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廣西羅非魚無乳鏈球菌病病原分離、鑒定及毒力基因檢測(cè)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-09-23 18:38
  無乳鏈球菌已成為近年來羅非魚細(xì)菌性疾病中重要的致病菌,給羅非魚產(chǎn)業(yè)造成了極大的經(jīng)濟(jì)損失。目前引起羅非魚鏈球菌病的致病菌主要有海豚鏈球菌和無乳鏈球菌。本研究對(duì)廣西8個(gè)市12個(gè)縣/區(qū)采集的672個(gè)羅非魚病樣進(jìn)行細(xì)菌分離,并通過API20Strep試劑條及16SrRNA分子鑒定,從其中30個(gè)病樣中共分離到無乳鏈球菌30株,其中南寧市7株、欽州市3株、北海市7株、柳州市5株、梧州市1株、玉林市7株。無乳鏈球菌的總檢出率為4.46%。在檢出的30株無乳鏈球菌中,有9株溶血試驗(yàn)呈陰性,其余21株的溶血試驗(yàn)呈陽性。利用BLAST分析了30株試驗(yàn)菌株的16SrRNA基因序列和與GenBank中已登錄鏈球菌相應(yīng)序列的同源性,結(jié)果顯示,30株試驗(yàn)菌株與無乳鏈球菌(S.agalactiae)海南分離株JF423947、廣東分離株JQ039375、KF111315及廣西分離株JQ990156的相應(yīng)序列高度同源(98.5%~100%),與海豚鏈球菌(S.iniae)中的EU622514株、FJ870987株,停乳鏈球菌(S.dysgalactiae)中的AB159678株、X59030株,化膿性鏈球菌(S.py... 

【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

廣西羅非魚無乳鏈球菌病病原分離、鑒定及毒力基因檢測(cè)分析


0株分離菌株的16SrRNA基網(wǎng)的PCR擴(kuò)增結(jié)果

電泳圖,毒力基因,PCR擴(kuò)增,PCR檢測(cè)


PCR檢測(cè)到陽性率均為100%,毒力基因型為cfb+cpsE^sip+。3個(gè)毒力基因的電泳圖見圖3-1至圖3-3。Cjf cr?- ci cs* c* c* (二 (?> o? c*X X X X K X X X X X X X X X X X X.. ,X .X X X X X X. X X X X X XNf IS: .N: ?< o o O IS ? £5 1? ? r:5 ? V V Y ? V Y Y V I_ 1.. I- L WIZ Zg: ^ n M H ?? i 1 f"i ri I? 1_ t .。 L I_ Z: ST ^ 之3 4 7 1 :2 3 1. 3. .? -T %. 2 3 3 7 ? 3 :頭1圖3-1分離菌株cfb基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果Fig. 3-1 PCR amplification Results of cfb gene of the strains33

酶切鑒定


圖 3-7 pMD18T-cbf> pMD18T-cpsE 和 pMD18T-sip 酶切鑒定結(jié)果Fig. 3-7 Restriction endonuclease analysis of recombinant plasmid pMD18T-cbf、recombinantplasmid pMD18T-cpsE and recombinant plasmid pMD18T-sipMl: Supercoiled DNA ladder marker; 1 : recombinant plasmid pMD18T-cbf; 2: pMD18T-cbf digestedproducts ; M2: Marker JH; 3: recombinant plasmid pMD18T-cpsE; 4: pMD18T-cpsE digested products;5 : recombinant plasmid pMD 18T-sip ; 6 : pMD 18T-sip digested products

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黃顙魚源嗜水氣單胞菌對(duì)鹽酸沙拉沙星耐藥性獲得與消失速率的測(cè)定[J]. 黃新財(cái),彭民毅,黃鈞,胡大勝,彭亞,黃艷華,施金谷,溫華成,韋貴花.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2013(10)
[2]無乳鏈球菌致病因子的研究進(jìn)展[J]. 夏杰,易弋,羅福廣,楊軍,王佳,伍時(shí)華,黃稀.  中國畜牧獸醫(yī). 2013(10)
[3]黃沙鱉白底板病病原菌的分離鑒定及6種毒力基因檢測(cè)[J]. 黃鈞,黃艷華,胡大勝,羅華平,施金谷,彭民毅,禤均成,覃麗芬,滕忠作,曾桂忠.  水生生物學(xué)報(bào). 2013(05)
[4]黃顙魚源溫和氣單胞菌對(duì)氟苯尼考耐藥性獲得與消失速率研究[J]. 黃鈞,彭民毅,羅華平,胡大勝,黃艷華,溫華成,施金谷,彭亞.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2013(03)
[5]羅非魚無乳鏈球菌生物學(xué)特性與致病力研究[J]. 田珂,賈愛卿,陳善真,李守軍,王貴平,石和榮.  中國畜牧獸醫(yī). 2013(06)
[6]廣西羅非魚鏈球菌病流行菌株P(guān)CR鑒定和PFGE基因型分析[J]. 李莉萍,王瑞,黃婷,黃維義,梁萬文,李健,黃彥,雷愛瑩,甘西,陳明.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2013(06)
[7]我國羅非魚產(chǎn)業(yè)發(fā)展趨勢(shì)分析[J]. 袁永明,袁媛,賀艷輝,代云云,龔赟翀,張紅燕,王紅衛(wèi).  中國漁業(yè)經(jīng)濟(jì). 2013(03)
[8]廣西羅非魚產(chǎn)業(yè)鏈發(fā)展的現(xiàn)狀、問題和對(duì)策[J]. 明俊超,袁新華,袁永明.  中國水產(chǎn). 2012(11)
[9]12種藥物對(duì)羅非魚無乳鏈球菌的抑菌試驗(yàn)[J]. 胡大勝,黃鈞,黃艷華,溫華成,施金谷,劉堅(jiān)紅,彭民毅.  中國水產(chǎn). 2012(08)
[10]羅非魚源無乳鏈球菌培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的優(yōu)化[J]. 陳賀,吳灶和,王蓓,黃郁蔥,魯義善,簡紀(jì)常.  廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(03)

博士論文
[1]羅非魚無乳鏈球菌病病原學(xué)、病理學(xué)及cpsE基因的原核表達(dá)研究[D]. 黃錦爐.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012

碩士論文
[1]以湛江、茂名海南為例探究我國凡納濱對(duì)蝦、羅非魚養(yǎng)殖現(xiàn)狀及面臨的問題[D]. 張宗鋒.上海海洋大學(xué) 2012
[2]廣州地區(qū)羅非魚無乳鏈球菌分離鑒定及致病生物學(xué)研究[D]. 陳榮榮.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]羅非魚海豚鏈球菌疫苗的研制及免疫效果的初步研究[D]. 徐增輝.廣西大學(xué) 2008
[4]122株豬2型鏈球菌耐藥性檢測(cè)及耐藥基因的鑒定[D]. 金卉.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào):3406212

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