美人魚發(fā)光桿菌（Photobacterium damselae）是造成多種水產(chǎn)動物發(fā)病的主要病原菌,現(xiàn)已被公認為是水產(chǎn)養(yǎng)殖中的一種新病原。本課題組前期從病死大菱鲆（Turbot）分離到1株美人魚發(fā)光桿菌,對該菌和胞外產(chǎn)物（Extracellular products,ECP）進行主要生物學(xué)特性及免疫保護評價分析,旨在揭示美人魚發(fā)光桿菌的致病機理及為該病的防控提供參考。從病死大菱鲆心血中分離到1株優(yōu)勢菌株,經(jīng)傳統(tǒng)鑒定方法、生化鑒定和分子生物學(xué)方法確定為美人魚發(fā)光桿菌;該菌對大菱鲆的LD₅₀為6.3×10⁵cfu/mL,對卡那霉素和氟苯尼考等敏感。采用飽和硫酸銨超濾濃縮法制備美人魚發(fā)光桿菌的ECP,瓊脂平板擴散法對ECP的酶活性進行研究,同時檢測其溶血譜及研究環(huán)境理化因子對胞外酶活性的影響,應(yīng)用SDS-PAGE電泳初步分析蛋白成分,運用LC-MS/MS鑒定蛋白成分。結(jié)果顯示,美人魚發(fā)光桿菌的ECP有溶血酶、蛋白酶、脂肪酶和卵磷脂酶活性;對兔、綿羊、山羊、大菱鲆紅細胞的溶血效價分別為2³、2⁴、2

【文章來源】：河北科技師范學(xué)院河北省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

菌株分離純化及革蘭染色形態(tài)特征（100×）

- 肌醇- d-半乳糖酸鹽- d-纖維二+ 側(cè)金盞花+ 吲哚- β-葡萄糖醛酸- β-半乳糖苷- α-葡萄糖苷+ 尿素酶+ d-山梨醇- 酚紅- 古老糖- α-半乳糖苷應(yīng). rDNA 基因擴增出的條帶大小在 1000 bp-2

嗜水氣單胞菌等位于不同進化分支，而與美人魚發(fā)光桿菌位于同一個分支（圖2-4），進一步證實了分離菌株 Phdd QHD-1 為美人魚發(fā)光桿菌。表 2-8 參考菌株信息Table 2-8 Reference strain information菌株名稱 菌株編號 登錄號 分離時間創(chuàng)傷弧菌 ATCC27562 NR_113792.1 2011.11嗜水氣單胞菌 ATCC7966 X60404.2 1991.8遲緩愛德華菌 ATCC15947 NR_024770.1 2000.11美人魚發(fā)光桿菌 ATCC33539 NR_119052.1 1993.8美人魚發(fā)光桿菌美人魚亞種 NBRC15633 NR_113783.1 2011.11美人魚發(fā)光桿菌殺魚亞種 K-1 NR_037019.1 1994.3美人魚發(fā)光桿菌殺魚亞種 NCIMB2058 X78105.1 1994.3美人魚發(fā)光桿菌殺魚亞種 PN510 AY147860.1 2002.9霍亂弧菌 ATCC14035 U10955.1 1994.6哈維氏弧菌 ATCC14126 AF426825.1 2001.10鰻弧菌 NCIMB6 NR_042509.1 2006.3副溶血弧菌 ATCC17802 NR_114632.1 2001.6

【參考文獻】：
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本文編號：3117877