克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）,隸屬于節(jié)肢動物門（Arthropoda）、甲殼綱（Crustacea）、十足目（Decapoda）、原螯蝦屬（Procambarus）,是我國重要的淡水經(jīng)濟蝦類,亦被作為甲殼動物研究領域的模式生物。近年來,因其肉味鮮美廣受國內(nèi)外人們的歡迎,克氏原螯蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量隨之也逐年攀升。然而,隨著人工養(yǎng)殖面積持續(xù)擴大,白斑綜合征病毒（White spot syndrome virus,WSSV）等病原菌給克氏原螯蝦養(yǎng)殖業(yè)帶來了重大經(jīng)濟損失。因此,對克氏原螯蝦抗病毒機制及抗病克氏原螯蝦品系培育的研究十分有必要。本研究在前期對克氏原螯蝦轉錄組分析的基礎之上,聚焦于可能在克氏原螯蝦抗WSSV過程中發(fā)揮了重要功能的2個基因:碳水化合物磺基轉移酶11（Carbohydrate sulfotransferase11,Chst11）和酚氧化酶原（prophenoloxidase,proPO）,對proPO和Chst11基因在抗WSSV過程中的作用進行了研究,并在proPO基因上成功篩選到克氏原螯蝦抗WSSV相關的SNP位點,研究結果可為甲殼動物抗病毒機制提供理... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
第一章 文獻綜述
    1.1 研究問題的由來
    1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀分析
        1.2.1 白斑綜合癥病毒
        1.2.2 proPO和 Chst基因相關研究進展
        1.2.3 單核苷酸多態(tài)性（SNP）
    1.3 研究目的及意義
第二章 克氏原螯蝦Chst11 基因c DNA克隆及表達分析
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 主要試劑及儀器設備
        2.3 總RNA的提取
        2.4 反轉錄
        2.5 Chst11基因序列的克隆
        2.6 Chst11序列分析
        2.7 Chst11在克氏原螯蝦各組織中的表達分析
        2.8 Chst11 在病毒、細菌及CpG免疫增強劑刺激下的表達分析
    3 結果與分析
        3.1 Chst11基因的克隆及生物信息分析
        3.2 Chst11在克氏原螯蝦不同組織中的表達分析
        3.3 克氏原螯蝦Chst11 基因在病毒、細菌及CpG免疫增強劑刺激下的表達分析
    4 討論
第三章 克氏原螯蝦Chst11 在抗WSSV過程中的作用研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 主要試劑及儀器設備
        2.3 克氏原螯蝦Chst11基因原核表達
        2.4 Chst11重組蛋白對克氏原螯蝦免疫相關基因的作用
        2.5 Chst11 重組蛋白對WSSV復制的影響
    3 結果與分析
        3.1 Chst11蛋白的表達與純化
        3.2 Chst11對WSSV復制的影響
        3.3 Chst11對克氏原螯蝦免疫相關基因的影響
        3.4 Chst11 蛋白對WSSV感染克氏原螯蝦死亡率的影響
    4 討論
第四章 proPO重組蛋白在克氏原螯蝦抗WSSV過程中的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 主要試劑及儀器設備
        2.3 引物設計
        2.4 克氏原螯蝦在WSSV感染下proPO的表達水平
        2.5 克氏原螯蝦proPO的原核表達
        2.6 proPO重組蛋白對克氏原螯蝦免疫相關基因的影響
        2.7 proPO重組蛋白對克氏原螯蝦體內(nèi)WSSV復制的影響
        2.8 proPO重組蛋白對WSSV感染的克氏原螯蝦死亡率的影響
    3 結果與分析
        3.1 proPO在 WSSV刺激下的表達模式
        3.2 proPO重組蛋白的表達與純化
        3.3 proPO重組蛋白對WSSV復制的影響
        3.4 proPO重組蛋白對克氏原螯蝦免疫相關基因的影響
        3.5 proPO重組蛋白對WSSV感染克氏原螯蝦死亡率的影響
    4 討論
第五章 proPO抗 WSSV相關SNP分子標記開發(fā)與鑒定
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實驗動物
        2.2 主要試劑及儀器設備
        2.3 引物設計
        2.4 proPO基因內(nèi)含子擴增及序列分析
        2.5 proPO基因抗WSSV SNP分子標記的開發(fā)和鑒定
    3 結果與分析
        3.1 proPO內(nèi)含子擴增及序列分析
        3.2 proPO抗 WSSV SNP開發(fā)和鑒定
    4 討論
參考文獻
攻讀碩士期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3154698