研究了淡水珍珠貝——三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）在不同蚌齡下外套膜組織的細(xì)胞增殖及生物礦化相關(guān)因子活性。選擇5組不同蚌齡三角帆蚌（0.5齡、1齡、2齡、3齡、4齡）,通過流式細(xì)胞技術(shù)分析了外套膜細(xì)胞的增殖指數(shù)（proliferation index,PrI）和胞內(nèi)Ca²⁺濃度,并應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)了與生物礦化相關(guān)的碳酸酐酶（carbonic anhydrase, CA）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）基因的表達(dá)并測(cè)定其酶活性。結(jié)果表明, 2齡蚌的外套膜細(xì)胞PrI及胞內(nèi)Ca²⁺濃度顯著高于其他蚌齡（P<0.05）;生物礦化相關(guān)基因在不同蚌齡的外套膜組織中表達(dá)量不同, 1齡三角帆蚌CA基因表達(dá)量和CA酶活性最高（P<0.05）, ALP基因表達(dá)量和ALP酶活在0.5齡三角帆蚌中顯著高于其他蚌齡（P<0.05）。本研究旨為深入探討三角帆蚌外套膜細(xì)胞增殖能力及人工育珠過程中供體蚌的選擇奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】：中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2020,27(05)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【部分圖文】：

不同蚌齡外套膜細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度變化不同字母代表顯著性差異(P<0.05).

圖1 不同蚌齡外套膜細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度變化不同字母代表顯著性差異(P<0.05).不同蚌齡的三角帆蚌外套膜組織CA活力如圖2b所示,隨著蚌齡的增高,其CA活力呈現(xiàn)先增高后降低并趨于平穩(wěn)的趨勢(shì)。1齡蚌外套膜組織的CA酶活力顯著高于其他蚌齡(P<0.05),2齡蚌外套膜組織CA活力僅次于1齡蚌,然后是0.5齡、3齡、4齡蚌,且其CA活力差異不顯著(P>0.05)。

qRT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),ALP基因在不同蚌齡階段外套膜組織中的表達(dá)水平存在顯著差異(P<0.05),如圖3a所示,隨著蚌齡的增高,其ALP基因的表達(dá)水平呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)。ALP基因在0.5齡蚌中表達(dá)量顯著高于其他蚌齡(P<0.05),其次是1齡蚌,然后是2齡蚌,最后是3齡和4齡蚌,且3齡和4齡蚌ALP基因表達(dá)水平差異不顯著(P>0.05)。qRT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),隨著養(yǎng)殖年限的增高其CA基因的表達(dá)水平呈現(xiàn)先增高后降低并最后趨于平穩(wěn)的趨勢(shì)(圖3b),CA基因在1齡蚌中表達(dá)水平顯著高于其他蚌齡(P<0.05)且約為2齡蚌的兩倍,2齡蚌CA基因在外套膜組織中的表達(dá)水平僅次于1齡蚌,CA基因在0.5齡、3齡和4齡蚌外套膜組織表達(dá)水平差異不顯著(P>0.05)且均顯著低于1齡和2齡蚌(P<0.05)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國(guó)淡水珍珠養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展報(bào)告[J]. 李家樂,王德芬,白志毅,關(guān)翌博,吳叢迪,陳藍(lán)蓀.  中國(guó)水產(chǎn). 2019(03)
[2]三角帆蚌新發(fā)現(xiàn)的貝殼基質(zhì)蛋白基因hic9的分離、鑒定及其在珍珠早期形成過程中的作用[J]. 劉曉軍,郭煒,金參,白志毅,李家樂.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2019(04)
[3]流式細(xì)胞術(shù)研究細(xì)胞增殖的方法與技術(shù)[J]. 戶乃麗.  醫(yī)學(xué)信息. 2019(01)
[4]三角帆蚌F5殼色及生長(zhǎng)性狀選育效果評(píng)價(jià)[J]. 吳雷明,白志毅,劉曉軍,李清清,殷浩,李家樂.  中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2016(03)
[5]脊椎動(dòng)物源細(xì)胞因子對(duì)合浦珠母貝外套膜細(xì)胞培養(yǎng)及其礦化功能的影響[J]. 孔瑋,李世國(guó),謝莉萍,張榮慶.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2015(11)
[6]三角帆蚌EFCB1基因cDNA序列克隆及表達(dá)研究[J]. 祁曉翔,李文娟,尚朝,周子睿,尚攀,施志儀.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2015(07)
[7]三角帆蚌種質(zhì)資源研究進(jìn)展[J]. 汪桂玲,白志毅,劉曉軍,李家樂.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2014(09)
[8]三角帆蚌外套膜細(xì)胞體外培養(yǎng)優(yōu)化及體內(nèi)植入培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J]. 李倩,施志儀,李文娟,黃凱,祁曉翔.  中國(guó)水產(chǎn)科學(xué). 2014(02)
[9]三角帆蚌外套膜細(xì)胞培養(yǎng)的改進(jìn)與大型有核珍珠的培育研究[J]. 靳雨麗,施志儀,李文娟,郝瑩瑩,強(qiáng)剛.  上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(05)
[10]應(yīng)用激光共聚焦顯微技術(shù)研究Ca2+在三角帆蚌組織內(nèi)的積累與分布[J]. 李文娟,施志儀,郝瑩瑩,葉顯峰.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2011(02)

碩士論文
[1]檢測(cè)堿性磷酸酶的熒光探針的合成及應(yīng)用[D]. 高志偉.浙江海洋大學(xué) 2018
[2]鈣離子濃度對(duì)三角帆蚌外套膜和內(nèi)臟團(tuán)細(xì)胞內(nèi)鈣含量及碳酸酐酶的影響[D]. 周子睿.上海海洋大學(xué) 2016
[3]三角帆蚌貝殼珍珠層顏色形成相關(guān)基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 羅紅瑞.上海海洋大學(xué) 2015
[4]三角帆蚌供片蚌對(duì)珍珠質(zhì)量的影響[D]. 劉越.上海海洋大學(xué) 2013
[5]三角帆蚌兩種貝殼珍珠質(zhì)顏色對(duì)珍珠顏色影響的研究[D]. 朱文彬.上海海洋大學(xué) 2011
[6]三種環(huán)境因子對(duì)三角帆蚌外套膜Ca2+代謝和ALP基因表達(dá)的影響[D]. 郝瑩瑩.上海海洋大學(xué) 2011



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