病害是羅非魚(yú)養(yǎng)殖中的問(wèn)題,病原主要是無(wú)乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae）,但是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外新爆發(fā)的羅非魚(yú)湖病毒病也造成了大規(guī)模羅非魚(yú)死亡事件,導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重制約著羅非魚(yú)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。本研究中主要在我國(guó)羅非魚(yú)主要養(yǎng)殖區(qū)地區(qū),進(jìn)行了羅非魚(yú)湖病毒病分子流行病學(xué)調(diào)查研究,建立了羅非魚(yú)湖病毒檢測(cè)技術(shù),并對(duì)分離鑒定的羅非魚(yú)湖病毒基因組結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析。此外。我們研制了羅湖病毒病亞單位疫苗,并對(duì)其免疫效果進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。主要研究結(jié)果如下:1.羅非魚(yú)湖病毒病分子流行病學(xué)調(diào)查2018年10月和2019年10月,對(duì)羅非魚(yú)養(yǎng)殖地區(qū)——雷州、化州、吳川、高州和廉江5個(gè)地區(qū)進(jìn)行了羅非魚(yú)湖病毒感染情況調(diào)查,共采集了羅非魚(yú)樣本150個(gè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),雷州48個(gè)樣本中陽(yáng)性率為62.5%;化州21個(gè)樣本中檢測(cè)結(jié)果均為陰性;吳川21個(gè)樣陽(yáng)性率為19%;高州15個(gè)樣本陽(yáng)性率為13.3%;廉江45個(gè)樣本中陽(yáng)性率為24.4%。結(jié)果表明羅非魚(yú)湖病毒在羅非魚(yú)養(yǎng)殖區(qū)流行。2.羅湖病毒全基因組測(cè)序及序列分析PCR擴(kuò)增了羅非魚(yú)湖病毒節(jié)段1～10并進(jìn)行了測(cè)序,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各片段大小分別為1641 bp、147... 

【文章來(lái)源】：廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

核酸電泳檢測(cè)結(jié)果

羅非魚(yú)湖病毒病分子流行病學(xué)調(diào)查、檢測(cè)技術(shù)的建立及亞單位疫苗研制18基本理化性質(zhì)https：//web.expasv.org/protparam抗原表位https：//imed.med.ucm.es/Tools/antigenic.pl跨膜區(qū)結(jié)構(gòu)https：//www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/#Opennewwindow莖環(huán)結(jié)構(gòu)https：//rfam.xfam.org疏水性https：//web.expasy.org/protscale磷酸化位點(diǎn)https：//www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos3.3結(jié)果3.3.1病毒致死情況分析結(jié)果如表3-6所示，原液組和稀釋組攻毒14d內(nèi)的累積死亡率分別達(dá)達(dá)91.70%和83.30%，可見(jiàn)該病毒對(duì)羅非魚(yú)具有較強(qiáng)的毒力。表3-6羅非魚(yú)感染病毒懸液的試驗(yàn)結(jié)果Table3-6Testresultsoftilapiainfectedwithvirussuspension組別重復(fù)數(shù)量（尾）劑量（mL）不同時(shí)間的死亡數(shù)（尾）死亡總數(shù)（尾）平均死1-4d5d6d7d8d9d10d11-14d亡率/%原液組1120.200123320112120.201122241291.70%3120.2001123310稀釋組1120.20012232102120.2002322221183.30%3120.200123210對(duì)照組1120.20000000002120.200000000003120.2000000000不同養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病魚(yú)樣本回歸感染健康羅非魚(yú)，均成功感染，普通PCR檢測(cè)結(jié)果如圖3-1。在回歸感染的發(fā)病魚(yú)各個(gè)組織檢測(cè)結(jié)果如圖3-2，各組織普通PCR檢測(cè)，均出現(xiàn)了電泳條帶。圖3-1不同養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病魚(yú)的PCR檢測(cè)結(jié)果Figure3-1PCRdetectionresultsofdiseasedfishindifferentfarms注：M，Marker；N，陰性對(duì)照；P，陽(yáng)性對(duì)照；1-18為回歸感染患病魚(yú)樣品

發(fā)病魚(yú)不同組織的PCR檢測(cè)結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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