中華鱉（Pelodiscus Sinensis），隸屬于爬行綱（Reptilia）、龜鱉目（Testudinata）、鱉科（Trionychidae）、鱉屬（Pelodiscus），其肉質(zhì)鮮嫩、風味鮮美獨特，自古以來就是深受消費者喜愛的滋補珍品。近年來隨著生活水平的提高，中華鱉的消費量呈逐年上升趨勢，其養(yǎng)殖規(guī)模也逐年擴大。然而自上世紀九十年代以來，由于大量境外走私鱉涌入我國，加之各養(yǎng)殖場間相互引種、和近親繁殖，導致中華鱉的種質(zhì)性狀出現(xiàn)退化，嚴重影響了中華鱉產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，因此種質(zhì)保護和良種選育是中華鱉養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)亟待解決的重要課題。為此本文采用轉(zhuǎn)錄組測序技術，開發(fā)了與生長性狀相關的中華鱉EST-SSR標記，分析了與經(jīng)濟性狀關聯(lián)的基因位點，并對中華鱉四個不同養(yǎng)殖群體的遺傳結構和遺傳多樣性進行了分析；開展了中華鱉MSTN （Myostatin）基因的克隆及表達分析，為尋找挖掘中華鱉生長性狀相關基因的分子結構和功能，及其遺傳育種等工作奠定了一定的科學基礎。主要研究結果如下：1基于中華鱉轉(zhuǎn)錄組測序的EST-SSR標記的開發(fā)、驗證根據(jù)中華鱉轉(zhuǎn)錄組測序獲得的文庫序列，通過MSATCOMMANDER來... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

RNA-seq的實驗流程

圖 2 MSTN 基因和蛋白質(zhì)的結構圖（引自張利媛等，2006)[32]Fig.2 Structure diagram of MSTN genic and protein3.3 MSTN 基因的表達Mostatin 基因在表達時，先合成前體蛋白（52kD），該前體蛋白一般包括信號肽、N-末端前肽區(qū)（26kD）和 C-末端成熟肽結構域（12.5kD）三部分組成，前體蛋白經(jīng)過兩次蛋白酶水解后，生成 C-末端成熟區(qū)和 N - 端前肽，生成的 26 ku 的成熟糖蛋白被分泌至胞外，而 N - 端前肽在在 RSRR 區(qū)被切除掉大部分（266 個氨基酸），剩余的成熟區(qū)（109 個氨基酸）通過其中的 9 個半胱氨酸形成二硫鍵形成的二聚體與 N-端前肽形成復合物，再與細胞膜上的受體發(fā)生相互作用引發(fā)磷酸化，觸發(fā) TGF-β 等一系列信號傳導途徑，通過 3 種 SMAD 蛋白的介導將信號傳人細胞核，作用于靶基因的調(diào)控區(qū)。在哺乳動物中，MSTN 在骨骼肌中高度表達[31]后來的一系列研究發(fā)現(xiàn)，然而不同物種中的表達又有所差異。Sbarma 等[33]在研究牛

圖3 . MSTN對成肌細胞的細胞周期進程調(diào)控Fig.3 Regulation of MSTN on cell cycle of myoblast3.4.2 MSTN 對 Smads 的調(diào)控目前，對于MSTN的信號傳導途徑，一致認為的是MSTN - ActRⅡ B 型受體（蛋白激酶受體） - Smad蛋白信號傳導通路。其中Smads蛋白可以通過磷酸化和與蛋白質(zhì)間的相互作用進行信號的傳遞，與轉(zhuǎn)錄因子結合進而調(diào)節(jié)靶基因的表達水平，目前鑒定出Smads蛋白是TGF-β信號通路中的唯一底物。在此信號傳導途徑中，具體的過程是MSTN先與成肌細胞膜上的A ctRⅡ B型受體結合后形成復合物，活化Ⅱ型受體蛋白激酶后，Ⅱ型受體將Ⅰ型受體的GS區(qū)域磷酸化，從而激活Ⅰ型受體蛋白激酶，獲得活性的Ⅰ型受體蛋白激酶再將Smad3蛋白磷酸化，上述兩此磷酸化是介導TGF- β家族信號傳遞非常關鍵，最后再通過胞質(zhì)內(nèi)一系列受體的活化過程，

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3301646