發(fā)布時(shí)間：2021-07-30 23:07

　　多數(shù)研究表明雌激素在魚類性別決定、卵巢分化與維持的過(guò)程中均起到?jīng)Q定性作用。芳香化酶是雌激素合成的限速酶,硬骨魚類有兩種芳香化酶,即卵巢芳香化酶（cyp19a1a）和腦芳香化酶（cyp19a1b）,已有研究主要針對(duì)cyp19a1a在性腺以及cyp19a1b在腦的表達(dá)與作用,而少有研究聚焦于cyp19a1a在腦、cypl9a1b在性腺的表達(dá)與作用。另外,現(xiàn)有的研究多數(shù)是通過(guò)芳香化酶活性抑制劑或者雌激素受體拮抗劑等間接的手段來(lái)證明雌激素在魚類性別決定、卵巢分化與維持中的作用,而幾乎沒(méi)有通過(guò)缺失功能（loss of function）或者獲得功能（gain of function）對(duì)兩種芳香化酶在性別決定與分化中的作用進(jìn)行研究。尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）是世界性養(yǎng)殖魚類,雄魚比雌魚生長(zhǎng)快50%,易獲得單性魚苗,其基因組序列已經(jīng)公開,本實(shí)驗(yàn)8個(gè)性腺轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)測(cè)序相繼完成,所以尼羅羅非魚是研究性別決定與分化很好的材料。本論文主要從表達(dá)和功能兩方面來(lái)研究?jī)煞N芳香化酶的區(qū)別與聯(lián)系。一方面通過(guò)Real-time PCR和免疫組化技術(shù)來(lái)研究?jī)烧叻謩e在性腺與腦的表達(dá)模式以及細(xì)胞... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 雌激素的生物合成
    2 芳香化酶的結(jié)構(gòu)、基因特征
        2.1 芳香化酶的結(jié)構(gòu)
        2.2 芳香化酶的基因特征
    3 硬骨魚類兩種芳香化酶
    4 芳香化酶的分布
    5 芳香化酶在硬骨魚中的細(xì)胞定位
        5.1 芳香化酶(Cyp19a1a)在硬骨魚性腺的細(xì)胞定位
        5.2 芳香化酶(Cyp19a1b)在硬骨魚類腦的細(xì)胞定位
    6 雌激素在性別決定、分化與卵巢維持方面的作用
    7 雌激素在魚類腦中的作用
    8 芳香化酶表達(dá)的調(diào)控
        8.1 促性腺激素
        8.2 卵巢芳香化酶(cyp19a1a)基因表達(dá)的調(diào)控
        8.3 魚類cyp19a1b基因的調(diào)節(jié)
    9 科學(xué)問(wèn)題的提出和本研究的目的意義
第二章 尼羅羅非魚兩種芳香化酶(Cyp19a1a和Cyp19a1b)表達(dá)的初步研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2 試劑、耗材和儀器
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4 免疫組化檢測(cè)(Cyp19a1a和Cyp19a1b)在性腺與腦組織的表達(dá)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 羅非魚腦發(fā)育中cyp19a1b的表達(dá)
        3.2 尼羅羅非魚cyp19a1a和cyp19a1b性腺轉(zhuǎn)錄組表達(dá)分析
        3.3 免疫組織化學(xué)檢測(cè)羅非魚腦組織Cyp19a1a和Cyp19a1b表達(dá)
        3.4 免疫組織化學(xué)檢測(cè)羅非魚性腺組織Cyp19a1a和Cyp19a1b表達(dá)
    4. 討論
第三章 尼羅羅非魚兩種芳香化酶(Cyp19a1a和Cyp19a1b)功能的初步研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2 試劑、耗材和儀器
        2.3 有關(guān)試劑的配制
        2.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 CRISPR/Cas9敲除cyp19a1a在尼羅羅非魚XX性腺發(fā)育中的影響
        3.2 CRISPR/Cas9敲除cyp19a1b在尼羅羅非魚XX性腺發(fā)育中的影響
        3.3 CRISPRyCas9 敲除 cypl9ala、cypIPalb 對(duì) XX 性腺發(fā)育的觀察
        3.4 XX性腺過(guò)表達(dá)cyp19a1a對(duì)性腺發(fā)育的影響
    4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的主要論文
在讀期間參加科研情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]脊椎動(dòng)物性別決定和分化的分子機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 周林燕,張修月,王德壽.  動(dòng)物學(xué)研究. 2004(01)
[2]魚類性別決定及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 王德壽,吳天利,張耀光.  西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2000(03)



本文編號(hào)：3312296