隨著凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)�；l(fā)展,其病害的威脅也日益增大,對其病害的防控目前主要以預(yù)防為主,防治結(jié)合。因此,在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中及時監(jiān)測蝦體攜帶病原的狀況,并科學(xué)地運用生態(tài)防控技術(shù),這對保障養(yǎng)殖生產(chǎn)效益,促進產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。對此,本研究旨在針對養(yǎng)殖對蝦蝦紅細(xì)胞虹彩病毒（SHIV）、肝腸胞蟲（EHP）、副溶血性弧菌（VPAHPND）、白斑綜合癥病毒（WSSV）以及傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）等主要的五種常見病原,優(yōu)化建立一種可同時檢測多種病原的多重巢氏PCR（Multiplenested PCR,MNPCR）檢測方法,為后續(xù)進一步優(yōu)化和集成養(yǎng)殖對蝦病害生態(tài)防控技術(shù)提供技術(shù)支持。本研究首先采用單種病原的PCR檢測技術(shù)對2017-2018年廣東省茂名市和汕尾市的對蝦養(yǎng)殖主產(chǎn)區(qū)的凡納濱對蝦樣品開展SHIV、EHP和VPAHPND等三種病原的感染情況調(diào)查分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖對蝦中SHIV、EHP和VPAHPND均有檢出,其中SHIV和EHP的陽性率較高,分別為23.81%、23.13%,VPAHPND檢出率相對較低,為3.40%。此... 

【文章來源】：浙江海洋大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 凡納濱對蝦養(yǎng)殖概況
    1.2 當(dāng)前對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的常見病原
        1.2.1 副溶血性弧菌
        1.2.2 肝腸胞蟲
        1.2.3 白斑綜合癥病毒
        1.2.4 傳染性皮下及造血組織壞死病毒
        1.2.5 蝦血細(xì)胞虹彩病毒
        1.2.6 桃拉綜合癥病毒
        1.2.7 對蝦桿狀病毒
    1.3 對蝦病原微生物的檢測技術(shù)
        1.3.1 組織病理學(xué)診斷
        1.3.2 膠體金免疫層析技術(shù)檢測法
        1.3.3 分子生物學(xué)方法
    1.4 本研究的目的及意義
第二章 廣東沿海地區(qū)凡納濱對蝦EHP、VP_(AHPND)和SHIV感染情況調(diào)查與分析
    2.1 實驗材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 樣品采集
    2.2 實驗方法
        2.2.1 DNA提取
        2.2.2 病原檢測
        2.2.3 PCR擴增
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 EHP、VP_(AHPND)和SHIV的PCR檢測結(jié)果
        2.3.2 不同地區(qū)養(yǎng)殖凡納濱對蝦三種病原的感染情況
        2.3.3 不同養(yǎng)殖模式下凡納濱對蝦三種病原的感染情況
        2.3.4 各個養(yǎng)殖要素的病原攜帶情況
        2.3.5 滯長養(yǎng)殖對蝦的病原檢測結(jié)果
    2.4 討論
        2.4.1 兩個養(yǎng)殖區(qū)EHP、VP_(AHPND)和SHIV的分布特征分析
        2.4.2 養(yǎng)殖對蝦出現(xiàn)生長相關(guān)問題的病原因素分析
    2.5 小結(jié)
第三章 五種病原的多重巢式PCR檢測方法的構(gòu)建與優(yōu)化
    3.1 實驗材料
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 樣品采集
    3.2 實驗方法
        3.2.1 五種病原的特異性引物設(shè)計
        3.2.2 陽性質(zhì)粒DNA的制備
        3.2.3 多重巢式PCR反應(yīng)條件優(yōu)化
        3.2.4 多重巢式PCR方法的靈敏度檢測
        3.2.5 以多重巢式PCR方法檢測采集的樣品
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 多重巢式PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化結(jié)果
        3.3.2 多重巢式PCR檢測方法的靈敏度測試
        3.3.3 凡納濱對蝦病原檢測結(jié)果
    3.4 討論
        3.4.1 多重巢式PCR體系優(yōu)化結(jié)果分析
        3.4.2 兩種養(yǎng)殖模式下EHP、WSSV、IHHNV、VP_(AHPND)和SHIV的分布特征分析
        3.4.3 養(yǎng)殖對蝦生長問題與感染EHP的相關(guān)性分析
        3.4.4 汕尾市高位池養(yǎng)殖池中對蝦出現(xiàn)大規(guī)模死亡的原因分析
    3.5 小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 創(chuàng)新點
    4.3 展望
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]蝦肝腸胞蟲實時熒光定量PCR檢測技術(shù)的建立及其與對蝦生長相關(guān)性的研究[D]. 劉珍.上海海洋大學(xué) 2015
[4]養(yǎng)殖對蝦病毒性流行病學(xué)調(diào)查及高通量基因檢測芯片的研究[D]. 張寶存.中國海洋大學(xué) 2011
[5]對蝦傳染性皮下及造血組織壞死病毒（IHHNV）的檢測及其流行情況初步調(diào)查[D]. 楊冰.中國海洋大學(xué) 2005



本文編號：3185860