非核糖體肽是微生物體內(nèi)一類具有天然生物活性的次生代謝物,由非核糖體肽合成酶催化生成。而AHA₂474和AHA₂476是嗜水氣單胞菌ATCC7966中兩個(gè)編碼非核糖體肽合成酶的基因。利用同源重組技術(shù)分別構(gòu)建了AHA₂474、AHA₂476基因缺失株,并對(duì)其生理特性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明,與野生株相比,缺失株的溶血性和胞外蛋白酶活性均顯著增強(qiáng),而產(chǎn)鐵能力明顯減弱;在缺鐵條件下,缺失株的生長(zhǎng)能力較弱,補(bǔ)充鐵離子后又能恢復(fù)生長(zhǎng)。同時(shí)在過(guò)氧化氫應(yīng)激下ΔAHA₂474菌株具有更大的耐受性。以上研究結(jié)果提示AHA₂474和AHA₂476基因可能通過(guò)影響鐵離子動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程來(lái)調(diào)控該菌的生理特性,同時(shí)也表明非核糖體肽在該菌致病性方面起作用,為探究該菌的致病機(jī)制及防治策略提供理論依據(jù)。 

【文章來(lái)源】：生物技術(shù)通報(bào). 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

基因缺失突變株的構(gòu)建

2.3 DIP對(duì)ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476生長(zhǎng)情況的影響因ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476與鐵離子相關(guān),為了探索在鐵離子限制條件下是否對(duì)缺失菌的生長(zhǎng)產(chǎn)生影響,本研究比較了野生型菌株與ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476敲除菌株在缺鐵條件下的生長(zhǎng)能力。當(dāng)加入鐵離子螯合劑DIP后,野生株生長(zhǎng)顯著高于ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476(圖3),說(shuō)明ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476可能通過(guò)影響鐵離子的動(dòng)態(tài)平衡來(lái)影響突變株的生長(zhǎng)。

因ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476與鐵離子相關(guān),為了探索在鐵離子限制條件下是否對(duì)缺失菌的生長(zhǎng)產(chǎn)生影響,本研究比較了野生型菌株與ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476敲除菌株在缺鐵條件下的生長(zhǎng)能力。當(dāng)加入鐵離子螯合劑DIP后,野生株生長(zhǎng)顯著高于ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476(圖3),說(shuō)明ΔAHA＿2474、ΔAHA＿2476可能通過(guò)影響鐵離子的動(dòng)態(tài)平衡來(lái)影響突變株的生長(zhǎng)。2.4 CAS培養(yǎng)基測(cè)定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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