本文以人工培育的條石鯛（Oplegnathus fasciatus）為研究對象，運用組織學(xué)、同源性克隆和RACE克隆法、放射免疫測定（RIA）法等技術(shù)手段，對條石鯛卵巢各發(fā)育期特征、促性腺激素（GonadotropinHormone, GtH）和膜孕激素受體（membrane progestin receptor，mPRα）cDNA全長的克隆、在組織表達(dá)特性和卵巢發(fā)育不同時期的表達(dá)特性、血清中促性腺激素在繁殖周期中的變化規(guī)律等進(jìn)行了研究，為深入認(rèn)識條石鯛生殖調(diào)控機制提供了理論支撐。本研究結(jié)果為全面揭示條石鯛生殖調(diào)控機制以及繁殖調(diào)控研究提供了豐富的基礎(chǔ)資料。相關(guān)結(jié)果如下：1.條石鯛促性腺激素α（GtHα）亞基的克隆及其表達(dá)特性分析采用同源性克隆和cDNA末端快速擴增（RACE）方法，從條石鯛（Oplegnathidae fasciatus）垂體中獲得了全長為897bp的GtHα cDNA序列，其中包含249bp的5’非編碼區(qū)、399bp的開放閱讀框和249bp的3’非編碼區(qū)。其ORF編碼132個氨基酸，前38個氨基酸為信號肽。肽鏈中包括10個保守Cys殘基和2個N-糖基化位點，在第122... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

硬骨魚類下丘腦-垂體-性腺軸調(diào)控圖（仿劉筠，1993）

隨著發(fā)育的進(jìn)行，放射帶越來越模糊，并且逐漸縮小，以Ⅳ時相卵母細(xì)胞為主的卵巢稱為Ⅳ期卵巢（圖2-1-B）；6 月份，卵母細(xì)胞呈圓球形，直徑可以達(dá)到 326.1-370.2μm。由于卵黃顆粒的相互融合和積累，使得核仁消失，卵細(xì)胞脫離濾泡膜到達(dá)卵巢腔，以Ⅴ時相卵母細(xì)胞為主的卵巢稱為Ⅴ期卵巢（圖 2-1-C）；8 月份，由于親魚剛剛產(chǎn)完卵，卵巢萎縮，呈皺縮厚后囊狀，卵巢壁上的平滑肌纖維松弛，厚度明顯增加。此時卵母細(xì)胞呈圓球形，卵黃顆粒已經(jīng)相互融合，核膜消失，此時為Ⅵ期卵巢（圖2-1-D）。圖 2-1 條石鯛卵巢發(fā)育不同時期的形態(tài)圖A：Ⅲ期卵巢；B：Ⅳ期卵巢；C：Ⅴ期卵巢；D：Ⅵ期卵巢Fig.2-1 The morphological characters in ovarian development stage ofOplegnathus fasciatusA：Ovarian of phase Ⅲ×40; B：Ovarian of phase Ⅳ×200; C：Ovarian of phase Ⅴ×200; D：Ovarian of phase Ⅵ×2002.2 條石鯛 GtHα 的序列分析和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測條石鯛 GtHα cDNA 全長 897bp，編碼了 132 個氨基酸，包括一個 399bp 的 ORF、一個 249bp 的 5'UTR 和一個 249bp 的 3'UTR。第 1～38 個氨基酸為信號肽，第39～132 個氨基酸為成熟肽。成熟肽序列包含了 10 個保守的 Cys，分別位于第49、52、69、72、73、100、101、122、124、127 氨基酸殘基處

圖 2-2：條石鯛 GtHα cDNA 全長以及推斷的氨基酸序列黑色陰影部分表示起始密碼子；方框部分表示終止密碼子；下劃線部分表示加尾信橢圓部分表示 10 個半胱氨酸；.2-2 The cDNA sequence and its deduced amino acid sequence of gonadotropin hormocommon-alpha subunit from Oplegnathus fasciatus The initiation codon (ATG) is Black shadow part and the stop codon is box section paenylation signal is Underlined part. The ten conservative cysteines are shown in ellipse圖 2-3 SOPMA 軟件對 GtHα 蛋白二級結(jié)構(gòu)的分析結(jié)果：藍(lán)色表示 α-螺旋；綠色表示 β-轉(zhuǎn)角；紫色表示無規(guī)則卷曲；紅色表示延伸鏈ig.2-3 Secondary structure of Oplegnathus fasciatus GtHα protein analyzed by SOPWABlue: α-helix；Green: β-turn；Purple: random coil；Red: extended strand

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]圓斑星鰈促性腺激素釋放激素基因克隆及表達(dá)特性[J]. 柳學(xué)周,徐永江,廖梅杰,潘傳燕,王妍妍.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2013(01)
[2]條斑星鰈精巢年周期發(fā)育規(guī)律和血液性類固醇激素含量變化[J]. 李春廣,柳學(xué)周,徐永江,王妍妍,孫中之.  漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2012(03)
[3]溫度和鹽度對條石鯛胚胎發(fā)育的影響[J]. 劉偉成,冀德偉,單樂州,陳少波,謝起浪,周志明,閆茂倉.  水生態(tài)學(xué)雜志. 2010(06)
[4]條石鯛頭腎和脾臟的顯微結(jié)構(gòu)觀察[J]. 胡玲玲,李加兒,區(qū)又君,于娜,王剛.  南方水產(chǎn). 2010(03)
[5]鹽度對條石鯛胚胎發(fā)育的影響[J]. 蔡文超,區(qū)又君,李加兒.  生態(tài)學(xué)雜志. 2010(05)
[6]條石鯛卵巢發(fā)育的組織學(xué)研究[J]. 張鳳萍,柳敏海,彭志蘭,張健,傅榮兵,羅海忠.  大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報. 2010(02)
[7]條石鯛的早期生長發(fā)育特征[J]. 柳學(xué)周,徐永江,王妍妍,呂永謙,曲建忠.  動物學(xué)報. 2008(02)
[8]條石鯛早期發(fā)育的形態(tài)特征[J]. 肖志忠,鄭炯,于道德,李軍.  海洋科學(xué). 2008(03)
[9]條石鯛消化道的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)[J]. 王健鑫,石戈,李鵬,劉美英,王日昕.  水產(chǎn)學(xué)報. 2006(05)
[10]丁卵巢周年變化的組織學(xué)觀察[J]. 凌去非,李思發(fā),梁新華,殷建國,劉曉辰.  上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報. 2006(01)

碩士論文
[1]促性腺激素在雌性半滑舌鰨繁殖周期的生理功能研究[D]. 王珊珊.中國海洋大學(xué) 2013



本文編號：3275934