發(fā)布時間：2021-05-09 16:58

　　池塘養(yǎng)殖三疣梭子蟹（Portunus20trituberculatus）卵巢發(fā)育不良是制約其養(yǎng)殖效益的重要因素之一,其卵巢發(fā)育不良可能與體內(nèi)的生殖內(nèi)分泌調(diào)控有關(guān)。雌二醇（Estradiol,E2）是甲殼動物體內(nèi)最主要的活性雌激素,但有關(guān)于其對甲殼動物卵巢發(fā)育的調(diào)控機制尚不清楚。本研究采用E2和雌激素拮抗劑（Tamoxifen,TAM）活體注射技術(shù),分別研究了不同濃度E2和TAM對不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育及相關(guān)基因表達水平的影響,旨在為進一步研究甲殼動物的雌激素調(diào)控機制提供基礎(chǔ)資料。具體研究結(jié)果如下:1.外源雌激素對不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育和基因表達的影響三疣梭子蟹的卵黃發(fā)生過程分為內(nèi)源性卵黃發(fā)生期和外源性卵黃發(fā)生期兩個階段。本研究采用活體注射和熒光定量PCR（q20RT-PCR）技術(shù),分別研究了外源E2對內(nèi)、外源性卵黃發(fā)生期雌體成活率、血淋巴中雌激素含量、卵巢發(fā)育及相關(guān)基因表達的影響。結(jié)果表明:（1）注射外源E2可顯著提高內(nèi)、外源性卵黃發(fā)生期雌體血淋巴中E2的含量;（2）對處于內(nèi)、外源性卵黃發(fā)生期雌體而言,注射外源E2對其存活率和肝胰腺指數(shù)（HSI）均無顯著影響,但外源... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 甲殼動物卵巢發(fā)育的生殖內(nèi)分泌調(diào)控概況
    1.2 雌激素在甲殼動物卵巢發(fā)育過程中的作用
    1.3 甲殼動物卵巢發(fā)育相關(guān)基因研究進展
    1.4 雌激素的作用機制
    1.5 雌激素對甲殼動物卵巢發(fā)育相關(guān)基因的表達調(diào)控
    1.6 雌激素拮抗劑
    1.7 本研究目的意義和技術(shù)路線
第二章 外源雌激素對不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育和基因表達的影響
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實驗用蟹與養(yǎng)殖條件
        2.2.2 實驗設(shè)計及樣品采集
        2.2.3 雌激素測定
        2.2.4 實時定量PCR(qRT-PCR)
        2.2.5 數(shù)據(jù)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 雌二醇對內(nèi)源性和外源性卵黃發(fā)生期雌體血淋巴中雌激素含量及卵巢發(fā)育的影響
        2.3.2 雌二醇對內(nèi)源性卵黃發(fā)生期雌體卵巢發(fā)育相關(guān)基因表達的影響
        2.3.3 雌二醇對外源性卵黃發(fā)生期雌體卵巢發(fā)育相關(guān)基因表達的影響
    2.4 討論
第三章 雌激素拮抗劑對三疣梭子蟹卵巢發(fā)育及相關(guān)基因表達的影響
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實驗用蟹與養(yǎng)殖條件
        3.2.2 實驗設(shè)計、養(yǎng)殖管理和采樣
        3.2.3 實時熒光定量PCR(qRT-PCR)
        3.2.4 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 不同濃度雌激素拮抗劑對存活率和卵巢發(fā)育的影響
        3.3.2 不同濃度雌激素拮抗劑對卵巢發(fā)育相關(guān)基因表達的影響
    3.4 討論
第四章 附錄三疣梭子蟹雌激素相關(guān)受體基因在蛻皮過程中的表達分析
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實驗用蟹來源與養(yǎng)殖管理
        4.2.2 試驗設(shè)計
        4.2.3 RNA提取和實時熒光定量PCR
        4.2.4 數(shù)據(jù)處理
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 PtERR在蛻皮間期不同組織中的表達情況
        4.3.2 ERR在不同蛻皮階段的表達變化
    4.4 討論
        4.4.1 PtERR-mRNA在不同組織中的特異性表達變化
        4.4.2 PtERR-mRNA在蛻皮過程中的表達變化原因及其可能生理功能
參考文獻
總結(jié)
攻讀碩士期間發(fā)表的相關(guān)論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]三疣梭子蟹雌激素相關(guān)受體基因在蛻皮過程中的表達分析[J]. 陸洋,吳旭干,潘桂平,王偉,候文杰,成永旭.  上海海洋大學(xué)學(xué)報. 2016(03)
[2]水溫和單體筐養(yǎng)對三疣梭子蟹雌體卵巢發(fā)育和常規(guī)生化成分的影響[J]. 潘桂平,候文杰,吳旭干,吳仁福,張年國,龍曉文,周文玉,成永旭.  海洋漁業(yè). 2015(06)
[3]中華絨螯蟹卵巢發(fā)育期間兩種雌激素受體在卵巢和肝胰腺的分布及變化[J]. 柳梅梅,吳旭干,劉智俊,陳浩,成永旭.  水生生物學(xué)報. 2015(04)
[4]甲基法尼酯在甲殼動物中的生理作用及其機制的研究進展[J]. 邱錫爾,朱冬發(fā),湯潔,崔曉雨,周彥琦,柳志業(yè).  生物學(xué)雜志. 2015(01)
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[9]軟體動物維甲酸X受體研究進展[J]. 李維,王淑紅,王藝磊,王國棟,鄒志華.  動物學(xué)雜志. 2013(04)
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博士論文
[1]擬黑多刺蟻蛻皮激素受體（EcR）和超氣門蛋白（USP）的cDNA測序、mRNA表達及其與雌激素相關(guān)受體（ERR）的功能相關(guān)性分析[D]. 劉曉明.陜西師范大學(xué) 2013

碩士論文
[1]凡納濱對蝦性腺抑制激素定位及激素對性腺發(fā)育基因表達的影響[D]. 葉滿.廣東海洋大學(xué) 2014
[2]中華絨螯蟹（Eriocheir20sinensis）大顎器的生理功能及其對卵巢發(fā)育的內(nèi)分泌調(diào)控[D]. 郭敏.上海海洋大學(xué) 2012
[3]高不飽和脂肪酸（HUFA）對三疣梭子蟹卵巢發(fā)育、內(nèi)分泌激素以及組織生化組成的影響[D]. 豐浪.上海海洋大學(xué) 2011



本文編號：3177680