富海水魚類耐熱性研究，充實(shí)種間雜交遺傳理論，為相關(guān)耐熱性育種研究提供一定的理論基礎(chǔ)，我們從組織水平、生理生化和hsp70基因表達(dá)量的水平研究了高溫對褐牙鲆各個(gè)... 

【文章來源】：中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院海洋研究所)山東省

【文章頁數(shù)】：144 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 魚類對溫度的感知和適應(yīng)
        1.1.1 魚類的溫度感受器
        1.1.2 魚類的體溫
        1.1.3 魚類對溫度適應(yīng)范圍的研究進(jìn)展
    1.2 魚類對溫度升高的響應(yīng)的研究進(jìn)展
        1.2.1 溫度升高對魚類存活率的影響
        1.2.2 溫度升高對魚類行為學(xué)的影響
        1.2.3 溫度升高對魚類組織結(jié)構(gòu)的影響
        1.2.4 溫度升高對魚類氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響
        1.2.5 溫度升高對魚類自身免疫反應(yīng)的影響
        1.2.6 溫度升高對魚類能量支出的影響
        1.2.7 熱休克蛋白 70 的研究進(jìn)展
    1.3 魚類熱致死機(jī)制的研究進(jìn)展
    1.4 水產(chǎn)動(dòng)物耐熱遺傳育種的研究進(jìn)展
    1.5 本研究的目的及意義
第二章 褐牙鲆對高溫的生態(tài)適應(yīng)性觀察
    2.1 研究背景
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和取樣
        2.2.3 主要儀器和試劑
            2.2.3.1 主要儀器
            2.2.3.2 主要試劑
        2.2.4 不同組織的石蠟切片
        2.2.5 酶的相對活力測定
            2.2.5.1 組織勻漿制備
            2.2.5.2 總蛋白的測定
            2.2.5.3 超氧化物歧化酶（SOD）的測定
            2.2.5.4 谷胱甘肽（GSH）的測定
            2.2.5.5 溶菌酶（LZM）的測定
            2.2.5.6 丙酮酸激酶（PK）的測定
        2.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測
            2.2.6.1 總 RNA 提取和 cDNA 第一條鏈的合成
            2.2.6.2 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
        2.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 褐牙鲆不同組織的組織學(xué)變化
        2.3.2 褐牙鲆各個(gè)組織中酶的相對活力變化
        2.3.4 褐牙鲆各個(gè)組織中 hsp70 基因表達(dá)量的變化
            2.3.4.1 褐牙鲆各個(gè)組織在 32℃下 hsp70 基因表達(dá)量的變化
            2.3.4.2 褐牙鲆在 32℃下不同時(shí)間的 hsp70 基因的組織表達(dá)差異
    2.4 討論
        2.4.1 高溫對褐牙鲆肝、腎和鰓的組織結(jié)構(gòu)影響最顯著
        2.4.2 高溫對褐牙鲆各個(gè)組織酶相對活力的影響
        2.4.3 不同組織 hsp70 表達(dá)量的變化
        2.4.4 鰓和肝是研究高溫脅迫的理想組織
第三章 慢性升溫對褐牙鲆、雜交鲆組織學(xué)、酶學(xué)及 hsp70 表達(dá)影響的研究
    3.1 研究背景
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和取樣
        3.2.3 主要儀器和試劑
        3.2.4 鰓組織的石蠟切片
        3.2.5 酶的相對活力測定
            3.2.5.1 過氧化氫酶（CAT）的測定
        3.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測
        3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 褐牙鲆、雜交鲆行為學(xué)變化及累計(jì)存活率分析
        3.3.2 褐牙鲆、雜交鲆鰓的組織學(xué)變化
        3.3.3 褐牙鲆、雜交鲆 SOD、CAT、LZM 和 PK 的變化
        3.3.4 褐牙鲆、雜交鲆 hsp70 基因表達(dá)量的變化
    3.4 討論
        3.4.1 雜交鲆累計(jì)存活率高于褐牙鲆
        3.4.2 慢性升溫模式下褐牙鲆的鰓組織受到嚴(yán)重的破壞
        3.4.3 慢性升溫模式下褐牙鲆、雜交鲆酶的相對活力變化差異
        3.3.4 慢性升溫對褐牙鲆和雜交鲆 hsp70 表達(dá)量的影響
        3.4.5 小結(jié)
第四章 急性升溫對褐牙鲆、雜交鲆組織學(xué)、酶學(xué)及 hsp70 表達(dá)影響的研究
    4.1 研究背景
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和取樣
        4.2.3 主要儀器和試劑
        4.2.4 組織切片及投射電鏡觀察
            4.2.4.1 透射電鏡樣品的處理
        4.2.5 酶的相對活力測定
        4.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測
        4.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 褐牙鲆、雜交鲆行為學(xué)變化及累計(jì)存活率分析
        4.3.2 褐牙鲆、雜交鲆鰓的組織學(xué)變化
        4.3.3 褐牙鲆、雜交鲆 SOD、GSH、LZM 和 PK 的變化
        4.3.4 褐牙鲆、雜交鲆 hsp70 基因表達(dá)量的變化
    4.4 討論
        4.4.1 急性升溫模式下褐牙鲆、雜交鲆行為學(xué)及累計(jì)存活率變化
        4.4.2 急性升溫模式下褐牙鲆、雜交鲆鰓的結(jié)構(gòu)變化
        4.4.3 急性升溫模式下褐牙鲆、雜交鲆酶的相對活力變化
        4.4.4 急性升溫模式下褐牙鲆、雜交鲆 hsp70 基因表達(dá)量變化
        4.4.5 小結(jié)
第五章 29℃下褐牙鲆、大西洋牙鲆和雜交鲆的相關(guān)酶活力及 hsp70/hsc70/hsp90 表達(dá)量的變化
    5.1 研究背景
    5.2 材料與方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和取樣
        5.2.3 主要儀器和試劑
            5.2.3.1 主要儀器
            5.2.3.2 主要試劑
        5.2.4 褐牙鲆、大西洋牙鲆及雜交鲆 hsp70/hsp90 基因克隆
            5.2.4.1 總 RNA 提取和 cDNA 第一條鏈合成
            5.2.4.2 hsp70/hsp90 基因部分 cDNA 序列獲得
            5.2.4.3 hsp70/hsp90 基因 cDNA 全序列獲得（RACE）
            5.2.4.4 hsp70/hsp90 基因序列分析及進(jìn)化樹構(gòu)建
        5.2.5 酶的相對活力測定
        5.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測
            5.2.6.1 總 RNA 提取和 cDNA 第一條鏈的合成
            5.2.6.2 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
        5.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 褐牙鲆、大西洋牙鲆、雜交鲆 hsp70/hsp90 基因克隆及序列分析
            5.3.1.1 hsp70 基因克隆及序列分析
            5.3.1.2 hsp90 基因克隆及序列分析
        5.3.2 褐牙鲆、大西洋牙鲆及雜交鲆 SOD、GSH、LZM 和 PK 的變化
        5.3.3 褐牙鲆、大西洋牙鲆及雜交鲆 hsp70/hsc70/hsp90 基因表達(dá)量的變化
    5.4 討論
        5.4.1 褐牙鲆、大西洋牙鲆和雜交鲆 hsp70/hsp90 基因 cDNA 序列高度保守
        5.4.2 29℃下褐牙鲆、大西洋牙鲆及雜交鲆酶的相對活力變化
        5.4.3 29℃下褐牙鲆、大西洋牙鲆及雜交鲆 hsp70/hsc70/hsp90 基因表達(dá)量變化
        5.4.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 主要研究結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
作者簡介
博士期間發(fā)表和完成的論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大菱鲆（Scophthalmus maximus）耐高溫品系選育及耐溫性能評估[J]. 馬愛軍,黃智慧,王新安,郭黎,雷霽霖,楊志,曲江波.  海洋與湖沼. 2012(04)
[2]褐牙鲆耐熱相關(guān)分子標(biāo)記篩選及遺傳多樣性分析[J]. 李三磊,徐冬冬,樓寶,辛儉,耿智,程國寶.  上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(04)
[3]Acclimation-dependent expression of heat shock protein 70 in Pacific abalone （Haliotis discus hannai Ino） and its acute response to thermal exposure[J]. 李加琦,何慶國,孫輝,劉曉.  Chinese Journal of Oceanology and Limnology. 2012(01)
[4]大菱鲆與耐高溫性狀相關(guān)的微衛(wèi)星標(biāo)記篩選[J]. 馬愛軍,許可,黃智慧,王新安.  海洋科學(xué)進(jìn)展. 2011(03)
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[6]高溫脅迫對褐牙鲆生長及肝臟抗氧化酶活性的影響[J]. 徐冬冬,樓寶,詹煒,史會(huì)來,毛國民,駱季安,程麗娜.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2010(07)
[7]鹽度和溫度對半滑舌鰨生長、滲透生理及能量收支的影響[J]. 田相利,王國棟,董雙林,房景輝.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2010(04)
[8]南方鲇幼魚的熱耐受特征[J]. 王云松,曹振東,付世建,王宇翔.  生態(tài)學(xué)雜志. 2008(12)
[9]溫度突變對凡納濱對蝦己糖激酶和丙酮酸激酶活力以及熱休克蛋白表達(dá)的影響[J]. 郭彪,王芳,侯純強(qiáng),董雙林,孫皓.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2008(05)
[10]不同緯度螅狀獨(dú)縮蟲耐熱能力及Hsp70 mRNA表達(dá)水平的比較[J]. 馮立芳,繆煒.  動(dòng)物學(xué)報(bào). 2008(03)

博士論文
[1]扇貝耐熱性狀候選基因的多態(tài)性及其作用機(jī)制研究[D]. 楊傳燕.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2012
[2]皺紋盤鮑配套雜交體系的建立、評價(jià)及應(yīng)用[D]. 李加琦.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2011
[3]刺參Apostichopus japonicus （Selenka）對溫度脅迫響應(yīng)分子機(jī)理的基礎(chǔ)研究[D]. 趙歡.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2011
[4]褐牙鲆與夏鲆雜交及回交子代的早期發(fā)育及細(xì)胞遺傳學(xué)研究[D]. 隋娟.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2011
[5]高溫脅迫和鰻弧菌感染對櫛孔扇貝基因表達(dá)影響的分析及相關(guān)基因的克隆與表達(dá)[D]. 胡曉麗.中國海洋大學(xué) 2005

碩士論文
[1]牙鲆HSP70與HSC70基因的克隆、表達(dá)及其SNPs與耐熱性狀的相關(guān)性分析[D]. 劉旭東.中國海洋大學(xué) 2011
[2]櫛孔扇貝、海灣扇貝熱休克蛋白22基因的克隆和表達(dá)及其與櫛孔扇貝抗熱性狀相關(guān)SNP位點(diǎn)的篩查[D]. 張蕾.中國海洋大學(xué) 2009



本文編號：3488526