MC4R屬于G蛋白耦聯(lián)受體超家族（GPCRs）成員之一,大量存在于動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的各個區(qū)域中,包括大腦皮質(zhì)、丘腦、下丘腦、腦干和脊索。有研究表明,MC4R參與調(diào)節(jié)哺乳動物的生殖功能;在魚類中,MC4R主要在腦、垂體和性腺中表達,且mc4r基因拷貝顯性負突變可導致較大規(guī)格的雄性劍尾魚推遲性成熟,暗示MC4R可能同樣參與了魚類的生殖調(diào)控,因此,開展魚類MC4R的生殖內(nèi)分泌功能研究,對于深入了解魚類生殖調(diào)控機理具有重要意義。本文以金錢魚為研究對象,利用同源克隆法,獲得金錢魚mc4r（Scatophagus argus mc4r,SAmc4r）的編碼區(qū)序列,通過半定量PCR（RT-PCR）檢測mc4r的組織分布;利用放射免疫分析法測定MC4R與其廣譜性激動劑（NDP-MSH和a-MSH）及特異性激動劑（THIQ）的結(jié)合率以及cAMP的生成能力;實時熒光定量PCR（Real-time PCR）方法檢測了廣譜性激動劑NDP-MSH、廣譜性拮抗劑SHU9119、特異性激動劑THIQ和特異性拮抗劑Ipsen5i對金錢魚mc4r及生殖相關(guān)基因的表達影響。主要結(jié)果如下:1.金錢魚mc4r基因的克隆及組織... 

【文章來源】：廣東海洋大學廣東省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 黑素皮質(zhì)素受體系統(tǒng)
    1.2 MC4R的結(jié)構(gòu)和功能研究
        1.2.1 MC4R的結(jié)構(gòu)特點及生理分布
        1.2.2 MC4R的信號通路及生理功能的研究
    1.3 MC4R在魚類生殖調(diào)控中的研究進展
    1.4 本研究的目的與意義
2 金錢魚mc4r c DNA克隆及組織分布
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 金錢魚腦、垂體與卵巢總RNA的提取
        2.2.2 SAmc4r中間、3’端與 5’片段的克隆
        2.2.3 SAmc4r全長克隆
        2.2.4 SAmc4r基因的序列分析
        2.2.5 SAmc4r RT-PCR結(jié)果
    2.3 討論
3 SAMC4R的高敏感性配體篩選
    3.1 材料與方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 SAmc4r真核表達載體的構(gòu)建
        3.2.2 SAMC4R配體的結(jié)合特性
        3.2.3 SAMC4R的信號傳導特性
    3.3 討論
4 MC4R激動劑對金錢魚mc4r及生殖相關(guān)基因表達的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 MC4R激動劑對金錢魚生殖相關(guān)基因的離體調(diào)控
        4.2.2 MC4R特異性激動劑對金錢魚生殖相關(guān)基因的在體調(diào)控
    4.3 討論
5 MC4R拮抗劑對金錢魚mc4r及生殖相關(guān)基因表達的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 MC4R拮抗劑對金錢魚生殖相關(guān)基因的離體調(diào)控
        5.2.2 MC4R特異性拮抗劑對金錢魚生殖相關(guān)基因的在體調(diào)控
    5.3 討論
6 結(jié)論
參考文獻
致謝
作者簡介
導師簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]金錢魚性腺發(fā)育及其組織結(jié)構(gòu)觀察[J]. 崔丹,劉志偉,劉南希,張瑩瑩,張俊彬.  水產(chǎn)學報. 2013(05)
[2]金錢魚繁殖生物學及誘導產(chǎn)卵試驗[J]. 蔡澤平,王毅,胡家瑋,張俊彬,林岳光.  熱帶海洋學報. 2010(05)
[3]黑皮質(zhì)素受體-4調(diào)節(jié)通路的研究進展[J]. 聶茹,巴彩鳳.  中國實驗動物學報. 2008(04)
[4]金錢魚生物學研究及回顧[J]. 蘭國寶,閻冰,廖思明,羅硯,謝若癡.  水產(chǎn)科學. 2005(07)
[5]G蛋白及其研究進展[J]. 周元國,王正國.  生理科學進展. 1996(03)

碩士論文
[1]雞黑素皮質(zhì)素受體4基因的分子克隆及其突變體的藥理學特性初步研究[D]. 姜曉芳.揚州大學 2013



本文編號：3170555