發(fā)布時(shí)間：2021-04-09 16:37

　　生長激素和催乳素來源于同一個(gè)祖基因,是魚類調(diào)控生長內(nèi)分泌的重要因子。本文克隆得到卵形鯧鯵生長激素以及催乳素的ORFcDNA序列,構(gòu)建生長激素以及催乳素原核表達(dá)載體。1.從卵形鯧鯵轉(zhuǎn)錄組中得到887bp的生長激素cDNA全長序列。利用RT-P CR方法從卵形鯧鯵下丘腦中克隆獲得生長激素ORF cDNA序列,該ORF是由17個(gè)信號(hào)肽和162個(gè)成熟肽組成。卵形鯧鯵生長激素ORF的氨基酸相對(duì)分子量為22695.03,理論P(yáng)I為6.73,為偏酸性氨基酸,其疏水性氨基酸有71個(gè)。氨基酸序列比對(duì)分析結(jié)果表明:卵形鯧鯵與魚類的氨基酸同源性都在50%以上,其中與鯵科的黃尾鰤氨基酸同源性89.6%為最高。卵形鯧鯵生長激素的ORF氨基酸序列含有兩個(gè)生長激素家族的標(biāo)簽序列,分別為CnSdyliSPidkheTqrssvlkLlsiscq LveSW和CFKkDMhKVEtYltVakC。卵形鯧鯵生長激素蛋白具有親水性,其三級(jí)結(jié)構(gòu)有4個(gè)α-螺旋柱,這與其他魚類繩子生長激素蛋白結(jié)構(gòu)相似。2.利用卵形鯧鯵轉(zhuǎn)錄組獲得催乳素1586bp cDNA全長序列,通過RT-PCR方法從該魚腦垂體中克隆得到催乳素的ORF cDN... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＰＲＬ信號(hào)作用路徑（引自Ｗａｎｇ?Ｙｅｔ?ａ丨．，２０１２）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｒｏｌｅ?ｏｆ?ＰＲＬ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ?（ｆｒｏｍ?Ｗａｎｇ?Ｙ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１２）??

魚．ｉＴｈｕｎｎｕｓ?ｔｈｙｎｎｕｓ）?（Ｌａｗ，?１９９６）、虹縛／７７＿ｙＡ７＿ｗ）?（Ａｇｅｌｌｏｎ，??１９８８）以及大西洋鮭（５ｂ／ｍｏ?ｒａ／ａ／Ｏ?（Ｇｒｏｓｓ，?１９９９）等魚類的生長激素，發(fā)現(xiàn)??魚類的生長激素基因有兩種形式（圖１－２）?（ＫａｗａｕｃｈｉＨ，?１９８６）。其最為代表??的是鮭鱒魚類和鯉科魚類（ＬＢ，１９８６）。鮭鱒魚類的生長激素基因有６個(gè)外顯??子和５個(gè)內(nèi)含子比哺乳動(dòng)物各多了一個(gè)外顯子和內(nèi)含子，其整個(gè)基因組長度約為??哺乳類的兩倍（Ｊｏｈａｎｓｅｎ，?１９８９）；而鯉科魚類的ＧＨ基因與哺乳類的基因組結(jié)??構(gòu)相似，有５個(gè)外顯子，５個(gè)內(nèi)含子（Ｚｈｕ，?１９９２）。??Ｉ?－ｉＭ．?＿＿—?２＊．＊．．?ｔ??－牛－＂包?’ｎ?ｍｕ?二上＿＿ｉ＊？．—二１．．．．．?ｍｉｍｍ?．??＾?．?ｉｈ＾ｈｈ?？?ｍｓｍ?Ｈ?－－－－—???？ｊ?ｎ?１???■．一．?＇?￣??ｍｓｔＫｍ?－＊ｓ＇ｆ?＾－１１１１，，似?ｍｓｍｍｓｍｍ?＾＊５?一??大西洋鞋魚ｎ■崎ｉｒ＿以ｍ——』?ｍ＾ｒ＾－—．一??４ｌｉ?＿＿???—?，?ｒ歧．．．－．ｖ??羅非魚?—??細(xì)??圖１－２不同脊椎動(dòng)物生長激素基因結(jié)構(gòu)（引自郝羽，２０１１）??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｇｅｎｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ?ＧＨ?（ｆｒｏｍ?ＨａｏＹｕ

麻哈魚（０／７ＣＯ／卻ＧＨ的分子量為２２ｋＤａ；羅非魚ＧＨ的分子量為??２２．２ｋＤａ等（徐斌，１９９７）。魚類生長激素化學(xué)結(jié)構(gòu)是由多個(gè)半觥氨酸構(gòu)成二硫??鍵所組成的，其中包含大環(huán)和小環(huán)各一個(gè)。魚類生長激素空間結(jié)構(gòu)（圖１－３）特??征：（］）ａ－螺旋折疊成４個(gè)反向平行螺旋柱；（２）其蛋白的螺旋Ｄ區(qū)相對(duì)于其??他位置，其氨基酸的保守性更強(qiáng)；（３）疏水氨基酸作為受體結(jié)合位點(diǎn)位于ＧＨ??蛋白質(zhì)內(nèi)部，對(duì)維持蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)中起到關(guān)鍵作用（Ｄｅｖｌｉｎ，１９９３）。??Ｃｉｌ?］?？?２??Ｃ?Ｉ?廣?Ｊ?ｌ?／??１＞Ｉ?Ｖ￣￣??ｔ?ｊ．??圖１－３生長激素空間結(jié)構(gòu)（引自陳蓓，２００４）??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｓｐａｔｉａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＧＨ?（ｆｒｏｍ?Ｃｈｅｎ?Ｂｃｉ，?２００４）??１．２．２魚類生長激素的合成、分泌以及釋放??Ｙａｍａｄａ等（１９９３）在－些魚類的腺垂體中找到Ｐｉｔ－１，并在ＧＨ的啟動(dòng)子區(qū)??域找到能與Ｐｉｔ－１高效的結(jié)合位點(diǎn)；而且在另外一些魚類的啟動(dòng)子區(qū)域中也發(fā)現(xiàn)??ｃＡＭＰ有生物功能作用（Ｗｏｎｇ，?１９９６；?Ｂｅｒｎａｒｄｉｎｉ，?１９９９）。因而一些學(xué)者認(rèn)為??Ｐｉｔ－１和ｃＡＭＰ能夠控制兔類生長激素的合成。??魚類生長激素分泌是由下丘腦的生長釋放激素（ＧＨＲＨ）和生長激素釋放抑??制激素（ＳＩＲＨ）共同調(diào)控的，ＧＨＲＨ負(fù)責(zé)正調(diào)控而ＳＩＲＨ負(fù)責(zé)負(fù)調(diào)控。從１９７０??年以來

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]卵形鯧鲹肉堿棕櫚�；D(zhuǎn)移酶Ⅰ全長cDNA序列的克隆及生物信息學(xué)分析[J]. 方玲玲,王忠良,陳剛,湯保貴,張健東,黃建盛,周暉.  廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(03)
[2]美人魚發(fā)光桿菌殺魚亞種感染卵形鯧鲹的病理學(xué)觀察[J]. 蘇友祿,馮娟,郭志勛,徐力文,王江勇.  海洋科學(xué). 2012(02)
[3]卵形鯧鲹胚后發(fā)育階段鰓的分化和發(fā)育[J]. 區(qū)又君,何永亮,李加兒.  中國水產(chǎn)科學(xué). 2012(01)
[4]卵形鯧鲹消化系統(tǒng)的胚后發(fā)育[J]. 區(qū)又君,何永亮,李加兒.  臺(tái)灣海峽. 2011(04)
[5]卵形鯧鲹幼魚的賴氨酸需求量[J]. 杜強(qiáng),林黑著,牛津,丁賢,黃忠,陳旭,陳義方.  動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2011(10)
[6]卵形鯧鲹消化酶活性的研究Ⅳ 養(yǎng)殖水溫和酶反應(yīng)溫度對(duì)幼魚酶活性的影響[J]. 區(qū)又君,羅奇,李加兒,蔡文超.  海洋漁業(yè). 2011(01)
[7]卵形鯧鲹幼魚蛋白質(zhì)需要量的研究[J]. 劉興旺,許丹,張海濤,梁海鷗.  南方水產(chǎn)科學(xué). 2011(01)
[8]卵形鯧鲹消化酶活性的研究Ⅰ.成魚和幼魚消化酶活性在不同消化器官中的分布及其比較[J]. 區(qū)又君,羅奇,李加兒,范春燕.  南方水產(chǎn)科學(xué). 2011(01)
[9]卵形鯧鲹消化酶活性的研究ⅢpH對(duì)幼魚和成魚消化酶活性的影響[J]. 區(qū)又君,羅奇,李加兒.  海洋漁業(yè). 2010(04)
[10]卵形鯧鲹線粒體16S rRNA基因全長序列的克隆與分析[J]. 彭金霞,彭敏,陳秀荔,蔣偉明,楊春玲,李詠梅.  水生態(tài)學(xué)雜志. 2010(04)



本文編號(hào)：3127957