斑馬魚(yú)（Danio rerio, Zebrafish）又稱(chēng)藍(lán)條魚(yú)、花條魚(yú)等,原產(chǎn)于南亞,是一種常見(jiàn)的熱帶觀賞魚(yú)。近年來(lái),隨著現(xiàn)代生命科技的不斷深入研究,斑馬魚(yú)作為一種新型的脊椎動(dòng)物模式生物,被廣泛地應(yīng)用于發(fā)育遺傳學(xué)、環(huán)境毒理學(xué)及人類(lèi)疾病模型與新藥篩選等生命科學(xué)相關(guān)領(lǐng)域,但其在細(xì)菌質(zhì)量控制方面與小鼠等法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物仍存在較大差距。在實(shí)驗(yàn)室人工飼養(yǎng)條件下,病原菌是干擾斑馬魚(yú)健康狀態(tài)的重要病原,為了有效的預(yù)防與控制細(xì)菌性病原對(duì)斑馬魚(yú)健康狀態(tài)的干擾,以確保其用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量,如何建立快速準(zhǔn)確的病原菌檢測(cè)方法己成為了實(shí)驗(yàn)用斑馬魚(yú)研究與應(yīng)用的重要課題之一。本研究以本實(shí)驗(yàn)室（上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)室）自然發(fā)病且具有典型病癥的成年斑馬魚(yú)作為實(shí)驗(yàn)研究樣本,并以該實(shí)驗(yàn)室健康斑馬魚(yú)以及選自上海南方模式研究中心、上海萬(wàn)商花鳥(niǎo)市場(chǎng)水族館的健康成魚(yú)作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照,從病魚(yú)病灶組織及對(duì)照組相應(yīng)組織部位病原菌并進(jìn)行純培養(yǎng)后,共獲得8種優(yōu)勢(shì)菌株,并先后采用了形態(tài)觀察、生化鑒定及PCR篩選的方法對(duì)所分離得到的8種細(xì)菌進(jìn)行了結(jié)果分析,得出結(jié)論1-8菌分別對(duì)應(yīng)為：假單胞菌屬、弧菌屬、溫和氣單胞菌、嗜水氣單胞菌、類(lèi)... 

【文章來(lái)源】：東華大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 斑馬魚(yú)概述及其實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化進(jìn)程
        1.2.1 形態(tài)特征
        1.2.2 習(xí)性與生長(zhǎng)
        1.2.3 斑馬魚(yú)的研究起源與發(fā)展
        1.2.4 斑馬魚(yú)作為模式生物的優(yōu)勢(shì)
    1.3 斑馬魚(yú)常見(jiàn)疾病的研究進(jìn)展
        1.3.1 寄生蟲(chóng)疾病
        1.3.2 病毒性疾病
        1.3.3 細(xì)菌性疾病
    1.4 實(shí)驗(yàn)用斑馬魚(yú)的細(xì)菌質(zhì)量控制
        1.4.1 實(shí)驗(yàn)用斑馬魚(yú)的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè)
        1.4.2 實(shí)驗(yàn)用斑馬魚(yú)常見(jiàn)病原菌監(jiān)測(cè)項(xiàng)目
        1.4.3 實(shí)驗(yàn)用斑馬魚(yú)細(xì)菌檢測(cè)流程
        1.4.4 實(shí)驗(yàn)用斑馬魚(yú)細(xì)菌檢測(cè)中的生物安全控制與預(yù)防
    1.5 魚(yú)類(lèi)細(xì)菌性疾病的檢測(cè)方法概述
        1.5.1 傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)
        1.5.2 免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)
        1.5.3 微量多項(xiàng)試驗(yàn)鑒定系統(tǒng)
        1.5.4 分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)
    1.6 魚(yú)類(lèi)疾病的診斷研究方法
        1.6.1 疾病的觀察診斷
        1.6.2 病原菌分離鑒定
        1.6.3 組織病理學(xué)研究
    1.7 本課題的研究?jī)?nèi)容及目的與意義
        1.7.1 研究?jī)?nèi)容
        1.7.2 目的與意義
第二章 自然條件下發(fā)病斑馬魚(yú)的細(xì)菌性病原分離與鑒定
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)整體技術(shù)路線框架圖
        2.3.2 病原菌的分離培養(yǎng)
        2.3.3 菌落的形態(tài)觀察及生化鑒定
        2.3.4 細(xì)菌的PCR篩選鑒定
        2.3.5 人工感染預(yù)實(shí)驗(yàn)及致病性初判
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 菌落形態(tài)特征
        2.4.2 菌落生化鑒定結(jié)果
        2.4.3 細(xì)菌PCR篩選結(jié)果
        2.4.4 病原菌致病性預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.5 小結(jié)與討論
第三章 致病性嗜水氣單胞菌感染斑馬魚(yú)的毒力特性及組織病理學(xué)研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        3.2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 嗜水氣單胞菌特異性引物設(shè)計(jì)及PCR擴(kuò)增
        3.3.2 PCR產(chǎn)物回收及測(cè)序
        3.3.3 嗜水氣單胞菌致病性實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 組織切片的制作與觀察
        3.3.5 致病菌回歸感染實(shí)驗(yàn)
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 嗜水氣單胞菌特異性基因擴(kuò)增結(jié)果
        3.4.2 PCR產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果及同源性分析
        3.4.3 平板計(jì)數(shù)結(jié)果
        3.4.4 人工感染實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.5 組織病理學(xué)觀察結(jié)果分析
        3.4.6 致病菌回歸感染實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
    3.5 小結(jié)與討論
第四章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
課題來(lái)源
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]海水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)病原微生物研究進(jìn)展[J]. 陶詩(shī),何芳芳,劉雪珠,何建瑜,王健鑫.  水產(chǎn)科學(xué). 2013(03)
[2]中國(guó)斑馬魚(yú)研究發(fā)展歷程及現(xiàn)狀[J]. 賈順姬,孟安明.  遺傳. 2012(09)
[3]實(shí)驗(yàn)用魚(yú)遺傳質(zhì)量控制及標(biāo)準(zhǔn)化[J]. 孫德明,王天奇,朱曉紅,殷昆侖,岳秉飛,崔宗斌,孫榮澤,張博.  遺傳. 2012(09)
[4]集約化養(yǎng)殖常見(jiàn)細(xì)菌性魚(yú)病及預(yù)防[J]. 戴良,張譽(yù)瀚.  黑龍江水產(chǎn). 2012(03)
[5]魚(yú)類(lèi)粘孢子蟲(chóng)病的研究進(jìn)展[J]. 吳晗冰,付熊,楊雨虹.  科學(xué)養(yǎng)魚(yú). 2012(03)
[6]魚(yú)類(lèi)疾病的檢查、診斷方法[J]. 何洪船.  漁業(yè)致富指南. 2012(03)
[7]刺激隱核蟲(chóng)病[J]. 陳愛(ài)平,江育林,錢(qián)冬,陳昌福,李安興,黃捷,楊冰.  中國(guó)水產(chǎn). 2011(08)
[8]實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)菌檢測(cè)中的生物安全控制與預(yù)防[J]. 鐘女奇,趙勇,洪迅,黃芝瑛.  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué). 2011(03)
[9]魚(yú)赤皮病的防治[J]. 王桂香.  農(nóng)家參謀. 2011(05)
[10]魚(yú)類(lèi)細(xì)菌性爛鰓病的防治技術(shù)[J]. 祁保霞,武迎紅.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2011(02)



本文編號(hào)：3420511