發(fā)布時(shí)間：2021-11-06 17:16

　　為了從可口革囊星蟲(chóng)體壁中提取高質(zhì)量的RNA,以便深入開(kāi)展分子生物學(xué)研究。采用改良Trizol法、Trizol法和十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）法3種方法提取可口革囊星蟲(chóng)體壁中總RNA,并通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳比較不同方法提取總RNA的效果。結(jié)果表明:改良Trizol法提取的總RNA經(jīng)電泳后能看到清晰完整的28S r RNA、18S rRNA和5S rRNA條帶,無(wú)拖尾現(xiàn)象;而Trizol法和CTAB法提取的總RNA電泳條帶完整性較差,缺少28S rRNA。傳統(tǒng)的Trizol法和CTAB法不適用于可口革囊星蟲(chóng)體壁總RNA的提取;改良Trizol法提取的總RNA電泳條帶清晰、完整性好,質(zhì)量符合cDNA合成、RT-PCR擴(kuò)增等后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求,適用于提取可口革囊星蟲(chóng)體壁總RNA。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2020,36(08)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

可口革囊星蟲(chóng)體壁總RNA的RT-PCR檢測(cè)

以可口革囊星蟲(chóng)體壁為試驗(yàn)材料，分別采用Trizol法、CTAB法、改良Trizol法提取其總RNA，利用1.2%的普通瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)所提RNA的完整性。結(jié)果表明，采用Trizol法和CTAB法提取的星蟲(chóng)體壁總RNA經(jīng)檢測(cè)后僅觀察到18S rRNA條帶，說(shuō)明RNA已有部分降解，完整性較差，若用于逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，很難得到高質(zhì)量的cDNA；采用改良Trizol法提取的總RNA經(jīng)檢測(cè)后得到的28S rRNA、18S rRNA條帶清晰，帶與帶之間無(wú)明顯的彌散現(xiàn)象，且無(wú)明顯的DNA等雜質(zhì)污染（見(jiàn)圖1），說(shuō)明改良Trizol法提取的總RNA完整性較好，符合分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，可以很好地解決海洋無(wú)脊椎動(dòng)物因富含多糖和蛋白質(zhì)等物質(zhì)而帶來(lái)的總RNA提取易降解的問(wèn)題。2.2 RT-PCR檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3480220