發(fā)布時(shí)間：2021-06-11 23:29

　　以我國重要的冷水性經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖魚類大菱鲆（Scophthalmus maximus L.）為研究對象，在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖水系統(tǒng)進(jìn)行攝食生長實(shí)驗(yàn)，以探究飼料中脂肪水平和脂肪酸組成對大菱鲆生長、脂肪酸組成、脂肪沉積及其相關(guān)基因表達(dá)的影響，在此基礎(chǔ)上探討大菱鲆攝食高脂或高植物油水平飼料后肝臟脂肪過多沉積的分子機(jī)制。本文的研究內(nèi)容和主要研究結(jié)果如下：1大菱鲆脂蛋白脂酶、過氧化物酶體增殖物激活受體α和微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白的克隆、表征分析和組織差異性表達(dá)通過同源克隆和RACE技術(shù)從大菱鲆中獲得脂蛋白脂酶（LPL）、過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）和微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白（MTP）的cDNA全長。大菱鲆LPL全長共計(jì)2074bp，其中5′-非編碼區(qū)、3′-非編碼區(qū)和開放閱讀框（ORF）分別為152bp、377bp和1545bp，編碼514個(gè)氨基酸。LPL具有1個(gè)跨膜區(qū)域。通過氨基酸序列比對發(fā)現(xiàn)，大菱鲆LPL與其它已知魚綱脊椎動(dòng)物該基因序列具有高度同源性。組織差異性表達(dá)結(jié)果顯示，大菱鲆LPL在肌肉中表達(dá)量最高，其次是肝臟和腎臟，而在鰓、腦、脾臟、心臟、腎臟、精巢、小腸和幽門盲囊中表達(dá)量較低（P&l... 

【文章來源】：中國海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：213 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 飼料脂肪在魚體中的代謝
        1.1 脂肪的消化
        1.2 脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收
        1.3 細(xì)胞內(nèi)的脂肪代謝
            1.3.1 脂肪分解代謝
            1.3.2 脂肪合成代謝
            1.3.3 脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)
    2 脂肪沉積
        2.1 脂肪沉積的概念
        2.2 脂肪沉積的產(chǎn)所
        2.3 脂肪沉積相關(guān)的調(diào)控因子
            2.3.1 過氧化物酶體增殖物激活受體
            2.3.2 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1
            2.3.3 肝 X 受體
            2.3.4 肝細(xì)胞核因子 4α
            2.3.5 法尼酯衍生物 X 受體
    3 魚類脂肪沉積影響因素
        3.1 飼料脂肪水平
        3.2 飼料脂肪酸組成
        3.3 激素類
            3.3.1 胰島素
            3.3.2 瘦素
    4 展望
    5 本研究的目的和意義
        5.1 研究目的
        5.2 研究意義
第二章 大菱鲆脂蛋白脂酶、過氧化物酶體增殖物激活受體和微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白的克隆、表征分析和組織差異性表達(dá)
    1 引言
    2 材料方法
        2.1 樣品取樣
        2.2 RNA 提取和 cDNA 合成
        2.3 引物的設(shè)計(jì)和核心片段的克隆
        2.4 3′-RACE PCR
        2.5 5′-RACE PCR
        2.6 序列分析和系統(tǒng)進(jìn)化分析
        2.7 實(shí)時(shí)定量 PCR
        2.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 核苷酸和氨基酸序列
        3.2 序列比對和系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
        3.3 組織差異性表達(dá)
    4. 討論
    附表和圖
第三章 飼料脂肪水平對大菱鲆幼魚生長、血漿生化指標(biāo)、脂肪酸組成、脂肪沉積及相關(guān)基因表達(dá)的影響
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 飼料配方和制備
        2.2 實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖和樣品
        2.3 化學(xué)分析
            2.3.1 體組成分析
            2.3.2 生化分析
        2.4 RNA 提取、基因核心片段的克隆和實(shí)時(shí)定量 PCR （qPCR）
            2.4.1 肝臟 RNA 提取和 cDNA 的合成
            2.4.2 引物的設(shè)計(jì)和核心片段的克隆
            2.4.3 實(shí)時(shí)定量 PCR
        2.5 計(jì)算方法和統(tǒng)計(jì)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 存活、生長和形體指標(biāo)
        3.2 魚體體成分
        3.3 肝臟和肌肉脂肪酸組成
        3.4 血漿生化指標(biāo)
        3.5 肝臟 LPL、G6PD 和 ME 酶活力及脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)
    4 討論
    附表和圖
第四章 飼料脂肪酸水平和組成對大菱鲆幼魚生長和脂肪酸組成的影響
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 飼料配方和制備
        2.2 實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖和樣品采集
        2.3 化學(xué)分析
            2.3.1 體成分分析
            2.3.2 生化分析
        2.4 釔的含量測定
        2.5 計(jì)算方法和統(tǒng)計(jì)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 存活率、生長和形體指標(biāo)
            3.1.1 飼料棕櫚油（PO）水平
            3.1.2 飼料菜籽油（RO）水平
            3.1.3 飼料豆油（SO）水平
            3.1.4 飼料亞麻籽油（LO）水平
            3.1.5 飼料高 SFA（100%PO）、MUFA（100%RO）、LA（100%SO）、ALA（100%LO）和 n3 LC-PUFA（100%FO）水平
        3.2 魚體體組成
            3.2.1 飼料 PO 水平
            3.2.2 飼料 RO 水平
            3.2.3 飼料 SO 水平
            3.2.4 飼料 LO 水平
            3.2.5 飼料高 SFA、MUFA、LA、ALA 和 n3 LC-PUFA 水平
        3.3 飼料脂肪表觀消化率（ADC）
        3.4 肝臟和肌肉脂肪酸組成
            3.4.1 飼料 PO 水平
            3.4.2 飼料 RO 水平
            3.4.3 飼料 SO 水平
            3.4.4 飼料 LO 水平
            3.4.5 飼料高 SFA、MUFA、LA、ALA 和 n3 LC-PUFA 水平
    4 討論
        4.1 飼料棕櫚油（PO）替代水平
        4.2 飼料菜籽油（RO）替代水平
        4.3 飼料豆油（SO）替代水平
        4.4 飼料亞麻籽油（LO）替代水平
        4.5 飼料高 SFA、MUFA、LA、ALA 和 n3 LC-PUFA 水平
    附表和圖
第五章 滿足 N3 LC-PUFA 需求下，飼料脂肪酸組成對大菱鲆生長、血漿生化指標(biāo)、脂肪酸組成、脂肪沉積及相關(guān)基因表達(dá)的影響
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 飼料配方和制備
        2.2 實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖和樣品采集
        2.3 化學(xué)分析
            2.3.1 體組成分析
            2.3.2 生化分析
        2.4 RNA 提取和實(shí)時(shí)定量 PCR （qPCR）
        2.5 計(jì)算方法和統(tǒng)計(jì)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 存活、生長和形體指標(biāo)
        3.2 魚體體組成
        3.3 肝臟和肌肉脂肪酸組成
        3.4 血漿生化指標(biāo)
        3.5 肝臟 G6PD 和 ME 酶活力及脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)
    4 討論
    附表和圖
第六章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷
本文作者博士期間的文章



本文編號(hào)：3225478