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魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌感染小鼠巨噬細(xì)胞差異轉(zhuǎn)錄基因的篩選及功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 20:50
  無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae),亦稱B群鏈球菌(Group B Streptococcus, GBS),具有廣泛的宿主感染范圍,可引起新生兒敗血癥、肺炎和腦膜炎,奶牛乳腺炎及魚(yú)類腦膜炎。近年來(lái),無(wú)乳鏈球菌對(duì)魚(yú)類危害嚴(yán)重,已引起廣泛重視,但其致病機(jī)制尚不明確。本研究在比較魚(yú)源、牛源、人源無(wú)乳鏈球菌毒力的基礎(chǔ)上,利用選擇性捕獲轉(zhuǎn)錄序列(SCOTS)技術(shù)篩選了魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌感染小鼠巨噬細(xì)胞差異轉(zhuǎn)錄的基因,并對(duì)其中轉(zhuǎn)錄上調(diào)的aroA、clpE、msrB及pulA等基因的功能進(jìn)行了鑒定,對(duì)aroA缺失株作為弱毒疫苗免疫小鼠的保護(hù)效果進(jìn)行了探討,研究結(jié)果為闡明無(wú)乳鏈球菌的致病機(jī)制提供了理論基礎(chǔ),同時(shí)也具有潛在的應(yīng)用前景。1.無(wú)乳鏈球菌與巨噬細(xì)胞和腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用以小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7和腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞bEnd.3為體外研究模型,探討魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌GD201008-001與細(xì)胞的互作。結(jié)果顯示,無(wú)乳鏈球菌可以被巨噬細(xì)胞吞噬,吞噬數(shù)量與細(xì)菌濃度呈正相關(guān)。通過(guò)比較魚(yú)源、牛源、人源三株無(wú)乳鏈球菌的抗吞噬能力、巨噬細(xì)胞內(nèi)存活能力及對(duì)RAW264.7和bEnd... 

【文章來(lái)源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:188 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌感染小鼠巨噬細(xì)胞差異轉(zhuǎn)錄基因的篩選及功能研究


圖2-1?SCOTS技術(shù)篩選轉(zhuǎn)錄序列并進(jìn)行southern驗(yàn)證??(A)從體外培養(yǎng)基或感染的宿主組織中(體內(nèi))獲得標(biāo)準(zhǔn)化的cDNA;巧)相對(duì)于體外培養(yǎng)基在宿主??體內(nèi)特異表達(dá)的基網(wǎng)

無(wú)乳鏈球菌,毒性作用,源株


在相同的感染比條件下,GD201008-001對(duì)RAW264.7的毒性作用顯著高于A909、??ATCC13813,且牛源株ATCC1381在MOI=100時(shí),對(duì)RAW264.7的毒性作用仍然非??常低(圖3-6)。??51??

無(wú)乳鏈球菌,毒性,毒性作用


?100??MOI??圖3-6無(wú)乳鏈巧菌對(duì)RAW264.7的毒性??Fig?3-6?CyU)U)xic?effect?of?義雌口/口別Z?口6?on?RAW264.7?macrophages.?A打?asterisk?indicates?Uiat?化e??bac化rial?cytotoxicity?is?significantly?diffe化nt?(p?<?0.05)?from?the?cytotoxicity?value?of?GD201008-001.??2.6.2?H株無(wú)乳鏈球菌對(duì)祀nd.3的毒性??如圖3-7,?H株無(wú)乳鏈球菌對(duì)化nd.3的毒性作用趨勢(shì)與對(duì)RAW264.7的毒性作用??基本相同,MOI越大則細(xì)胞毒性越大,且GD201008-001對(duì)bEnd.3的毒性作用顯著??高于其它菌株(P<〇.〇5),ATCC13813的細(xì)胞毒性作用均處于較低水平。但是,在??相同的MOI條件下,各菌株對(duì)祀nd.3的毒性耍高于對(duì)RAW264.7的毒性。??100-1??原J?回?CD201008-001??一抓-?巧A909??運(yùn)?巧?ATCC13813??含60-??與.?I?*??I?40-?i?民??芝?■?鷄*?凝::::??U?20-?li?I?弦??i?E:a?*?1巧??1?10?100??MOI??圖3-7無(wú)乳鏈球菌對(duì)化nd.3的毒性??Fig?3-

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]選擇性捕獲禽病原性大腸桿菌體內(nèi)轉(zhuǎn)錄序列[J]. 陳祥,高崧,王曉泉,焦新安,劉秀梵.  微生物學(xué)報(bào). 2007(03)
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[3]抑制差減雜交篩選禽致病性大腸桿菌基因組差異片段及其分析[J]. 陳祥,趙娟,高崧,焦新安,劉秀梵.  微生物學(xué)報(bào). 2005(05)



本文編號(hào):3414453

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