病害是羅非魚養(yǎng)殖中的問題,病原主要是無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae）,但是近年來國內(nèi)外新爆發(fā)的羅非魚湖病毒病也造成了大規(guī)模羅非魚死亡事件,導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟損失,嚴重制約著羅非魚水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。本研究中主要在我國羅非魚主要養(yǎng)殖區(qū)地區(qū),進行了羅非魚湖病毒病分子流行病學(xué)調(diào)查研究,建立了羅非魚湖病毒檢測技術(shù),并對分離鑒定的羅非魚湖病毒基因組結(jié)構(gòu)進行了分析。此外。我們研制了羅湖病毒病亞單位疫苗,并對其免疫效果進行了初步評價。主要研究結(jié)果如下:1.羅非魚湖病毒病分子流行病學(xué)調(diào)查2018年10月和2019年10月,對羅非魚養(yǎng)殖地區(qū)——雷州、化州、吳川、高州和廉江5個地區(qū)進行了羅非魚湖病毒感染情況調(diào)查,共采集了羅非魚樣本150個。結(jié)果發(fā)現(xiàn),雷州48個樣本中陽性率為62.5%;化州21個樣本中檢測結(jié)果均為陰性;吳川21個樣陽性率為19%;高州15個樣本陽性率為13.3%;廉江45個樣本中陽性率為24.4%。結(jié)果表明羅非魚湖病毒在羅非魚養(yǎng)殖區(qū)流行。2.羅湖病毒全基因組測序及序列分析PCR擴增了羅非魚湖病毒節(jié)段1～10并進行了測序,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各片段大小分別為1641 bp、147... 

【文章來源】：廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

核酸電泳檢測結(jié)果

羅非魚湖病毒病分子流行病學(xué)調(diào)查、檢測技術(shù)的建立及亞單位疫苗研制18基本理化性質(zhì)https：//web.expasv.org/protparam抗原表位https：//imed.med.ucm.es/Tools/antigenic.pl跨膜區(qū)結(jié)構(gòu)https：//www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/#Opennewwindow莖環(huán)結(jié)構(gòu)https：//rfam.xfam.org疏水性https：//web.expasy.org/protscale磷酸化位點https：//www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos3.3結(jié)果3.3.1病毒致死情況分析結(jié)果如表3-6所示，原液組和稀釋組攻毒14d內(nèi)的累積死亡率分別達達91.70%和83.30%，可見該病毒對羅非魚具有較強的毒力。表3-6羅非魚感染病毒懸液的試驗結(jié)果Table3-6Testresultsoftilapiainfectedwithvirussuspension組別重復(fù)數(shù)量（尾）劑量（mL）不同時間的死亡數(shù)（尾）死亡總數(shù)（尾）平均死1-4d5d6d7d8d9d10d11-14d亡率/%原液組1120.200123320112120.201122241291.70%3120.2001123310稀釋組1120.20012232102120.2002322221183.30%3120.200123210對照組1120.20000000002120.200000000003120.2000000000不同養(yǎng)殖場發(fā)病魚樣本回歸感染健康羅非魚，均成功感染，普通PCR檢測結(jié)果如圖3-1。在回歸感染的發(fā)病魚各個組織檢測結(jié)果如圖3-2，各組織普通PCR檢測，均出現(xiàn)了電泳條帶。圖3-1不同養(yǎng)殖場發(fā)病魚的PCR檢測結(jié)果Figure3-1PCRdetectionresultsofdiseasedfishindifferentfarms注：M，Marker；N，陰性對照；P，陽性對照；1-18為回歸感染患病魚樣品

發(fā)病魚不同組織的PCR檢測結(jié)果

【參考文獻】：
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本文編號：3262845