發(fā)布時(shí)間：2021-07-27 18:43

　　采用¹³C穩(wěn)定同位素示蹤技術(shù)結(jié)合高分辨質(zhì)譜方法,研究了小硅藻中4類光合膜脂（二酰甘油單半乳糖脂（MGDG）、二酰甘油雙半乳糖脂（DGDG）、二酰甘油硫代糖脂（SQDG）和磷脂酰甘油（PG））的合成途徑。與通過物質(zhì)含量的變化進(jìn)行合成與代謝途徑研究的傳統(tǒng)方法相比,本方法更直觀、準(zhǔn)確地闡明了小硅藻光合膜脂中碳原子的去向。研究結(jié)果表明,小硅藻中4類光合膜脂均被標(biāo)記,且標(biāo)記含量在小硅藻生長周期的整個(gè)平臺(tái)期逐漸增加。對(duì)二級(jí)質(zhì)譜碎裂片段分析結(jié)果表明,光合膜脂的空間結(jié)構(gòu)在¹³C標(biāo)記方面起著決定性作用,即4類光合膜脂的極性頭部被優(yōu)先標(biāo)記,其次是甘油骨架,最后是兩條脂肪酸�；�,且兩條脂酰鏈的位置差別影響不大,幾乎是同步合成。本方法可以直觀準(zhǔn)確地闡明小硅藻中光合膜脂對(duì)碳原子的利用途徑,為相關(guān)研究提供了參考。 

【文章來源】：分析化學(xué). 2020,48(06)北大核心EISCICSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

對(duì)照組(A)和實(shí)驗(yàn)組13C同位素標(biāo)記4天(B)及13C同位素標(biāo)記10天(C)中MGDG-(20∶5～16∶2)的質(zhì)譜圖

圖2 對(duì)照組(A)和實(shí)驗(yàn)組13C同位素標(biāo)記4天(B)及13C同位素標(biāo)記10天(C)中MGDG-(20∶5～16∶2)的質(zhì)譜圖通過對(duì)上述化合物,包括對(duì)照組的m/z 779.5269和13C同位素標(biāo)記后的m/z 785.5474、802.6144、819.6035進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜掃描,對(duì)產(chǎn)生的碎裂片段進(jìn)行質(zhì)譜解析,進(jìn)一步確定13C同位素的具體標(biāo)記位置(圖4)。由圖4A可知,m/z 779.5269在碰撞能下產(chǎn)生的主要碎裂片段離子有3個(gè): m/z 227.1063 [C9H16O6Li]+是極性頭部單半乳糖CO鍵斷裂,經(jīng)過重排反應(yīng)得到Li+后形成的,可作為MGDG特征片段離子; m/z 475.3151 [M+Li-R2COOH]+和m/z 529.3255 [M+Li-R1COOH]+,是酰基鏈在母離子基礎(chǔ)上發(fā)生中性丟失后形成的,�；湻謩e為FA 20∶5和FA 16∶2,通過比較豐度值,可最終確定此化合物為MGDG-(20∶5～16∶2)。

采用血球計(jì)數(shù)板計(jì)量藻種密度并繪制生長曲線,由圖1可知,小硅藻培養(yǎng)的0～9天屬于對(duì)數(shù)期,10～20天為平臺(tái)期,從21天開始進(jìn)入衰敗期。研究表明,小硅藻體內(nèi)脂類化合物在平臺(tái)期大量合成并積累,因此選擇處于平臺(tái)初期的小硅藻進(jìn)行標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。藻種培養(yǎng)至平臺(tái)初期后,分別取600 mL均分至18個(gè)錐形瓶,劃分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,按照2.2節(jié)方法,進(jìn)行小硅藻光合膜脂類13C同位素標(biāo)記。3.2 提取液的選擇

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小硅藻光合作用脂13C穩(wěn)定同位素定量標(biāo)記分析[J]. 宗春光,李雙,徐繼林,李艷榮,鐘鶯鶯,俞雪鈞,周成旭,嚴(yán)小軍.  分析化學(xué). 2016(11)
[2]海洋微藻中脂質(zhì)13C穩(wěn)定同位素標(biāo)記LC-MS[J]. 李艷榮,徐繼林,嚴(yán)小軍,周成旭,陳娟娟.  中國科技論文. 2014(09)



本文編號(hào)：3306335