Toll樣受體在厚殼貽貝免疫和發(fā)育中的作用研究
發(fā)布時間：2021-07-07 11:08
厚殼貽貝（Mytilus coruscus）是我國重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一,近年來隨著海洋環(huán)境不斷惡化,海洋貝類微生物污染越來越普遍,嚴重影響了貽貝健康養(yǎng)殖的需求。此外,微生物病原菌（例如海洋弧菌等）引起的貝類疾病時常發(fā)生,從而造成巨大的經(jīng)濟損失。從厚殼貽貝的免疫系統(tǒng)著手,深入研究厚殼貽貝免疫預防機制,探討提高貽貝抗病能力的有效方法,是保持厚殼貽貝養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的必經(jīng)之路。Toll樣受體（Toll-like receptors,TLR）是無脊椎動物重要的模式識別受體之一,可識別多種病原微生物及其他非己物質(zhì),而髓樣分化因子88（myeloid differentiation factor 88,MyD88）是TLR信號通路中與TLR直接作用的接頭分子,兩者在激活后續(xù)的一系列免疫反應中有重要作用。本研究基于厚殼貽貝外套膜轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),鑒定了54個TLR基因并對其進行初步分析;克隆了兩個TLR基因和一個MyD88基因cDNA全長,對它們的具體結(jié)構(gòu)和功能進行了研究;此外,探索了兩個TLR基因在厚殼貽貝發(fā)育過程中的作用。主要結(jié)果如下:1.從厚殼貽貝外套膜轉(zhuǎn)錄組中鑒定TLR基因及其初步分析厚殼貽貝外套...
【文章來源】：上海海洋大學上海市
【文章頁數(shù)】：83 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
TLR家族識別配體概要[24]
6圖 1-2 Toll 受體信號通路[27]Fig. 1-2 Toll-like Receptor signaling pathway.1 MyD88 依賴的 TLR 信號通路MyD88 依賴的 TLR 信號通路是 Toll 樣受體信號轉(zhuǎn)導中的共同通路，幾乎R 都可通過 MyD88 依賴途徑完成信號轉(zhuǎn)導。MyD88 最初是作為髓樣細胞因被分離，MyD88 的 N 端為死亡結(jié)構(gòu)域（DD），與它 C-末端的 TIR 結(jié)構(gòu)域一段短的連接序列分辨開。后來，MyD88 作為一個接頭分子被克隆得到， IL-1 刺激后募集 IRAK 結(jié)合 IL-1 受體復合物[26]。 當細胞膜的 Toll 樣受體刺激后，MyD88 與 TLR（除 TLR3）TIR 域相結(jié)合，并將 IRAK（IL-1 receociated kinase）家族成員招募到 TLR 中。IRAK 隨后通過磷酸化被激活，并適配器 TRAF6 (tumor necrosis factor receptor-associated factor 6)結(jié)合。從而
Fig. 2-1 Phylognetic tree of the TIR domain of toll-like receptors of M. coruscus inferred through amaximum-likelihood analysis. The predicted protein domains are shown on the right side.2.3.2 厚殼貽貝 TLR 的表達模式分析為了解 McTLR 的時空表達模式，我們從系統(tǒng)進化樹每個分支中隨機選取了一個TLR 基因，通過 RT-qPCR 檢測其在厚殼貽貝不同發(fā)育階段和成體各組織中的表達情況。如圖 2-2 所示，TLR5 在擔輪幼蟲和 D 型幼蟲階段未檢測到，直到殼頂幼蟲才有表達；TLR29 和 TLR31 在 D 型幼蟲階段開始有表達，而 TLR8、TLR12 和 TLR14在五個發(fā)育階段均有表達。但 TLR5、TLR8、TLR12、TLR14、TLR29 和 TLR31 都在稚貝階段表達量最高（P<0.05）。成體各組織中的表達情況如圖 2-3 所示。TLR5在血細胞中表達量最高（P<0.05），在足中表達量最低（P<0.05）；TLR8 表達量在各組織間無明顯差異（P>0.05）；TLR12 和 TLR14 分布在閉殼肌和外套膜中表達量最高（P<0.05）；TLR29 和 TLR31 都在鰓中表達量最高（P<0.05），而 TLR31 在足中未檢測到。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]miRNA調(diào)控Toll樣受體4參與神經(jīng)系統(tǒng)缺血缺氧性損傷的研究進展[J]. 何麗,楊俊娜,徐陶,徐瑞,許阿香,楊帆,曾俊偉. 神經(jīng)解剖學雜志. 2018(02)
[2]Toll樣受體信號轉(zhuǎn)導通路參與神經(jīng)損傷修復的研究進展[J]. 丁煜萌,鄺芳,游思維,魏曉燕. 細胞與分子免疫學雜志. 2016(11)
[3]歐洲鰻鱺MyD88基因的克隆及其免疫功能分析[J]. 姚志剛,馮建軍,王藝磊,郭松林,林鵬,張子平,張在鵬. 水產(chǎn)學報. 2015(03)
[4]半滑舌鰨髓樣分化因子的克隆和表達分析[J]. 沙珍霞,王娜,王啟龍,徐田軍,王磊,董曉麗,陳松林. 中國水產(chǎn)科學. 2010(04)
碩士論文
[1]中國明對蝦Toll樣受體基因的克隆和表達分析[D]. 楊昌健.中國科學院研究生院（海洋研究所） 2008
本文編號：3269522
【文章來源】：上海海洋大學上海市
【文章頁數(shù)】：83 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
TLR家族識別配體概要[24]
6圖 1-2 Toll 受體信號通路[27]Fig. 1-2 Toll-like Receptor signaling pathway.1 MyD88 依賴的 TLR 信號通路MyD88 依賴的 TLR 信號通路是 Toll 樣受體信號轉(zhuǎn)導中的共同通路，幾乎R 都可通過 MyD88 依賴途徑完成信號轉(zhuǎn)導。MyD88 最初是作為髓樣細胞因被分離，MyD88 的 N 端為死亡結(jié)構(gòu)域（DD），與它 C-末端的 TIR 結(jié)構(gòu)域一段短的連接序列分辨開。后來，MyD88 作為一個接頭分子被克隆得到， IL-1 刺激后募集 IRAK 結(jié)合 IL-1 受體復合物[26]。 當細胞膜的 Toll 樣受體刺激后，MyD88 與 TLR（除 TLR3）TIR 域相結(jié)合，并將 IRAK（IL-1 receociated kinase）家族成員招募到 TLR 中。IRAK 隨后通過磷酸化被激活，并適配器 TRAF6 (tumor necrosis factor receptor-associated factor 6)結(jié)合。從而
Fig. 2-1 Phylognetic tree of the TIR domain of toll-like receptors of M. coruscus inferred through amaximum-likelihood analysis. The predicted protein domains are shown on the right side.2.3.2 厚殼貽貝 TLR 的表達模式分析為了解 McTLR 的時空表達模式，我們從系統(tǒng)進化樹每個分支中隨機選取了一個TLR 基因，通過 RT-qPCR 檢測其在厚殼貽貝不同發(fā)育階段和成體各組織中的表達情況。如圖 2-2 所示，TLR5 在擔輪幼蟲和 D 型幼蟲階段未檢測到，直到殼頂幼蟲才有表達；TLR29 和 TLR31 在 D 型幼蟲階段開始有表達，而 TLR8、TLR12 和 TLR14在五個發(fā)育階段均有表達。但 TLR5、TLR8、TLR12、TLR14、TLR29 和 TLR31 都在稚貝階段表達量最高（P<0.05）。成體各組織中的表達情況如圖 2-3 所示。TLR5在血細胞中表達量最高（P<0.05），在足中表達量最低（P<0.05）；TLR8 表達量在各組織間無明顯差異（P>0.05）；TLR12 和 TLR14 分布在閉殼肌和外套膜中表達量最高（P<0.05）；TLR29 和 TLR31 都在鰓中表達量最高（P<0.05），而 TLR31 在足中未檢測到。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]miRNA調(diào)控Toll樣受體4參與神經(jīng)系統(tǒng)缺血缺氧性損傷的研究進展[J]. 何麗,楊俊娜,徐陶,徐瑞,許阿香,楊帆,曾俊偉. 神經(jīng)解剖學雜志. 2018(02)
[2]Toll樣受體信號轉(zhuǎn)導通路參與神經(jīng)損傷修復的研究進展[J]. 丁煜萌,鄺芳,游思維,魏曉燕. 細胞與分子免疫學雜志. 2016(11)
[3]歐洲鰻鱺MyD88基因的克隆及其免疫功能分析[J]. 姚志剛,馮建軍,王藝磊,郭松林,林鵬,張子平,張在鵬. 水產(chǎn)學報. 2015(03)
[4]半滑舌鰨髓樣分化因子的克隆和表達分析[J]. 沙珍霞,王娜,王啟龍,徐田軍,王磊,董曉麗,陳松林. 中國水產(chǎn)科學. 2010(04)
碩士論文
[1]中國明對蝦Toll樣受體基因的克隆和表達分析[D]. 楊昌健.中國科學院研究生院（海洋研究所） 2008
本文編號：3269522
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