為獲得可溶的鯉魚IL–17N重組蛋白,構(gòu)建原核重組表達(dá)質(zhì)粒GST–17N、SUMO–GST–17N和MBP–17N,確定IL–17N的最適促溶標(biāo)簽,并優(yōu)化其誘導(dǎo)表達(dá)條件（誘導(dǎo)劑異丙基–β–D–硫代半乳糖苷（IPTG）的濃度、誘導(dǎo)時(shí)間和誘導(dǎo)溫度）。結(jié)果:成功構(gòu)建了鯉魚IL–17N原核重組表達(dá)載體GST–17N、SUMO–GST–17N和MBP–17N;融合標(biāo)簽MBP、SUMO–GST和GST的促溶效果依次降低,SUMO–GST–17N、MBP–17N上清蛋白占總蛋白比例分別為47.4%、87.0%;MBP–17N的最佳表達(dá)條件為0.5 mmol/L IPTG,25℃誘導(dǎo)8～12 h;經(jīng)過(guò)鎳柱純化,獲得可溶MBP–17N蛋白,每克總菌約獲得0.09 mg MBP–17N蛋白。 

【文章來(lái)源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2020,46(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

鯉魚IL–17N基因的擴(kuò)增產(chǎn)物

鯉魚原核重組表達(dá)質(zhì)粒雙酶切鑒定結(jié)果

GST–17N和SUMO–GST–17N的表達(dá)結(jié)果


本文編號(hào)：3382121