生產(chǎn)和研究試驗(yàn)表明,鱖（Siniperca chuatsi）雌、雄魚(yú)在不同階段存在生長(zhǎng)差異。因此,單性養(yǎng)殖可能具有潛在的應(yīng)用前景。論文以鱖作為研究對(duì)象,通過(guò)組織學(xué)切片觀(guān)察了0～60日齡性腺的發(fā)育過(guò)程;利用AFLP分子標(biāo)記篩選雌、雄魚(yú)性別差異片段,尋找性別特異性標(biāo)記;比較了孵化后0.5～4.0月齡雌、雄魚(yú)的生長(zhǎng)特征,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）測(cè)定了血清中性類(lèi)固醇激素——睪酮（Testosterone,T）和雌二醇（Estradiol,E2）含量,采用實(shí)時(shí)熒光定量分析了腦、肝臟和肌肉組織GH/IGF生長(zhǎng)軸相關(guān)基因的表達(dá)差異,以期為鱖性腺發(fā)育、性別分子鑒定、兩性生長(zhǎng)差異機(jī)理提供基礎(chǔ)資料,主要研究結(jié)果如下:（1）早期階段性腺發(fā)育15日齡,觀(guān)察到原始性腺組織,性腺并未分化。20日齡,原始生殖細(xì)胞開(kāi)始增殖。25日齡,原始生殖細(xì)胞大量增殖。30日齡,性腺呈細(xì)線(xiàn)狀,原始生殖細(xì)胞開(kāi)始分化為精原細(xì)胞,精原細(xì)胞核較大,染色較深。35日齡,精巢形成包裹數(shù)個(gè)精原細(xì)胞的囊狀結(jié)構(gòu)。40日齡,精原細(xì)胞成簇分布,精小葉雛形形成。45日齡,精原細(xì)胞達(dá)... 

【文章來(lái)源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

鱖DNA雙酶切瓊脂糖凝膠圖譜

上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文16OD260/OD2802.0132.0011.9971.8791.9761.9452.1022.0132.1102.0871.9762.103Concentration(ng/μL)894.13987.451121.981067.45976.98956.321382.14987.56997.321205.871423.471329.76圖2-2鱖DNA瓊脂糖凝膠圖譜從左往右先DL2000DNAmaker，12尾雌12尾雄，下同F(xiàn)ig.2-2MapofDNAinagaroseofSinipercachuatsiDL2000DNAmaker12femalesand12malesfromlefttoright，thesameappliesbelowDNA經(jīng)Tru9Ⅰ和EcoRⅠ雙酶切后，在1.5%的瓊脂糖凝膠上電泳檢測(cè)（圖2-3），產(chǎn)物條帶分散，DNA完全被酶解，可以進(jìn)行連接反應(yīng)。連接完成后經(jīng)E0+M0作為預(yù)擴(kuò)增引物的擴(kuò)增效果良好（圖2-4），片段在100～800bp之間。圖2-3鱖DNA雙酶切瓊脂糖凝膠圖譜Fig.2-3MapofDNAdoubleenzymesrestrictioninagaroseofSinipercachuatsi圖2-4鱖DNA預(yù)擴(kuò)增瓊脂糖凝膠圖譜Fig.2-4MapofDNApreamplificationrestrictioninagaroseofSinipercachuatsi

上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文17用64對(duì)AFLP引物組合對(duì)雌、雄DNA混合池進(jìn)行掃描，共擴(kuò)增出1252條多態(tài)性條帶，其中，有差異條帶的引物組合21對(duì)，雌性特異條帶有18條，雄性特異條帶有13條，部分引物組合見(jiàn)圖2-5。圖2-5不同AFLP引物組合對(duì)鱖雌雄DNA混合池?cái)U(kuò)增Fig.2-5AFLPamplificationofthemixedDNAbulksofthefemaleandmaleofSinipercachuatsiusingdifferentprimercombinations引物組合從左到右分別是E1M1、E1M2、E1M3、E1M7、E1M8、E2M1、E2M2、E2M3、E7M8、E8M1、E8M7，兩個(gè)泳帶為一組，箭頭指出的為差異條帶。PrimercombinationswereE1M1,E1M2,E1M3,E1M7,E1M8,E2M1,E2M2,E2M3,E7M8,E8M1,E8M7fromlefttoright,respectively.Twobandswereagroupandarrowsindicateddifferentbands.對(duì)上述雌雄差異的引物組合，進(jìn)行擴(kuò)大樣品篩眩在4個(gè)選擇擴(kuò)增組合E1M8、E5M8、E6M7、E7M3中，發(fā)現(xiàn)5個(gè)雌雄差異性位點(diǎn)（圖2-6）。其中，E5M8-480在雄性中擴(kuò)增比例為91.67%，E1M8-440和E5M8-370在雌性中比例分別為91.67%和83.33%，E6M7-280和E7M3-380為雌性所特有，但擴(kuò)增比例為58.33%，引物組合及在雌雄個(gè)體比例見(jiàn)表2-7。圖2-6引物E7M3對(duì)鱖雌雄的AFLP擴(kuò)增Fig.2-6AFLPamplificationoftheprimerE7M3betweenthefemalesandmalesofSiniperca

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]金錢(qián)魚(yú)雌雄性腺轉(zhuǎn)錄組分析及性類(lèi)固醇激素水平的研究[D]. 何飛祥.廣東海洋大學(xué) 2019
[2]性類(lèi)固醇激素對(duì)黃顙魚(yú)雌雄生長(zhǎng)二態(tài)性的影響[D]. 王凌宇.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[3]金錢(qián)魚(yú)胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）的克隆及雌二醇對(duì)其表達(dá)的影響[D]. 張克偉.廣東海洋大學(xué) 2018
[4]尼奧羅非魚(yú)性腺發(fā)育、精子生物學(xué)及cyp19a1a基因表達(dá)與甲基化水平的研究[D]. 趙永華.上海海洋大學(xué) 2017
[5]大黃魚(yú)原始生殖細(xì)胞發(fā)生、遷移及性腺性別分化的組織學(xué)研究[D]. 游秀容.集美大學(xué) 2012
[6]孔雀魚(yú)遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建及性別特異標(biāo)記的篩選[D]. 劉昕.中國(guó)海洋大學(xué) 2011
[7]全雌鯉魚(yú)育種技術(shù)及性別相關(guān)分子標(biāo)記研究[D]. 司偉.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[8]廣東與湖南養(yǎng)殖鱖群體遺傳多樣性研究[D]. 李國(guó)慶.華南師范大學(xué) 2005



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