已有研究表明無(wú)脊椎動(dòng)物中存在一定程度特異性的獲得性免疫，稱之為免疫致敏，但目前對(duì)其潛在機(jī)制的了解還非常有限。本研究采取分子、細(xì)胞生物學(xué)等手段，分析了長(zhǎng)牡蠣免疫致敏現(xiàn)象的分子和細(xì)胞特征，探討吞噬相關(guān)分子和信號(hào)通路及其與免疫致敏的關(guān)系，查明了長(zhǎng)牡蠣血淋巴細(xì)胞和血清在免疫致敏過(guò)程中的作用。經(jīng)滅活的燦爛弧菌初次刺激的牡蠣在遭受活的燦爛弧菌二次刺激時(shí)，其在細(xì)胞水平呈現(xiàn)出更強(qiáng)的免疫響應(yīng)。滅活的燦爛弧菌初次刺激后，牡蠣總血淋巴細(xì)胞數(shù)量（THC）顯著增加，新生的循環(huán)血淋巴細(xì)胞數(shù)量?jī)H在24小時(shí)出現(xiàn)略微增加，血淋巴細(xì)胞的吞噬率在12小時(shí)上升至最高值�；畹臓N爛弧菌再次刺激后，牡蠣THC的增加幅度更加明顯，同時(shí)更快地達(dá)到峰值（6小時(shí)），新生的循環(huán)血淋巴細(xì)胞數(shù)量在6小時(shí)顯著增加，其增殖率較初次刺激時(shí)升高近4倍，血淋巴細(xì)胞的吞噬率在12小時(shí)顯著增強(qiáng)并高于第一次刺激。同時(shí)，再次刺激后增強(qiáng)的血淋巴細(xì)胞吞噬作用對(duì)燦爛弧菌是高度特異的，能有效地區(qū)別鰻弧菌、溶珊瑚菌、耶羅維亞酵母和藤黃微球菌。在連續(xù)兩次燦爛弧菌刺激后，長(zhǎng)牡蠣造血相關(guān)基因CgRunx1和CgBMP7的最高表達(dá)量顯著高于第一次燦爛弧菌刺激，而CgGATA3的表... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)科學(xué)院大學(xué)(中國(guó)科學(xué)院海洋研究所)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：109 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
第一章 緒論
    第一節(jié) 免疫記憶
        一、免疫記憶及其特征
        二、免疫記憶產(chǎn)生機(jī)理
    第二節(jié) 免疫致敏——無(wú)脊椎動(dòng)物中的——“免疫記憶”
        一、無(wú)脊椎動(dòng)物的免疫致敏現(xiàn)象
        二、免疫致敏的機(jī)制研究
    第三節(jié) 本研究的目的及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料
        一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與菌株
        二、主要試劑
        三、引物信息
        四、主要儀器設(shè)備
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        一、長(zhǎng)牡蠣免疫刺激及樣品收集
        二、長(zhǎng)牡蠣血淋巴細(xì)胞總數(shù)檢測(cè)
        三、長(zhǎng)牡蠣新生血淋巴細(xì)胞數(shù)的檢測(cè)
        四、長(zhǎng)牡蠣血細(xì)胞吞噬能力的測(cè)定
        五、長(zhǎng)牡蠣血淋巴細(xì)胞凋亡率的檢測(cè)
        六、長(zhǎng)牡蠣組織總 RNA 的提取及 cDNA 的合成
        七、基因克隆與序列分析
        八、熒光實(shí)時(shí)定量 PCR 檢測(cè)
        九、蛋白的原核重組表達(dá)和純化
        十、多克隆抗體制備
        十一、重組蛋白的菌結(jié)合活性檢測(cè)
        十二、重組蛋白的 PAMPs 結(jié)合活性檢測(cè)
        十三、免疫熒光（細(xì)胞定位）實(shí)驗(yàn)
        十四、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第一節(jié) 燦爛弧菌兩次刺激前后長(zhǎng)牡蠣免疫指標(biāo)的變化
        一、血淋巴細(xì)胞總數(shù)變化
        二、新生血淋巴細(xì)胞數(shù)目變化
        三、血淋巴細(xì)胞吞噬能力的變化
    第二節(jié) 長(zhǎng)牡蠣血淋巴細(xì)胞造血和吞噬作用相關(guān)基因的研究
        一、連續(xù)遭受兩次燦爛弧菌刺激后造血相關(guān)基因 mRNA 水平的變化
        二、連續(xù)遭受兩次燦爛弧菌刺激后吞噬相關(guān)基因 mRNA 水平的變化
        三、吞噬相關(guān)基因的分子特征
        四、吞噬相關(guān)基因 mRNA 在各組織中的表達(dá)模式
        五、燦爛弧菌和不同 PAMPs 刺激后吞噬相關(guān)基因的表達(dá)變化
        六、體外重組蛋白及多克隆抗體
        七、吞噬相關(guān)蛋白對(duì)不同 PAMPs 和微生物的結(jié)合活性
        八、CgToll 6 和 Cgintegrin 蛋白在血淋巴細(xì)胞吞噬中的作用
    第三節(jié) 血淋巴轉(zhuǎn)移后長(zhǎng)牡蠣細(xì)胞免疫指標(biāo)的變化
        一、血清轉(zhuǎn)移后長(zhǎng)牡蠣細(xì)胞免疫指標(biāo)的變化
        二、血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)移后長(zhǎng)牡蠣細(xì)胞免疫指標(biāo)的變化
        三、血清和血淋巴細(xì)胞共轉(zhuǎn)移后長(zhǎng)牡蠣細(xì)胞免疫指標(biāo)的變化
第四章 討論
    第一節(jié) 燦爛弧菌的連續(xù)刺激能引發(fā)長(zhǎng)牡蠣的免疫致敏現(xiàn)象
        一、燦爛弧菌連續(xù)刺激能引發(fā)長(zhǎng)牡蠣血淋巴細(xì)胞的快速增殖
        二、燦爛弧菌連續(xù)刺激能引發(fā)長(zhǎng)牡蠣血淋巴細(xì)胞吞噬能力的增強(qiáng)
    第二節(jié) 血淋巴細(xì)胞增殖及其吞噬在長(zhǎng)牡蠣免疫致敏過(guò)程中可能的作用機(jī)制
        一、血細(xì)胞增殖在牡蠣免疫致敏中可能的作用機(jī)制
        二、血細(xì)胞吞噬在牡蠣免疫致敏中可能的作用機(jī)制
        三、模式識(shí)別受體 CgToll 6 在長(zhǎng)牡蠣免疫致敏中的作用
        四、血清分子 CgEcSOD 在長(zhǎng)牡蠣免疫致敏中的作用
    第三節(jié) 血清和血淋巴細(xì)胞在介導(dǎo)長(zhǎng)牡蠣免疫致敏中的作用
第五章 結(jié)論
    一、揭示了燦爛弧菌連續(xù)刺激引發(fā)長(zhǎng)牡蠣的免疫致敏的細(xì)胞學(xué)特征
    二、初步探明了長(zhǎng)牡蠣免疫致敏可能的分子機(jī)制
    三、血淋巴細(xì)胞可能在長(zhǎng)牡蠣免疫致敏產(chǎn)生過(guò)程中起著關(guān)鍵性的作用
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
碩士期間完成和發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]櫛孔扇貝關(guān)鍵模式識(shí)別受體介導(dǎo)的免疫應(yīng)答機(jī)制研究[D]. 楊嘉龍.中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2011



本文編號(hào)：3299522