晶體敵百蟲對(duì)黃鱔肝組織、酶活性及相關(guān)去毒基因表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-04-06 02:00
農(nóng)藥殘留對(duì)魚類的危害,一直是人們比較關(guān)注的話題,而黃鱔作為一種重要的淡水魚類,是否也是受農(nóng)藥迫害的對(duì)象之一呢?本研究運(yùn)用組織學(xué)方法分析了晶體敵百蟲對(duì)黃鱔肝臟組織結(jié)構(gòu)造成的影響,探討了晶體敵百蟲對(duì)黃鱔肝臟各解毒酶活性的影響,并分析了相關(guān)解毒基因的表達(dá)情況。結(jié)果如下:(1)黃鱔暴露在不同濃度晶體敵百蟲12h、24h和36h時(shí),肝臟組織發(fā)生不同程度的病變,隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng),肝臟組織損傷越嚴(yán)重。主要表現(xiàn)由初始的肝細(xì)胞腫脹、部分細(xì)胞核呈溶解狀、胞質(zhì)疏松、細(xì)胞界限模糊,到大部分細(xì)胞核裂解出現(xiàn)大片只剩被染粉紅的胞漿的空泡樣,而未裂解的細(xì)胞核擠壓于胞漿一側(cè);而36h時(shí),大部分細(xì)胞已壞死,形成無結(jié)界的紅染物質(zhì);此外,隨著晶體敵百蟲濃度的增加,出現(xiàn)沉著的黃褐色微細(xì)顆粒越多。(2)本實(shí)驗(yàn)中,SOD、CAT和GSH-PX的活性均是一開始被激活而后被抑制。12h各濃度處理組的SOD、CAT和GSH-PX活性均增強(qiáng),這可能是機(jī)體受到晶體敵百蟲脅迫產(chǎn)生了大量活性氧,而為了清除多余的活性氧SOD、CAT和GSH-PX被激活;24h時(shí),1mg/L和5mg/L處理組各保護(hù)酶活性仍呈上升趨勢(shì),而10mg/L處理組的CAT...
【文章來源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁(yè)數(shù)】:41 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 敵百蟲毒理學(xué)的研究進(jìn)展
2 魚類肝功能及病理研究
2.1 肝臟的功能
2.2 肝臟的病理研究方法
2.3 肝臟病變的原因
3 魚類肝臟保護(hù)酶的研究
3.1 超氧化物歧化酶
3.2 過氧化氫酶
3.3 谷胱甘肽過氧化物酶
4 魚類肝臟去毒相關(guān)基因的研究
4.1 細(xì)胞色素 P450(CYP)
4.2 谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)
5 本研究目的與意義
第二章 黃鱔肝臟病理變化的組織學(xué)觀察
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)用魚
1.2 試劑及儀器
1.2.1 主要試劑
1.2.2 主要儀器
1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
2 結(jié)果與分析
2.1 黃鱔暴露在晶體敵百蟲中 12h 后肝臟組織的變化
2.2 黃鱔暴露在晶體敵百蟲中 24h 后肝臟組織的變化
2.3 黃鱔暴露在晶體敵百蟲中 36h 后肝臟組織的變化
3 討論
第三章 敵百蟲對(duì)黃鱔 SOD、CAT 和 GSH-PX 活性的影響
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
1.2 試劑及儀器
1.2.1 主要試劑
1.2.2 主要儀器
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.4 樣品處理與取樣
1.5 蛋白質(zhì)含量測(cè)定
1.6 測(cè)定方法
1.7 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 在不同濃度晶體敵百蟲中暴露不同時(shí)間對(duì)黃鱔肝臟 SOD 活性的影響
2.2 在不同濃度晶體敵百蟲中暴露不同時(shí)間對(duì)黃鱔肝臟 CAT 活性的影響
2.3 在不同濃度晶體敵百蟲中暴露不同時(shí)間對(duì)黃鱔肝臟 GSH-PX 活性的影響
3 討論
3.1 晶體敵百蟲對(duì)肝臟 SOD 活性影響分析
3.2 晶體敵百蟲對(duì)肝臟 CAT 活性影響分析
3.3 晶體敵百蟲對(duì)肝臟 GSH-PX 活性影響分析
第四章 黃鱔染毒過程中 Cyp1A、GST 和 GPX 基因表達(dá)的研究
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)用魚
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
1.4 取樣方法
1.5 總 RNA 的提取
1.6 RNA 質(zhì)量檢測(cè)
1.7 總 RNA 反轉(zhuǎn)錄
1.8 引物設(shè)計(jì)
1.9 Cyp1A、GST 和 GPX 基因的擴(kuò)增
1.9.1 PCR 反應(yīng)體系
1.9.2 PCR 擴(kuò)增條件
1.10 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 暴露在不同濃度晶體敵百蟲不同時(shí)間黃鱔的 Cyp1A 基因表達(dá)情況
2.2 暴露在不同濃度晶體敵百蟲不同時(shí)間黃鱔的 GST 基因表達(dá)情況
2.3 暴露在不同濃度晶體敵百蟲不同時(shí)間黃鱔的 GPX 基因表達(dá)情況
3 討論
第五章 結(jié)論與展望
1 主要結(jié)論
2 研究展望
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):3120534
【文章來源】:江西農(nóng)業(yè)大學(xué)江西省
【文章頁(yè)數(shù)】:41 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 敵百蟲毒理學(xué)的研究進(jìn)展
2 魚類肝功能及病理研究
2.1 肝臟的功能
2.2 肝臟的病理研究方法
2.3 肝臟病變的原因
3 魚類肝臟保護(hù)酶的研究
3.1 超氧化物歧化酶
3.2 過氧化氫酶
3.3 谷胱甘肽過氧化物酶
4 魚類肝臟去毒相關(guān)基因的研究
4.1 細(xì)胞色素 P450(CYP)
4.2 谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)
5 本研究目的與意義
第二章 黃鱔肝臟病理變化的組織學(xué)觀察
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)用魚
1.2 試劑及儀器
1.2.1 主要試劑
1.2.2 主要儀器
1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
2 結(jié)果與分析
2.1 黃鱔暴露在晶體敵百蟲中 12h 后肝臟組織的變化
2.2 黃鱔暴露在晶體敵百蟲中 24h 后肝臟組織的變化
2.3 黃鱔暴露在晶體敵百蟲中 36h 后肝臟組織的變化
3 討論
第三章 敵百蟲對(duì)黃鱔 SOD、CAT 和 GSH-PX 活性的影響
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
1.2 試劑及儀器
1.2.1 主要試劑
1.2.2 主要儀器
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.4 樣品處理與取樣
1.5 蛋白質(zhì)含量測(cè)定
1.6 測(cè)定方法
1.7 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 在不同濃度晶體敵百蟲中暴露不同時(shí)間對(duì)黃鱔肝臟 SOD 活性的影響
2.2 在不同濃度晶體敵百蟲中暴露不同時(shí)間對(duì)黃鱔肝臟 CAT 活性的影響
2.3 在不同濃度晶體敵百蟲中暴露不同時(shí)間對(duì)黃鱔肝臟 GSH-PX 活性的影響
3 討論
3.1 晶體敵百蟲對(duì)肝臟 SOD 活性影響分析
3.2 晶體敵百蟲對(duì)肝臟 CAT 活性影響分析
3.3 晶體敵百蟲對(duì)肝臟 GSH-PX 活性影響分析
第四章 黃鱔染毒過程中 Cyp1A、GST 和 GPX 基因表達(dá)的研究
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)用魚
1.2 主要試劑
1.3 主要儀器
1.4 取樣方法
1.5 總 RNA 的提取
1.6 RNA 質(zhì)量檢測(cè)
1.7 總 RNA 反轉(zhuǎn)錄
1.8 引物設(shè)計(jì)
1.9 Cyp1A、GST 和 GPX 基因的擴(kuò)增
1.9.1 PCR 反應(yīng)體系
1.9.2 PCR 擴(kuò)增條件
1.10 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
2.1 暴露在不同濃度晶體敵百蟲不同時(shí)間黃鱔的 Cyp1A 基因表達(dá)情況
2.2 暴露在不同濃度晶體敵百蟲不同時(shí)間黃鱔的 GST 基因表達(dá)情況
2.3 暴露在不同濃度晶體敵百蟲不同時(shí)間黃鱔的 GPX 基因表達(dá)情況
3 討論
第五章 結(jié)論與展望
1 主要結(jié)論
2 研究展望
參考文獻(xiàn)
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本文編號(hào):3120534
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