為探討自制環(huán)保酵素對水產(chǎn)病原微生物的抑制作用,該研究對其發(fā)酵菌株進(jìn)行了分離。通過比濁法和平板劃線法,確定自制環(huán)保酵素對水產(chǎn)病原微生物坎氏弧菌SP-1 （Vibrio campbellii SP-1）、哈維氏弧菌SP-1 （V. harveyi SP-1）、輪蟲弧菌SP-1 （V. rotiferianus SP-1）和嗜水氣單胞菌245 （Aeromonas hydrophila）的最低抑制濃度分別是體積分?jǐn)?shù)是體積分?jǐn)?shù)為11.5%、11%、6.2%和11%,最小殺菌濃度分別是體積分?jǐn)?shù)為16%、16%、16%和12%。攻毒保護(hù)試驗表明,自制環(huán)保酵素?zé)o菌上清液可使嗜水氣單胞菌對斑馬魚（Danio rerio）的致死率降低（90.5±6.49）%。pH、溫度、蛋白酶敏感性試驗顯示自制環(huán)保酵素的主要抗菌活性物質(zhì)為酸性物質(zhì),對加熱和蛋白酶處理穩(wěn)定。進(jìn)一步從環(huán)保酵素中分離主要發(fā)酵菌株,通過ITS序列分析鑒定為庫德畢赤酵母（Pichia kudriavzevii）。研究結(jié)果可為自制環(huán)保酵素在水產(chǎn)養(yǎng)殖中對抗細(xì)菌性疾病的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 

【文章來源】：南方水產(chǎn)科學(xué). 2020,16(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

環(huán)保酵素?zé)o菌上清液對水產(chǎn)病原菌的生長抑制作用

空白對照組斑馬魚在試驗期間死亡率為0。嗜水氣單胞菌245對斑馬魚的致死率較高，試驗魚用1×109 CFU·m L-1的嗜水氣單胞菌浸泡攻毒12 h，換水移除病原菌后24 h內(nèi)全部死亡(圖2)。使用8%自制酵素藥浴30 min能夠顯著降低嗜水氣單胞菌攻毒斑馬魚的死亡率[(9.5±6.49)%]。與攻毒組相比，酵素藥浴使嗜水氣單胞菌對斑馬魚的致死率顯著降低了[(90.5±6.49)%,P<0.01]。2.4 自制環(huán)保酵素的抗菌活性成分敏感性

為分析自制酵素中的有效作用物質(zhì)，本研究考察了酵素在不同p H、溫度下，以及在蛋白酶處理后抑菌效果的變化(圖3)。在不同溫度處理下(圖3-a)，酵素對4種病原菌的抑制率無顯著變化(P>0.05)，表明抑菌物質(zhì)的熱穩(wěn)定性高。蛋白酶處理未影響酵素對4種病原菌的抑菌率(圖3-b)，表明酵素中未含有抑制4種指示菌的蛋白質(zhì)或肽類物質(zhì)。將p H從酵素的原始p H (4.0)調(diào)節(jié)至接近中性的過程中，抑菌率逐漸下降(圖3-c)；當(dāng)p H為8時，酵素對哈維氏弧菌SP-1和嗜水氣單胞菌245完全失去抑菌活性，但對輪蟲弧菌SP-1和坎氏弧菌SP-1仍有部分抑菌活性。結(jié)果表明自制酵素對水產(chǎn)病原菌的抑制作用存在低p H依賴性，抑菌活性成分主要為酸性物質(zhì)或在酸性條件下發(fā)揮作用。2.5 環(huán)保酵素中發(fā)酵菌株的分離和鑒定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3388665