發(fā)布時間：2021-10-30 13:40

　　采用急性毒性實驗方法,將中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）暴露于不同Cd2+濃度組（0、0.63、1.26、5.03、10.07 mg/L）6 d,采用生化和分子生物學方法研究Cd2+對中華絨螯蟹肝胰腺代謝酶、抗氧化相關物質(zhì)、線粒體的影響和損傷,采用DNA-Ladder和AO/EB雙熒光染色法檢測肝胰腺細胞凋亡情況,旨在探明鎘對中華絨螯蟹肝胰腺的氧化損傷機理。結(jié)果顯示:雌蟹和雄蟹對Cd2+的敏感度不同,肝胰腺中GPT、AKP被抑制,GOP被激活,ACP活力隨著Cd2+濃度的升高呈現(xiàn)出先上升后下降的變化趨勢;SOD、CAT和GPx變化趨勢與ACP相同,H2O2和MDA含量持續(xù)積累,GSH/GSSG減少;MT mRNA表達量持續(xù)增加;線粒體狀態(tài)-4呼吸、MDH和COX活性均被抑制;細胞損傷和凋亡程度隨著Cd2+濃度增加而加劇,Caspase-3,8,9均被激活。結(jié)果表明:Cd2+誘導中華絨螯蟹肝胰腺產(chǎn)生大量的自由基,導致代謝發(fā)生異常、出現(xiàn)氧化損傷,且雌蟹和雄蟹對Cd2+脅迫的敏感程度和應激程度不同;Cd2+誘導肝胰腺發(fā)生凋亡是Caspase依賴型,推測線粒體介導的內(nèi)源性凋亡... 

【文章來源】：溫州大學浙江省

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1 中華絨螯蟹概況
    2 鎘及其污染現(xiàn)狀
    3 鎘對甲殼動物的毒性作用研究進展
        3.1 甲殼動物對鎘的吸收與蓄積
        3.2 鎘的毒性機理
        3.3 鎘與細胞凋亡
第二章 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺代謝酶活性影響
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗設計
        1.3 實驗方法
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 實驗結(jié)果
        2.1 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT/GPT）活力的影響
        2.2 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺谷草轉(zhuǎn)氨酶（ASLT/GOT）活力的影響
        2.3 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺堿性磷酸酶（AKP）活力的影響
        2.4 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺酸性磷酸酶（ACP）活力的影響
    3 討論
        3.1 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺GPT和GOT活力的影響
        3.2 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺AKP和ACP活力的影響
第三章 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺抗氧化酶的影響
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗設計
        1.3 實驗方法
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 實驗結(jié)果
        2.1 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺SOD活力的影響
        2.2 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺CAT活力的影響
        2.3 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺Gpx活力和GSSG、GSH含量的影響
        2.4 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺MDA和H2O2含量的影響
    3 討論
        3.1 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺抗氧化酶活的影響
        3.2 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺H2O2和MDA含量的影響
第四章 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺金屬硫蛋白MRNA表達的影響
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗設計
        1.3 實驗方法
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 實驗結(jié)果
        2.1 中華絨螯蟹肝胰腺總RNA制備
        2.2 中華絨螯蟹肝胰腺MT特異性擴增
        2.3 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺MT m RNA相對轉(zhuǎn)錄水平的影響
    3 討論
第五章 鎘致中華絨螯蟹肝胰腺線粒體氧化損傷
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗設計
        1.3 實驗方法
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 實驗結(jié)果
        2.1 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺線粒體MDH、COX活性的影響
        2.2 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺線粒體狀態(tài)-4 呼吸的影響
    3 討論
第六章 鎘致中華絨螯蟹肝胰腺細胞凋亡的研究
    1 實驗方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗設計
        1.3 實驗方法
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 實驗結(jié)果
        2.1 熒光顯微鏡觀察鎘對中華絨螯蟹肝胰腺細胞凋亡的影響
        2.2 瓊脂糖凝膠電泳檢驗鎘對中華絨螯蟹肝胰腺細胞DNA完整性影響
        2.3 鎘對中華絨螯蟹肝胰腺Caspase-3，8，9 活性影響
    3 討論
總結(jié)與展望
    1 結(jié)論
    2 展望
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄


【參考文獻】：
期刊論文
[1]水體Hg2+對中華絨螯蟹肝胰腺和血淋巴酶活性的影響[J]. 趙艷民,張雷,王新華,秦延文,鄭丙輝.  生態(tài)毒理學報. 2012(06)
[2]鉛對河南華溪蟹卵巢抗氧化酶活力和脂質(zhì)過氧化水平的影響[J]. 馬京津,徐團,軒瑞晶,王蘭.  環(huán)境科學學報. 2012(09)
[3]鎘對長江華溪蟹金屬硫蛋白mRNA表達的誘導及低分子量殼聚糖的聯(lián)合作用[J]. 周妍英,李瑞金,任國銳,王蘭.  環(huán)境科學學報. 2011(09)
[4]鎘對日本沼蝦的毒性研究[J]. 張亞娟,劉存歧,王軍霞,王亞斌,邢曉光.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2010(29)
[5]金屬硫蛋白作為重金屬污染生物標志物的研究進展[J]. 陳春,周啟星.  農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報. 2009(03)
[6]鎘在河南華溪蟹主要組織器官中的積累效應[J]. 顏濤,馬文麗,王蘭,何永吉.  山西大學學報(自然科學版). 2008(04)
[7]Cd2+對長江華溪蟹谷胱甘肽系統(tǒng)的影響[J]. 劉娜,閆博,李涌泉,王茜,王蘭.  環(huán)境科學. 2008(08)
[8]鎘對長江華溪蟹酶活性及脂質(zhì)過氧化的影響[J]. 李涌泉,王蘭,劉娜,王茜,何永吉,孟帆.  水生生物學報. 2008(03)
[9]Cd對河南華溪蟹（Sinopotamon henanense）主要組織器官SOD和POD同工酶的影響[J]. 王蘭,李涌泉,閆博,劉娜,王茜.  應用與環(huán)境生物學報. 2007(06)
[10]鎘對長江華溪蟹肝胰腺抗氧化酶活力的影響[J]. 閆博,王蘭,李涌泉,劉娜,王茜.  動物學報. 2007(06)

博士論文
[1]鎘對長江化溪蟹心臟組織器官的毒性作用及機制研究[D]. 雷雯雯.山西大學 2012



本文編號：3466827