解淀粉芽孢桿菌HE活性成分分析及安全性評(píng)價(jià)
發(fā)布時(shí)間:2021-08-02 03:56
益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用備受關(guān)注,人們?cè)谘芯恳嫔挠幸孀饔玫臅r(shí)候,也逐步意識(shí)到在應(yīng)用過(guò)程中可能存在安全隱患。因?yàn)橐嫔谏L(zhǎng)和繁殖過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一系列代謝產(chǎn)物并且部分代謝產(chǎn)物具有抗菌作用,這部分代謝產(chǎn)物的抗菌成分、特征和功能并不明確,這類(lèi)益生菌在養(yǎng)殖生產(chǎn)中大量使用是否對(duì)養(yǎng)殖水體菌群產(chǎn)生不良影響,是否會(huì)對(duì)引入地區(qū)造成生物入侵,也知之甚少。芽孢桿菌是水產(chǎn)養(yǎng)殖上應(yīng)用最廣泛的益生菌之一,本實(shí)驗(yàn)室前期分離到一株對(duì)嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)具有良好抑制作用的解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)HE,為了探究解淀粉芽孢桿菌對(duì)致病性嗜水氣單胞菌的抑菌成分以及在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用的安全性,本文開(kāi)展了以下研究。為明確解淀粉芽孢桿菌HE發(fā)酵液中活性成分,測(cè)定了解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液的理化性質(zhì),PCR檢測(cè)了脂肽合成相關(guān)基因,四對(duì)引物的擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過(guò)克隆、測(cè)序和BLAST分析,以及UPLC-Q-TOF-MS進(jìn)一步分析其活性物質(zhì)成分。結(jié)果表明,該菌株發(fā)酵液具有表面活性且能夠抑菌,對(duì)高溫、酸、堿和蛋白酶具有一定的耐受性;解淀粉芽孢桿菌HE基因組含有ituA、f...
【文章來(lái)源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
脂肽類(lèi)物質(zhì)相關(guān)基因的PCR檢測(cè)
2 結(jié)果與分析2.1 抑菌活性檢測(cè)結(jié)果解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液脂肽提取物對(duì)嗜水氣單胞菌的抑菌效果見(jiàn)圖3.1。抑菌圈的直徑可達(dá)24.5±2.5mm,有較高重復(fù)性。圖3.1 脂肽提取物對(duì)嗜水氣單胞菌的抑菌效果Fig. 3.1 Antibacterial effect of Lipopeptides extract on Aeromonas hydrophila2.2 抗菌粗提物的全波長(zhǎng)掃描將甲醇溶解脂肽粗提物在190-330nm進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描,由圖3.2可知,該混合物在206nm和225nm處有兩個(gè)吸收峰,在206nm處吸收峰更強(qiáng),所以選擇206nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。圖3.2 HE菌株粗提物的全波長(zhǎng)掃描圖譜Fig.3.2 UV absorption spectrum of the crude antibacterial extract from HE
達(dá)24.5±2.5mm,有較高重復(fù)性。圖3.1 脂肽提取物對(duì)嗜水氣單胞菌的抑菌效果Fig. 3.1 Antibacterial effect of Lipopeptides extract on Aeromonas hydrophila粗提物的全波長(zhǎng)掃描溶解脂肽粗提物在190-330nm進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描,由圖3.2m和225nm處有兩個(gè)吸收峰,在206nm處吸收峰更強(qiáng),所以選
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜法定性定量檢測(cè)硫化膠中促進(jìn)劑DPG[J]. 溫劭,張清智,吳愛(ài)芹. 橡膠工業(yè). 2019(02)
[2]超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜快速篩查與確證生鮮牛乳中80種抗生素和激素[J]. 貢松松,張婧,嚴(yán)鳳,吳劍平,潘娟,顧欣. 分析測(cè)試學(xué)報(bào). 2019(01)
[3]超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜法測(cè)定克氏螯蝦中39種獸藥殘留[J]. 宋偉,趙暮雨,韓芳,呂亞寧,丁磊,周典兵,鄧曉軍,胡艷云,鄭平,盛旋. 色譜. 2018(12)
[4]枯草芽孢桿菌對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能、腸道消化酶及抗氧化酶活性的影響[J]. 鞠守勇,李金山. 淡水漁業(yè). 2018(05)
[5]斑點(diǎn)叉尾“腹水癥”病原的分離鑒定及體外芽孢桿菌拮抗試驗(yàn)[J]. 王亞軍,魏文娟,潘厚軍,顏曦,王芳,石存斌. 淡水漁業(yè). 2018(03)
[6]解淀粉芽孢桿菌SSY1株的安全性試驗(yàn)[J]. 王巖,陳楠楠,侯美如,尹珺伊,劉宇,周慶民,秦平偉,史同瑞. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2017(03)
[7]生防菌解淀粉芽孢桿菌KL-1的生物安全性檢測(cè)[J]. 吳雨龍,賁愛(ài)玲,江海濤,楊齊,高晨陽(yáng). 南京曉莊學(xué)院學(xué)報(bào). 2016(06)
[8]水質(zhì)凈化乳酸菌的分離鑒定及發(fā)酵參數(shù)優(yōu)化[J]. 謝鳳行,張峰峰,周可,趙玉潔,趙瓊,孫海波. 微生物學(xué)報(bào). 2017(02)
[9]枯草芽孢桿菌B2的生長(zhǎng)及其對(duì)仿刺參的益生特性[J]. 張德強(qiáng),關(guān)曉燕. 水產(chǎn)科學(xué). 2016(03)
[10]飼料中添加兩株乳酸菌及其發(fā)酵上清液對(duì)凡納濱對(duì)蝦消化酶活性的影響[J]. 沙玉杰,王雷,孫國(guó)瓊,劉梅,王寶杰. 海洋科學(xué). 2016(03)
博士論文
[1]產(chǎn)抗菌脂肽GD菌株篩選及脂肽分離、鑒定與應(yīng)用研究[D]. 莊國(guó)宏.揚(yáng)州大學(xué) 2014
[2]枯草芽胞桿菌B6-1產(chǎn)脂肽和聚-γ-谷氨酸及抗幾種植物病原菌的研究[D]. 王啟軍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]Bacillus subtilis fmbJ產(chǎn)生的脂肽抗微生物效果及安全性評(píng)價(jià)[D]. 黃現(xiàn)青.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
碩士論文
[1]枯草桿菌脂肽抗嗜水氣單胞菌的機(jī)理和應(yīng)用研究[D]. 楊麗莉.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]解淀粉芽孢桿菌YN-1抑制植物病原真菌活性物質(zhì)研究[D]. 鄧建良.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號(hào):3316840
【文章來(lái)源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:88 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
脂肽類(lèi)物質(zhì)相關(guān)基因的PCR檢測(cè)
2 結(jié)果與分析2.1 抑菌活性檢測(cè)結(jié)果解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液脂肽提取物對(duì)嗜水氣單胞菌的抑菌效果見(jiàn)圖3.1。抑菌圈的直徑可達(dá)24.5±2.5mm,有較高重復(fù)性。圖3.1 脂肽提取物對(duì)嗜水氣單胞菌的抑菌效果Fig. 3.1 Antibacterial effect of Lipopeptides extract on Aeromonas hydrophila2.2 抗菌粗提物的全波長(zhǎng)掃描將甲醇溶解脂肽粗提物在190-330nm進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描,由圖3.2可知,該混合物在206nm和225nm處有兩個(gè)吸收峰,在206nm處吸收峰更強(qiáng),所以選擇206nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。圖3.2 HE菌株粗提物的全波長(zhǎng)掃描圖譜Fig.3.2 UV absorption spectrum of the crude antibacterial extract from HE
達(dá)24.5±2.5mm,有較高重復(fù)性。圖3.1 脂肽提取物對(duì)嗜水氣單胞菌的抑菌效果Fig. 3.1 Antibacterial effect of Lipopeptides extract on Aeromonas hydrophila粗提物的全波長(zhǎng)掃描溶解脂肽粗提物在190-330nm進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描,由圖3.2m和225nm處有兩個(gè)吸收峰,在206nm處吸收峰更強(qiáng),所以選
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜法定性定量檢測(cè)硫化膠中促進(jìn)劑DPG[J]. 溫劭,張清智,吳愛(ài)芹. 橡膠工業(yè). 2019(02)
[2]超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜快速篩查與確證生鮮牛乳中80種抗生素和激素[J]. 貢松松,張婧,嚴(yán)鳳,吳劍平,潘娟,顧欣. 分析測(cè)試學(xué)報(bào). 2019(01)
[3]超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜法測(cè)定克氏螯蝦中39種獸藥殘留[J]. 宋偉,趙暮雨,韓芳,呂亞寧,丁磊,周典兵,鄧曉軍,胡艷云,鄭平,盛旋. 色譜. 2018(12)
[4]枯草芽孢桿菌對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能、腸道消化酶及抗氧化酶活性的影響[J]. 鞠守勇,李金山. 淡水漁業(yè). 2018(05)
[5]斑點(diǎn)叉尾“腹水癥”病原的分離鑒定及體外芽孢桿菌拮抗試驗(yàn)[J]. 王亞軍,魏文娟,潘厚軍,顏曦,王芳,石存斌. 淡水漁業(yè). 2018(03)
[6]解淀粉芽孢桿菌SSY1株的安全性試驗(yàn)[J]. 王巖,陳楠楠,侯美如,尹珺伊,劉宇,周慶民,秦平偉,史同瑞. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2017(03)
[7]生防菌解淀粉芽孢桿菌KL-1的生物安全性檢測(cè)[J]. 吳雨龍,賁愛(ài)玲,江海濤,楊齊,高晨陽(yáng). 南京曉莊學(xué)院學(xué)報(bào). 2016(06)
[8]水質(zhì)凈化乳酸菌的分離鑒定及發(fā)酵參數(shù)優(yōu)化[J]. 謝鳳行,張峰峰,周可,趙玉潔,趙瓊,孫海波. 微生物學(xué)報(bào). 2017(02)
[9]枯草芽孢桿菌B2的生長(zhǎng)及其對(duì)仿刺參的益生特性[J]. 張德強(qiáng),關(guān)曉燕. 水產(chǎn)科學(xué). 2016(03)
[10]飼料中添加兩株乳酸菌及其發(fā)酵上清液對(duì)凡納濱對(duì)蝦消化酶活性的影響[J]. 沙玉杰,王雷,孫國(guó)瓊,劉梅,王寶杰. 海洋科學(xué). 2016(03)
博士論文
[1]產(chǎn)抗菌脂肽GD菌株篩選及脂肽分離、鑒定與應(yīng)用研究[D]. 莊國(guó)宏.揚(yáng)州大學(xué) 2014
[2]枯草芽胞桿菌B6-1產(chǎn)脂肽和聚-γ-谷氨酸及抗幾種植物病原菌的研究[D]. 王啟軍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]Bacillus subtilis fmbJ產(chǎn)生的脂肽抗微生物效果及安全性評(píng)價(jià)[D]. 黃現(xiàn)青.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
碩士論文
[1]枯草桿菌脂肽抗嗜水氣單胞菌的機(jī)理和應(yīng)用研究[D]. 楊麗莉.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[2]解淀粉芽孢桿菌YN-1抑制植物病原真菌活性物質(zhì)研究[D]. 鄧建良.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號(hào):3316840
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