甘露糖受體（mannose receptor,MR）是一種模式識別受體（pattern-recognition receptors,PRRs）,在病原微生物引起的機體免疫應答中至關重要。關于哺乳動物和鳥類的甘露糖受體研究很多,但是魚類甘露糖受體的研究甚少。本論文分離并鑒定了溫和氣單胞菌是斑馬魚的致病菌,在此基礎上,研究了斑馬魚甘露糖受體和溫和氣單胞菌感染的關系,主要結果如下:1.克隆得到了斑馬魚的甘露糖受體基因全長,命名為zfMR,基因的cDNA全長為6248 bp,其中5’UTR為119 bp,3’UTR為1842 bp,ORF為4287 bp,編碼1428 aa。預測的氨基酸序列表明,zfMR包含一個富含半胱氨酸區(qū)域,一個Ⅱ型纖連蛋白區(qū)域,八個串聯的C型凝集素樣區(qū)域,一個跨膜結構域和一個胞質尾區(qū)。構建的進化樹表明,斑馬魚zfMR與草魚和團頭魴的MR聚為一支組成硬骨魚類分支。2.甘露糖受體的mRNA在健康斑馬魚的肝臟、脾臟、腎臟、腸道、鰓、腦、心臟、肌肉和皮膚中均有表達,并且在腎臟中的的表達水平最高。3.溫和氣單胞菌感染斑馬魚后,用qRT-PCR方法檢測到其免疫相關組織（肝臟、脾臟、... 

【文章來源】：華中農業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表（Abbreviation）
1 前言
    1.1 課題的由來與意義
    1.2 國內外甘露糖受體的研究概況
        1.2.1 甘露糖受體的結構
        1.2.2 甘露糖受體的功能
        1.2.4 甘露糖受體與疾病的關系
        1.2.5 調控甘露糖受體表達的因素
        1.2.6 本研究的目的和意義
2 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 病原
    2.2 主要儀器及廠家
    2.3 主要試劑
    2.4 主要溶液配制
        2.4.1 常用培養(yǎng)基
        2.4.2 感受態(tài)相關試劑配制
        2.4.3 瓊脂糖電泳相關溶液配制
    2.5 實驗方法
        2.5.1 病原菌的分離與純化
        2.5.2 菌種的保藏
        2.5.3 純化菌株的人工感染實驗
        2.5.4 菌株的鑒定
        2.5.5 總RNA的提取
        2.5.6 cDNA第一鏈的合成
        2.5.7 zfMR基因cDNA片段的克隆
        2.5.8 zfMR基因cDNA 3’末端擴增
        2.5.9 zfMR基因cDNA 5’末端擴增
        2.5.10 生物信息學分析
        2.5.11 zfMR基因表達的定量分析
        2.5.12 Western blotting檢測zf MR蛋白水平的變化
        2.5.13 免疫組化檢測zf MR蛋白水平的變化
3 結果和分析
    3.1 病原菌的分離純化和人工感染結果
    3.2 ZA菌株 16SrDNA的PCR結果
    3.3 ZA菌株的生理生化鑒定結果
    3.4 RNA樣品的制備與鑒定
    3.5 zfMR基因的生物信息學分析
        3.5.1 zfMR基因cDNA全長及序列特征
        3.5.2 zfMR的系統(tǒng)進化樹分析
    3.6 zfMR基因的表達分析
        3.6.1 健康魚不同組織內zfMR基因的表達
        3.6.2 A. sobria刺激后免疫相關組織zfMR、IL-1β 和TNF-α 基因的表達
        3.6.3 Western blot檢測zf MR蛋白水平的變化
        3.6.4 免疫組化法檢測zf MR蛋白水平的變化
4 討論
5 結論
參考文獻
碩士期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]甘露糖受體在肝細胞癌中的表達及意義[J]. 郭林娜,高恒宇,何苗,劉丹.  世界華人消化雜志. 2016(01)
[2]甘露糖受體結構、功能、表達和應用研究的新進展[J]. 劉小玲,曾令兵.  水產學雜志. 2013(01)
[3]中國斑馬魚研究發(fā)展歷程及現狀[J]. 賈順姬,孟安明.  遺傳. 2012(09)
[4]甘露糖受體在宿主免疫應答中的作用[J]. 張典,梅其炳.  細胞與分子免疫學雜志. 2011(02)
[5]魚類髓樣分化因子88（MyD88）的研究進展[J]. 鄭琳琳,張圣強,安利國.  科技信息. 2009(34)
[6]天然免疫識別機制及天然免疫受體的相互調節(jié)[J]. 張彩,田志剛.  生物化學與生物物理進展. 2008(02)
[7]由不同接頭分子介導的Toll樣受體信號通路[J]. 張煒,袁金鐸,安利國.  細胞與分子免疫學雜志. 2006(04)

碩士論文
[1]團頭魴甘露糖受體CTLD4-8結構域抗體制備及功能分析[D]. 趙曉恒.華中農業(yè)大學 2015
[2]草魚甘露糖受體基因的克隆與表達分析[D]. 王莉.華中農業(yè)大學 2014
[3]實驗用斑馬魚常見病菌的分離檢測及其致病性研究[D]. 楊遲.東華大學 2014
[4]團頭魴甘露糖受體基因的克隆與表達研究[D]. 湯孝成.華中農業(yè)大學 2013
[5]甘露糖受體在脂多糖誘導的急性肺損傷中的表達[D]. 林志輝.浙江大學 2009



本文編號：3125414