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硫氧還原蛋白與腫瘤蛋白在WSSV感染中作用及凡納濱對蝦感染W(wǎng)SSV后代謝物的變化

發(fā)布時間:2021-05-09 06:30
  白斑綜合征病毒(WSSV)是一個嚴重影響對蝦養(yǎng)殖業(yè)的病毒,它于1992年首先發(fā)現(xiàn)于東南亞地區(qū),此后相繼在世界范圍內傳播開來。由于其可以侵染的宿主范圍非常廣泛,所以每年都會給對蝦養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。該病毒可以侵入多種宿主,包括多種水產(chǎn)動物,如對蝦、蟹、淡水蝦和小龍蝦、以及水生節(jié)肢動物和浮游動物[5-6]。本實驗擬通過分子生物學以及蛋白質組學的一些方法,來研究硫氧還原蛋白Thiordoxin(TRX)和腫瘤蛋白onoprotein(OP)與WSSV的作用情況,并通過1H20NMR核磁共振光譜分析法分析感染了WSSV的凡納濱對蝦代謝產(chǎn)物的變化情況,以及TRX、Lv20P38、CAT和POD四種基因在凡納濱對蝦感染了WSSV后的變化情況,從而來進一步的探討WSSV的治病機理[1-4]。Part201:硫氧還原蛋白Thiordoxin(TRX),是一個重要的細胞內抗氧化蛋白,它具有一系列生物學功能。有研究表明,TRX的基因表達量在感染W(wǎng)SSV的動物體內呈上升趨勢。然而,TRX在WSSV感染中的作用及對相關信號通路的影響尚不清楚。序列分析表明,TRX可以與WSSV上的結構蛋白WSSV030(... 

【文章來源】:大連海洋大學遼寧省

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1. 引言
    1.1. 白斑綜合征(WSSV)簡介
    1.2. 硫氧還原蛋白Thiordoxin(TRX)簡介與研究現(xiàn)狀
    1.3. 腫瘤蛋白oncoprotein(OP)簡介與研究現(xiàn)狀
    1.4. RNA干擾技術的簡介與研究現(xiàn)狀
    1.5. NMR核磁共振光譜分析法簡介與研究現(xiàn)狀
2. 硫氧還原蛋白Thioredoxin (TRX)與WSSV的相互作用
    2.1. TRX蛋白的原核表達
        2.1.1. 實驗材料
        2.1.2. 實驗方法
        2.1.3. 實驗結果
    2.2. TRX與WSSV結構蛋白VP362 與TK的相互作用
        2.2.1. 實驗材料
        2.2.2. 實驗方法
        2.2.3. 實驗結果
    2.3. TRX對相關基因表達及WSSV感染的影響
        2.3.1. 實驗方法
        2.3.2. 實驗結果
    2.4. 討論
3. 凡納濱對蝦腫瘤蛋白oncoprotein(OP)與WSSV的相互作用
    3.1. OP蛋白的原核表達
        3.1.1. 實驗材料
        3.1.2. 實驗方法
        3.1.3. 實驗結果
    3.2. OP與WSSV及VP28N、VP28C的相互作用
        3.2.1. 實驗材料
        3.2.2. 實驗方法
        3.2.3. 實驗結果
    3.3. OP在對蝦體內的分布及中和試驗
        3.3.1. 實驗方法
        3.3.2. 實驗結果
    3.4. 討論
4. ~1H核磁共振(NMR)光譜分析法分析感染W(wǎng)SSV的凡納濱對蝦的代謝情況的研究
    4.1. 實驗材料
        4.1.1. 實驗試劑
        4.1.2. 實驗用蝦
        4.1.3. 實驗儀器
    4.2. 實驗方法
        4.2.1. WSSV的制備
        4.2.2. WSSV感染凡納濱對蝦
        4.2.3. ~1H核磁共振(NMR)光譜分析法分析感染W(wǎng)SSV的凡納濱對蝦的肝胰腺組織
    4.3. 實驗結果
        4.3.1. RT-PCR檢測感染W(wǎng)SSV的凡納濱對蝦病毒增殖的結果
        4.3.2. ~1H核磁共振(NMR)光譜分析法分析感染W(wǎng)SSV的凡納濱對蝦的肝胰腺組織的結果
        4.3.3. 多元分析
    4.4. 討論
5. WSSV感染對TRx、LvP38、CAT、POD四種基因轉錄表達的影響
    5.1. 實驗材料
        5.1.1. 實驗試劑
        5.1.2. 實驗用蝦
        5.1.3. 實驗儀器
    5.2. 實驗方法
    5.3. 實驗結果
        5.3.1. TRx、LvP38、CAT和POD四種基因在類淋巴組織中的表達情況
        5.3.2. TRx、LvP38、CAT和POD四種基因在鰓組織中的表達情況
    5.4. 討論
6. 小結
參考文獻
研究生期間發(fā)表的論文
致謝
附錄


【參考文獻】:
期刊論文
[1]感染白斑綜合征病毒的斑節(jié)對蝦免疫酶變化特征[J]. 王專偉,黃建華,楊其彬,周發(fā)林,朱彩艷,楊麗詩,江世貴.  湖北農(nóng)業(yè)科學. 2011(09)
[2]Proteomic20Analyses20of20the20Shrimp20White20Spot20Syndrome20Virus[J]. Yan-wei TAN and Zheng-li SHI (State key Laboratory of Virology, Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences (CAS), Wuhan 430071, China).  Virologica Sinica. 2008(03)
[3]抗白斑綜合征病毒(WSSV)感染途徑研究進展[J]. 羅展,黃倢,周麗.  海洋水產(chǎn)研究. 2007(05)
[4]氨氮促使攜帶白斑綜合癥病毒凡納濱對蝦發(fā)病及其血細胞、酚氧化酶和過氧化氫酶變化[J]. 邱德全,楊士平,邱明生.  漁業(yè)現(xiàn)代化. 2007(01)
[5]人工選育中國對蝦兩個群體WSSV感染相關免疫與生化因子的變化[J]. 劉慶慧,黃倢,楊冰,劉莉.  海洋水產(chǎn)研究. 2005(06)
[6]感染白斑綜合癥病毒(WSSV)對蝦相關免疫因子的研究[J]. 雷質文,黃倢,楊冰,俞開康.  中國水產(chǎn)科學. 2001(04)
[7]斑節(jié)對蝦白斑綜合癥桿狀病毒(WSBV)的形態(tài)和感染的組織病理研究[J]. 周化民.  徐州師范大學學報(自然科學版). 1999(04)



本文編號:3176808

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