草魚TLR8基因的克隆及其功能表達的研究
發(fā)布時間：2021-07-19 11:24
草魚（Ctenopharyngodon idella）屬硬骨魚綱、鯉形目、鯉科、雅羅魚亞科的草魚屬，為我國重要的淡水養(yǎng)殖魚類之一。隨著養(yǎng)殖的高密度、集約化的發(fā)展，疾病的頻繁暴發(fā)嚴重影響了草魚養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。由草魚呼腸孤病毒（Grass carp reovirus, GCRV）引起的草魚出血病是草魚的主要疾病之一。草魚出血病發(fā)病迅速，死亡率高，抗藥性強，病程比較長。消毒劑和中草藥對病毒的抑制并沒有很有效的作用，目前，免疫預防是一種有效的防治方法。TLR8（Toll-like receptor8）基因是TLR家族成員之一。TLR8屬于Ⅰ型跨膜蛋白受體，其分子結(jié)構由胞外區(qū)（LRR功能域）、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)（TIR功能域）組成。LRR功能域的主要職能是識別病原體表層的PAMPs，TIR功能域主要負責有機體相應的信號傳導。TLR8是典型地胞內(nèi)成員之一，能識別ssRNA病毒、小dsRNA病毒、寡核糖核苷酸和一系列合成的化學激動劑。作為TLR家族抗病毒受體之一，TLR8基因及其作用機制的探究將有助于了解草魚的先天免疫機制并將其應用于草魚的養(yǎng)殖和病害防治。取得的主要研究結(jié)果和結(jié)論包括：1.通過同源克隆、...
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：64 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
部分模式識別受體信息(ZhuLetal.2013)
位于胞內(nèi)的細胞器（如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體等），如 TLR3、TLR7、TLR8 和 TLR9 能識別外源 DNA 及 RNA (Underhill et al., 1999)，如下圖 1-2。TLRs 分布廣泛，在多種細胞上均有表達。大多數(shù) TLRs 在造血干細胞來源的細胞（如巨噬細胞、白細胞和樹突狀細胞等）表達，在非造血干細胞源性的細胞（如上皮細胞、內(nèi)皮細胞）選擇性表達 (張琪和周兵2010)。
圖 1-3 TLRs 及其應答途徑(Kawai andAkira, 2011)Fig.1-3 The signaling cascade of TLRs (Kawai and Akira, 2011)1.2.2.2 RLR 家族RIG-I 樣受體家族由三個成員組成：RIG-I 基因(retinoic acid induced gene I)、MDA基因(melanoma differentiation-associated gene 5)和 LGP2 基因(laboratory of genetics anphysiology 2)。它們都屬于含有 DExD/H 框結(jié)構域的同源 RNA 螺旋酶，能夠識別胞內(nèi)病毒 RNA。RIG-I 和 MDA5 包含 N 端的兩個串聯(lián)的 CARD 結(jié)構域、一個 DExD/H 框 RNA解旋酶結(jié)構域和 C 端的 RD 結(jié)構域，而 LGP2 缺少兩個串聯(lián)的 CARD 結(jié)構域(Yoneyamet al., 2004)。RIG-I 和 MDA5 的研究表明它們在 RNA 病毒識別中發(fā)揮重要的作用，而 LGP2 被認為在病毒識別和信號轉(zhuǎn)導中沒有發(fā)揮作用，很可能扮演的是 RIG-I 和 MDA5 信號通路的調(diào)控基因(Yoneyama et al., 2005)。RIG-I 能夠識別 5’三磷酸化末端和包含二級模塊的RNA 序列，比如多尿嘧啶和小 dsRNA，而 MDA5 能夠識別 poly I:C 和長 dsRNA (Hornunet al., 2006; Kato et al., 2008; Saito et al., 2008)。雖然 RIG-I 和 MDA5 識別不同的病毒，但是它們參與相同的信號通路（圖 1-4），激活 NF-κB、IRF3 和 IRF7，誘導促炎癥細胞
【參考文獻】：
期刊論文
[1]草魚出血病防治的研究進展[J]. 徐東日,吳蘇敏,胡文娟,李蓮芳. 江西水產(chǎn)科技. 2013(02)
[2]草魚出血病的綜合防治措施[J]. 韓曉峰. 農(nóng)業(yè)與技術. 2013(05)
[3]草魚TLR9基因全長cDNA的克隆及特征分析[J]. 楊春榮,蘇建國,彭麗敏,董捷. 水產(chǎn)學報. 2011(05)
[4]Toll樣受體研究進展[J]. 張琪,周兵. 國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2010 (03)
[5]Toll樣受體研究進展[J]. 趙文華,夏雪山. 動物醫(yī)學進展. 2007(10)
[6]草魚病毒性出血病研究進展[J]. 王方華,李安興. 南方水產(chǎn). 2006(03)
[7]水生呼腸孤病毒研究進展[J]. 方勤,朱作言. 中國病毒學. 2003(01)
[8]草魚出血病的病原研究[J]. 毛樹堅,邵健忠,杭綺,張念慈. 水產(chǎn)學報. 1989(01)
本文編號：3290613
【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：64 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
部分模式識別受體信息(ZhuLetal.2013)
位于胞內(nèi)的細胞器（如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體等），如 TLR3、TLR7、TLR8 和 TLR9 能識別外源 DNA 及 RNA (Underhill et al., 1999)，如下圖 1-2。TLRs 分布廣泛，在多種細胞上均有表達。大多數(shù) TLRs 在造血干細胞來源的細胞（如巨噬細胞、白細胞和樹突狀細胞等）表達，在非造血干細胞源性的細胞（如上皮細胞、內(nèi)皮細胞）選擇性表達 (張琪和周兵2010)。
圖 1-3 TLRs 及其應答途徑(Kawai andAkira, 2011)Fig.1-3 The signaling cascade of TLRs (Kawai and Akira, 2011)1.2.2.2 RLR 家族RIG-I 樣受體家族由三個成員組成：RIG-I 基因(retinoic acid induced gene I)、MDA基因(melanoma differentiation-associated gene 5)和 LGP2 基因(laboratory of genetics anphysiology 2)。它們都屬于含有 DExD/H 框結(jié)構域的同源 RNA 螺旋酶，能夠識別胞內(nèi)病毒 RNA。RIG-I 和 MDA5 包含 N 端的兩個串聯(lián)的 CARD 結(jié)構域、一個 DExD/H 框 RNA解旋酶結(jié)構域和 C 端的 RD 結(jié)構域，而 LGP2 缺少兩個串聯(lián)的 CARD 結(jié)構域(Yoneyamet al., 2004)。RIG-I 和 MDA5 的研究表明它們在 RNA 病毒識別中發(fā)揮重要的作用，而 LGP2 被認為在病毒識別和信號轉(zhuǎn)導中沒有發(fā)揮作用，很可能扮演的是 RIG-I 和 MDA5 信號通路的調(diào)控基因(Yoneyama et al., 2005)。RIG-I 能夠識別 5’三磷酸化末端和包含二級模塊的RNA 序列，比如多尿嘧啶和小 dsRNA，而 MDA5 能夠識別 poly I:C 和長 dsRNA (Hornunet al., 2006; Kato et al., 2008; Saito et al., 2008)。雖然 RIG-I 和 MDA5 識別不同的病毒，但是它們參與相同的信號通路（圖 1-4），激活 NF-κB、IRF3 和 IRF7，誘導促炎癥細胞
【參考文獻】：
期刊論文
[1]草魚出血病防治的研究進展[J]. 徐東日,吳蘇敏,胡文娟,李蓮芳. 江西水產(chǎn)科技. 2013(02)
[2]草魚出血病的綜合防治措施[J]. 韓曉峰. 農(nóng)業(yè)與技術. 2013(05)
[3]草魚TLR9基因全長cDNA的克隆及特征分析[J]. 楊春榮,蘇建國,彭麗敏,董捷. 水產(chǎn)學報. 2011(05)
[4]Toll樣受體研究進展[J]. 張琪,周兵. 國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2010 (03)
[5]Toll樣受體研究進展[J]. 趙文華,夏雪山. 動物醫(yī)學進展. 2007(10)
[6]草魚病毒性出血病研究進展[J]. 王方華,李安興. 南方水產(chǎn). 2006(03)
[7]水生呼腸孤病毒研究進展[J]. 方勤,朱作言. 中國病毒學. 2003(01)
[8]草魚出血病的病原研究[J]. 毛樹堅,邵健忠,杭綺,張念慈. 水產(chǎn)學報. 1989(01)
本文編號：3290613
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