河豚魚,學(xué)名河純,泛指的是與我們飲食文化及歷史密切相關(guān)的一類有毒卻又味美的經(jīng)濟(jì)魚類,因其魚肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富,一直廣受國內(nèi)外消費(fèi)者的喜愛。我國自1990年人工養(yǎng)殖成功以來,河豚魚產(chǎn)業(yè)已形成了一定的規(guī)模,行業(yè)的興衰直接關(guān)系著河豚魚產(chǎn)業(yè)從業(yè)人員的利益和我國水產(chǎn)品行業(yè)發(fā)展的穩(wěn)定性。近年來,出口方面我國河豚魚產(chǎn)業(yè)面對的是進(jìn)口國貿(mào)易技術(shù)壁壘的挑戰(zhàn),內(nèi)銷方面又面臨著國內(nèi)市場繁榮發(fā)展的契機(jī),面對此種情況建立起先進(jìn)完善的河豚魚成分檢測方法迫在眉睫。目前,國內(nèi)對河豚魚的檢測主要是通過間接檢測河豚魚毒素來完成的,常用的河豚魚毒素檢測方法存在著不同程度的不足,限制了此類方法的廣泛應(yīng)用及發(fā)展。PCR技術(shù)是通過對物種的特異性基因進(jìn)行標(biāo)記將目標(biāo)生物與其他物種區(qū)分開來,能從分子水平上進(jìn)行物種成分的鑒定,本研究將PCR技術(shù)應(yīng)用到河豚魚成分檢測鑒定的中去,將會對食品中的河豚魚成分的直接檢測開啟一條新的思路。本文收集了9種河豚魚樣品,采用5種常用的DNA提取方法,通過測定DNA濃度與純度、DNA瓊脂糖凝膠電泳等方法,對5種DNA提取方法進(jìn)行比較。選出較優(yōu)的DNA提取方法,在此基礎(chǔ)上對影響DNA提取的3個因素進(jìn)行優(yōu)化最終確... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 河豚魚概述
        1.1 河豚魚的分類及分布范圍
        1.2 河豚魚的營養(yǎng)保健價值
        1.3 我國河豚魚行業(yè)的發(fā)展形勢
        1.4 河豚魚的安全問題
    2 河豚魚成分的檢測方法
        2.1 間接檢測方法
        2.2 直接檢測方法
    3 研究目的及意義
第二章 DNA提取方法的篩選與優(yōu)化
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗材料
        1.2 儀器及試劑
        1.3 DNA試驗方法篩選
        1.4 DNA提取方法的優(yōu)化
        1.5 DNA提取質(zhì)量檢測
    2 結(jié)果與分析
        2.1 DNA試驗方法篩選
        2.2 DNA提取方法的優(yōu)化
    3 討論與小結(jié)
第三章 PCR檢測方法的比較
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗材料及儀器
        1.2 引物特異性實(shí)驗
        1.3 PCR擴(kuò)增實(shí)驗反應(yīng)體系優(yōu)化
        1.4 優(yōu)化后引物特異性效果對比
        1.5 靈敏度測定
        1.6 檢出限測定
    2 結(jié)果與分析
        2.1 普通PCR方法的確立
        2.2 SYBR-PCR方法的確立
    3 討論與小結(jié)
第四章 目的DNA條帶的序列測定與酶切試驗驗證
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗材料
        1.2 儀器與軟件
        1.3 DNA堿基序列測定
        1.4 堿基序列比對
        1.5 酶切位點(diǎn)結(jié)果分析
        1.6 酶切鑒定實(shí)驗
        1.7 酶切在實(shí)際檢驗中應(yīng)用
    2 結(jié)果與分析
        2.1 DNA堿基序列測定結(jié)果
        2.2 堿基序列比對結(jié)果
        2.3 酶切位點(diǎn)分析結(jié)果
        2.4 酶切鑒定結(jié)果
        2.5 酶切在實(shí)際檢驗中應(yīng)用結(jié)果
    3 討論與小結(jié)
第五章 全文總結(jié)與展望
    1 主要研究結(jié)論
        1.1 DNA提取方法的篩選與優(yōu)化
        1.2 普通PCR和SYBR-PCR方法的建立和比較
        1.3 對河豚魚目的DNA條帶的序列測定與酶切試驗驗證
    2 未來展望
參考文獻(xiàn)
附錄1：供試樣品
附錄2：供試樣品的DNA濃度與OD值
附錄3：9種河豚魚目的條帶堿基序列
附錄4：9種河豚魚堿基序列比對
附錄5：酶切位點(diǎn)分析
附錄6：9種河豚魚材料
術(shù)語與略語表
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]SYBR GreenⅠ實(shí)時PCR技術(shù)鑒定鴨源性成分的研究[J]. 楊麗霞,宋濤平,謝曉紅,付冠艷,劉佩,彭新凱.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2013(11)
[2]河豚魚Cyt b基因部分DNA序列分析與應(yīng)用[J]. 陳文炳,林少華,邵碧英,趙晨,江樹勛,閆誠,鄭晶.  食品科學(xué). 2012(20)
[3]染色質(zhì)免疫共沉淀超聲波破碎條件的研究[J]. 張麗麗,徐碧玉,劉菊華,賈彩紅,張建斌,王甲水,金志強(qiáng).  中國農(nóng)學(xué)通報. 2012(30)
[4]中國河豚魚產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及產(chǎn)業(yè)發(fā)展有關(guān)問題初探[J]. 孟雪松.  中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理. 2012(06)
[5]河豚的食用安全性及營養(yǎng)價值研究進(jìn)展[J]. 王麗雅,陶寧萍,龔璽.  上海農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(02)
[6]河豚的養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展及其消費(fèi)市場解禁的必然性[J]. 關(guān)濤,何繼方.  現(xiàn)代商業(yè). 2011(17)
[7]河豚解禁呼聲漸起[J]. 陶相銀.  美食. 2011(03)
[8]PCR方法檢測河豚魚的引物篩選及反應(yīng)體系優(yōu)化[J]. 陳文炳,趙晨,邵碧英,江樹勛,閆誠,李壽崧,林河通.  食品科學(xué). 2010(20)
[9]河豚毒素免疫檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 叢蕾,王錫昌,劉源,盧瑛.  食品科學(xué). 2009(19)
[10]水稻DNA快速提取及RAPD分析體系的優(yōu)化[J]. 韓美麗,陸榮生,霍秀娟,梁志強(qiáng).  江西農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2009(05)



本文編號：3117154