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雌二醇作用下菲律賓蛤仔性別分化的分子機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-11 05:42
  菲律賓蛤仔(Ruditapes philippinarum)屬軟體動(dòng)物門、雙殼綱、簾形目、簾蛤科、蛤仔屬,在我國(guó)南北沿海均有分布,我國(guó)傳統(tǒng)“四大養(yǎng)殖貝類”之一,其生長(zhǎng)速度快,養(yǎng)殖周期短,適應(yīng)性強(qiáng)(廣溫、廣鹽、廣分布),市場(chǎng)前景廣闊。本研究通過組織切片方法對(duì)雌二醇刺激條件下的空白組、實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行切片顯微觀察并統(tǒng)計(jì)各組的雌雄比,通過熒光定量PCR技術(shù)對(duì)蛤仔不同發(fā)育時(shí)期、短期雌二醇處理下蛤仔及長(zhǎng)期雌二醇刺激條件下的空白組、實(shí)驗(yàn)組中雌雄及雌雄同體蛤仔的Dmrt基因進(jìn)行表達(dá)分析,并通過測(cè)序的方法對(duì)空白組及雌二醇刺激的實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析。研究結(jié)果為菲律賓蛤仔的早期性腺發(fā)育,性別分化及性別調(diào)控機(jī)制提供理論依據(jù)。1、外源性激素作用下蛤仔性別分化情況分析預(yù)實(shí)驗(yàn)中10μg/L的雌二醇組在測(cè)定各組別的雌二醇含量時(shí),該組的雌雄雌二醇含量較空白組有顯著的提高。正式實(shí)驗(yàn)中,將蛤仔分別在室內(nèi)常溫10μg/L的雌二醇海水中和普通對(duì)照海水中養(yǎng)殖,待兩個(gè)月性腺發(fā)育成熟后,進(jìn)行蛤仔性腺組織切片觀察,結(jié)果表明,雌二醇處理的實(shí)驗(yàn)組組雌、雄蛤仔分別為85、61個(gè),雌雄比為1.39:1;空白組中雌、雄蛤仔分別為68、73個(gè),雌雄比... 

【文章來(lái)源】:大連海洋大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】:59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 性類固醇激素在水生動(dòng)物中性別分化的研究進(jìn)展
    1.2 性別相關(guān)基因在水生生物性別分化中的研究進(jìn)展
    1.3 性別相關(guān)轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進(jìn)展
    1.4 Dmrt基因的研究
        1.4.1 Dmrt基因的發(fā)現(xiàn)及其功能
        1.4.2 Dmrt基因的特點(diǎn)
    1.5 本研究的目的和意義
第二章 外源性激素作用下蛤仔性比及體內(nèi)性激素含量變化比較
    2.1 材料和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及實(shí)驗(yàn)藥品器材
    2.2 激素刺激
        2.2.1 組織切片
    2.3 數(shù)據(jù)處理和分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.2 正式實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.5 討論
第三章 雌二醇刺激下的菲律賓蛤仔轉(zhuǎn)錄組分析
    3.1 實(shí)驗(yàn)樣品
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備
        3.2.2 Trizol法提取蛤仔總RNA
        3.2.3 建庫(kù)及測(cè)序方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估和過濾結(jié)果
        3.3.2 轉(zhuǎn)錄本拼接及功能基因注釋結(jié)果
        3.3.3 差異表達(dá)篩選與聚類分析結(jié)果
        3.3.4 差異基因GO注釋結(jié)果分析
        3.3.5 KEGG通路注釋結(jié)果
        3.3.6 轉(zhuǎn)錄組驗(yàn)證
    3.4 討論
第四章 蛤仔Dmrt基因家族特征分析及表達(dá)研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        4.1.2 總RNA的提取與cDNA合成
        4.1.3 基因及對(duì)應(yīng)引物序列
        4.1.4 鑒定Dmrt基因
        4.1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        4.1.6 數(shù)據(jù)分析
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 Dmrt基因家族參數(shù)
        4.2.2 Dmrt基因的表達(dá)
    4.3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號(hào):3180833

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