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雌激素和拮抗劑對(duì)三疣梭子蟹卵巢發(fā)育及相關(guān)基因表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-05-09 16:58
  池塘養(yǎng)殖三疣梭子蟹(Portunus20trituberculatus)卵巢發(fā)育不良是制約其養(yǎng)殖效益的重要因素之一,其卵巢發(fā)育不良可能與體內(nèi)的生殖內(nèi)分泌調(diào)控有關(guān)。雌二醇(Estradiol,E2)是甲殼動(dòng)物體內(nèi)最主要的活性雌激素,但有關(guān)于其對(duì)甲殼動(dòng)物卵巢發(fā)育的調(diào)控機(jī)制尚不清楚。本研究采用E2和雌激素拮抗劑(Tamoxifen,TAM)活體注射技術(shù),分別研究了不同濃度E2和TAM對(duì)不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育及相關(guān)基因表達(dá)水平的影響,旨在為進(jìn)一步研究甲殼動(dòng)物的雌激素調(diào)控機(jī)制提供基礎(chǔ)資料。具體研究結(jié)果如下:1.外源雌激素對(duì)不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育和基因表達(dá)的影響三疣梭子蟹的卵黃發(fā)生過(guò)程分為內(nèi)源性卵黃發(fā)生期和外源性卵黃發(fā)生期兩個(gè)階段。本研究采用活體注射和熒光定量PCR(q20RT-PCR)技術(shù),分別研究了外源E2對(duì)內(nèi)、外源性卵黃發(fā)生期雌體成活率、血淋巴中雌激素含量、卵巢發(fā)育及相關(guān)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明:(1)注射外源E2可顯著提高內(nèi)、外源性卵黃發(fā)生期雌體血淋巴中E2的含量;(2)對(duì)處于內(nèi)、外源性卵黃發(fā)生期雌體而言,注射外源E2對(duì)其存活率和肝胰腺指數(shù)(HSI)均無(wú)顯著影響,但外源... 

【文章來(lái)源】:上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 甲殼動(dòng)物卵巢發(fā)育的生殖內(nèi)分泌調(diào)控概況
    1.2 雌激素在甲殼動(dòng)物卵巢發(fā)育過(guò)程中的作用
    1.3 甲殼動(dòng)物卵巢發(fā)育相關(guān)基因研究進(jìn)展
    1.4 雌激素的作用機(jī)制
    1.5 雌激素對(duì)甲殼動(dòng)物卵巢發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)調(diào)控
    1.6 雌激素拮抗劑
    1.7 本研究目的意義和技術(shù)路線
第二章 外源雌激素對(duì)不同卵黃發(fā)生期三疣梭子蟹卵巢發(fā)育和基因表達(dá)的影響
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)用蟹與養(yǎng)殖條件
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及樣品采集
        2.2.3 雌激素測(cè)定
        2.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)
        2.2.5 數(shù)據(jù)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 雌二醇對(duì)內(nèi)源性和外源性卵黃發(fā)生期雌體血淋巴中雌激素含量及卵巢發(fā)育的影響
        2.3.2 雌二醇對(duì)內(nèi)源性卵黃發(fā)生期雌體卵巢發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的影響
        2.3.3 雌二醇對(duì)外源性卵黃發(fā)生期雌體卵巢發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的影響
    2.4 討論
第三章 雌激素拮抗劑對(duì)三疣梭子蟹卵巢發(fā)育及相關(guān)基因表達(dá)的影響
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)用蟹與養(yǎng)殖條件
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、養(yǎng)殖管理和采樣
        3.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
        3.2.4 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 不同濃度雌激素拮抗劑對(duì)存活率和卵巢發(fā)育的影響
        3.3.2 不同濃度雌激素拮抗劑對(duì)卵巢發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的影響
    3.4 討論
第四章 附錄三疣梭子蟹雌激素相關(guān)受體基因在蛻皮過(guò)程中的表達(dá)分析
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)用蟹來(lái)源與養(yǎng)殖管理
        4.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        4.2.3 RNA提取和實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        4.2.4 數(shù)據(jù)處理
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 PtERR在蛻皮間期不同組織中的表達(dá)情況
        4.3.2 ERR在不同蛻皮階段的表達(dá)變化
    4.4 討論
        4.4.1 PtERR-mRNA在不同組織中的特異性表達(dá)變化
        4.4.2 PtERR-mRNA在蛻皮過(guò)程中的表達(dá)變化原因及其可能生理功能
參考文獻(xiàn)
總結(jié)
攻讀碩士期間發(fā)表的相關(guān)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]三疣梭子蟹雌激素相關(guān)受體基因在蛻皮過(guò)程中的表達(dá)分析[J]. 陸洋,吳旭干,潘桂平,王偉,候文杰,成永旭.  上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(03)
[2]水溫和單體筐養(yǎng)對(duì)三疣梭子蟹雌體卵巢發(fā)育和常規(guī)生化成分的影響[J]. 潘桂平,候文杰,吳旭干,吳仁福,張年國(guó),龍曉文,周文玉,成永旭.  海洋漁業(yè). 2015(06)
[3]中華絨螯蟹卵巢發(fā)育期間兩種雌激素受體在卵巢和肝胰腺的分布及變化[J]. 柳梅梅,吳旭干,劉智俊,陳浩,成永旭.  水生生物學(xué)報(bào). 2015(04)
[4]甲基法尼酯在甲殼動(dòng)物中的生理作用及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 邱錫爾,朱冬發(fā),湯潔,崔曉雨,周彥琦,柳志業(yè).  生物學(xué)雜志. 2015(01)
[5]三疣梭子蟹HMGR基因的克隆及其在蛻皮中的表達(dá)分析[J]. 邱錫爾,朱冬發(fā),崔曉雨,湯潔,謝熙.  海洋與湖沼. 2014(06)
[6]三疣梭子蟹(Portunus20trituberculatus)RXR基因克隆及其在蛻皮過(guò)程中的表達(dá)分析[J]. 王偉,吳旭干,樓寶,徐蕾,劉智俊,成永旭.  海洋與湖沼. 2014(05)
[7]雌激素相關(guān)受體α(ERRα)與腫瘤疾病的研究進(jìn)展[J]. 陸蘊(yùn)紅,李群益,施孝金.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(01)
[8]雌激素相關(guān)受體α與雌激素受體α通路相關(guān)性研究[J]. 劉英華,何寧,姜淑卿,張靜姝.  中華腫瘤防治雜志. 2013(17)
[9]軟體動(dòng)物維甲酸X受體研究進(jìn)展[J]. 李維,王淑紅,王藝?yán)?王國(guó)棟,鄒志華.  動(dòng)物學(xué)雜志. 2013(04)
[10]三疣梭子蟹FAMeT基因克隆及其在蛻皮周期中的表達(dá)水平[J]. 謝熙,朱冬發(fā),崔曉雨,湯潔,邱錫爾.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2013(07)

博士論文
[1]擬黑多刺蟻蛻皮激素受體(EcR)和超氣門(mén)蛋白(USP)的cDNA測(cè)序、mRNA表達(dá)及其與雌激素相關(guān)受體(ERR)的功能相關(guān)性分析[D]. 劉曉明.陜西師范大學(xué) 2013

碩士論文
[1]凡納濱對(duì)蝦性腺抑制激素定位及激素對(duì)性腺發(fā)育基因表達(dá)的影響[D]. 葉滿(mǎn).廣東海洋大學(xué) 2014
[2]中華絨螯蟹(Eriocheir20sinensis)大顎器的生理功能及其對(duì)卵巢發(fā)育的內(nèi)分泌調(diào)控[D]. 郭敏.上海海洋大學(xué) 2012
[3]高不飽和脂肪酸(HUFA)對(duì)三疣梭子蟹卵巢發(fā)育、內(nèi)分泌激素以及組織生化組成的影響[D]. 豐浪.上海海洋大學(xué) 2011



本文編號(hào):3177680

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