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齊口裂腹魚(yú)(Schizothorax prenanti)兩種促性腺激素受體部分序列克隆及表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-09-04 16:22
  促性腺激素(gonadotropins)是調(diào)節(jié)脊椎動(dòng)物性腺發(fā)育,促進(jìn)性激素生成和分泌的糖蛋白激素。促性腺激素的生理功能通過(guò)分布于性腺的特異性受體,即促卵泡素受體(FSHR)和促黃體素受體(LHR)實(shí)現(xiàn)。有關(guān)齊口裂腹魚(yú)促性腺受體的研究還沒(méi)有報(bào)道。因此,研究FSHR和LHR的結(jié)構(gòu)和功能將有助于了解齊口裂腹魚(yú)生殖生理狀況,為人工繁育奠定基礎(chǔ)。本研究通過(guò)克隆齊口裂腹魚(yú)兩種促性腺激素受體FSHR和LHR的部分序列,進(jìn)行生物信息學(xué)分析、組織表達(dá)及繁殖和非繁殖季節(jié)的發(fā)育表達(dá)分析。結(jié)果如下:(1)獲得齊口裂腹魚(yú)FSHR、LHR cDNA部分序列,片段長(zhǎng)度分別為791bp和360bp,分別編碼263和120個(gè)氨基酸殘基。BLAST分析表明齊口裂腹魚(yú)FSHR核苷酸/氨基酸序列與斑馬魚(yú)的同源性最高(84.5%/85.1%),LHR與草魚(yú)同源性最高(87.1%/68.6%)。(2)利用MAGA4.0中NJ法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹(shù),齊口裂腹魚(yú)FSHR與斑馬魚(yú)、黃顙魚(yú)聚類(lèi)在一起,且與斑馬魚(yú)的遺傳距離最近。齊口裂腹魚(yú)LHR與草魚(yú)、斑馬魚(yú)聚類(lèi)在一起,且與草魚(yú)的遺傳距離最近。(3)組織表達(dá)譜分析表明,FSHR與LHR在性腺中高... 

【文章來(lái)源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號(hào)說(shuō)明
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 激素對(duì)繁殖周期的調(diào)控
        1.1.1 腦垂體組織
        1.1.2 垂體外周促性腺激素
    1.2 促性腺激素結(jié)構(gòu)與功能
    1.3 魚(yú)類(lèi)促性腺激素受體
        1.3.1 G蛋白偶聯(lián)受體超家族(GPCRs)
        1.3.2 促性腺激素受體的一般結(jié)構(gòu)
        1.3.3 魚(yú)類(lèi)促性腺激素受體的進(jìn)化分析
        1.3.4 促性腺激素受體的選擇性
        1.3.5 促性腺激素受體表達(dá)研究
    1.4 齊口裂腹魚(yú)的生物學(xué)特性和研究現(xiàn)狀
    1.5 本研究的內(nèi)容和意義
2 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 樣本的采集
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 主要試劑的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 引物的設(shè)計(jì)
        2.3.2 總RNA的提取
        2.3.3 總RNA的純化
        2.3.4 總RNA的檢測(cè)
        2.3.5 PCR產(chǎn)物的分離、回收、純化及測(cè)序
        2.3.6 組織表達(dá)譜分析
        2.3.7 發(fā)育表達(dá)分析
        2.3.8 序列分析與系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)構(gòu)建
3 結(jié)果
    3.1 促性腺激素受體克隆、生物學(xué)描述和功能表達(dá)
        3.1.1 總RNA提取結(jié)果
        3.1.2 促性腺激素受體部分序列克隆
        3.1.3 生物信息學(xué)分析
        3.1.4 系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)的構(gòu)建
        3.1.5 促性腺激素受體組織表達(dá)譜
        3.1.6 促性腺激素受體發(fā)育表達(dá)
    3.2 促性腺激素組織表達(dá)譜及發(fā)育表達(dá)
        3.2.1 促性腺激素FSHβ
        3.2.2 促性腺激素LHβ
4 討論
    4.1 齊口裂腹魚(yú)促性腺素受體序列生物學(xué)特性
    4.2 齊口裂腹魚(yú)促性腺素受體系統(tǒng)發(fā)生分析
    4.3 GtHRs組織表達(dá)分析
    4.4 FSHβ及LHβ組織表達(dá)分析
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3383599

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