探究引起半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis Gunther）發(fā)病死亡的原因及其病原菌的藥敏特性,為生產(chǎn)中有效防治該病提供理論依據(jù)。于2018年從天津市某養(yǎng)殖場(chǎng)患病半滑舌鰨中分離得到3株優(yōu)勢(shì)菌,回歸感染實(shí)驗(yàn)證實(shí)菌株P(guān)SC0601對(duì)半滑舌鰨具有致病性。通過(guò)肉眼觀察可見(jiàn)半滑舌鰨腹腔嚴(yán)重腫脹,腹部?jī)蓚?cè)肌肉出血,解剖后可見(jiàn)半滑舌鰨腸道、肝臟等組織器官亦有大量出血。經(jīng)API鑒定系統(tǒng)和16S rDNA序列分析鑒定該菌株為美人魚(yú)發(fā)光桿菌美人魚(yú)亞種（Photobacterium damselae subsp.damselae）。該菌在綿羊血平板上呈現(xiàn)β型溶血,人工回歸感染實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示該菌對(duì)半滑舌鰨的半數(shù)致死量(LD₅₀)為1.5×10⁴ CFU/g。對(duì)48種抗菌藥物的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,菌株P(guān)SC0601對(duì)氟苯尼考、氯霉素、阿莫西林、阿奇霉素、壯觀霉素、頭孢哌酮等20種藥物具有較高敏感性。研究結(jié)果表明,美人魚(yú)發(fā)光桿菌美人魚(yú)亞種對(duì)半滑舌鰨具有較強(qiáng)致病性,可導(dǎo)致肝臟、腸道等器官發(fā)生出血性壞死,引發(fā)魚(yú)類(lèi)死亡。本文通過(guò)對(duì)該菌的藥物敏感性進(jìn)行研究,以期... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,50(06)北大核心CSCD

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PSC0601菌株革蘭氏染色

分別從患病半滑舌鰨肝臟和腸道分離得到3株優(yōu)勢(shì)菌, 經(jīng)過(guò)人工感染預(yù)試驗(yàn)證實(shí)其中優(yōu)勢(shì)菌PSC0601為致病菌,其他2株菌PSC0602、PSC0603均不致病。在2216E瓊脂平板上25 ℃培養(yǎng) 24 h后, PSC0601菌株的菌落為圓形, 乳白色, 表面光滑濕潤(rùn), 邊緣光滑, 菌落直徑 1～2 mm。病原菌在綿羊血平板上呈現(xiàn)典型的 β 型溶血(見(jiàn)圖1),病原菌進(jìn)行革蘭氏染色,在鏡下觀察,呈球桿狀革蘭氏陰性菌(見(jiàn)圖2箭頭所示)。圖2 PSC0601菌株革蘭氏染色

采用通用引物擴(kuò)增所分離菌株的 16S rDNA 基因,測(cè)序結(jié)果經(jīng)過(guò)去除載體序列和拼接后,PSC0601菌株16S rDNA 基因的片段為1 454 bp,在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行Blast比對(duì),結(jié)果顯示PSC0601菌株與美人魚(yú)發(fā)光桿菌的同源性最高,均都達(dá)到99%,所以不能以此直接區(qū)分PSC0601菌株為美人魚(yú)亞種或殺魚(yú)亞種,還要通過(guò)生理生化特性進(jìn)行分析才能確定其為美人魚(yú)亞種或殺魚(yú)亞種。在GenBank 數(shù)據(jù)庫(kù)中選取同源性較高的美人魚(yú)桿菌菌株和不同親緣關(guān)系的菌株的16S rDNA序列,利用 MEGA 7.0 軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)(見(jiàn)圖3),進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)PSC0601菌株與美人魚(yú)發(fā)光桿菌的2個(gè)亞種處為同一分支,進(jìn)一步證明PSC0601菌株為美人魚(yú)發(fā)光桿菌。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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