發(fā)布時(shí)間：2021-03-30 20:41

　　氧是需氧生物正常生命活動(dòng)的必要條件,動(dòng)物可通過調(diào)節(jié)自身代謝適應(yīng)短期的低氧或高氧環(huán)境。氧濃度變化會(huì)影響動(dòng)物的生長發(fā)育和繁殖,尤其在心血管方面表現(xiàn)明顯。水中溶解氧容易發(fā)生改變,對(duì)水生動(dòng)物的代謝影響顯著。魚類受高氧或低氧脅迫后會(huì)引發(fā)各種生理應(yīng)答,脅迫消除后機(jī)體會(huì)產(chǎn)生補(bǔ)償現(xiàn)象,但生長發(fā)育仍受影響,嚴(yán)重時(shí)誘發(fā)疾病并影響生存。目前溶氧對(duì)魚類影響的研究集中在成魚的生理響應(yīng),對(duì)于胚胎發(fā)育時(shí)期的影響較少涉及。高氧和低氧條件下對(duì)胚胎生長發(fā)育、心血管發(fā)育情況及調(diào)控機(jī)制尚不清楚。本研究以斑馬魚（Danio rerio）作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?選擇心臟、血管熒光標(biāo)記的兩個(gè)品系斑馬魚為實(shí)驗(yàn)材料,設(shè)定低氧（2.0±0.5mg/L）、常氧（6.0±0.5mg/L）和高氧（15.5±0.5mg/L）三種溶氧條件,用熒光顯微鏡觀測24-72hpf胚胎形態(tài)結(jié)構(gòu),心臟和血管外部形態(tài),心率,胚胎軀干部主要血管背主動(dòng)脈（DA）和后主靜脈（PCV）直徑,背部縱向血管（DLAV）到PCV的距離,相鄰體節(jié)間血管（ISV）距離,脊索旁血管（PAV）的形成情況。結(jié)果顯示,常氧條件下胚胎存活率為74.18±4.23%,高氧下存活率為76±4.09%,... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 低氧對(duì)人和陸生動(dòng)物的影響
    1.2 高氧對(duì)人和陸生動(dòng)物的影響
    1.3 氧對(duì)魚類的影響
        1.3.1 溶解氧的功能
        1.3.2 溶解氧對(duì)魚類心血管機(jī)能的影響
        1.3.3 溶解氧對(duì)魚類其他器官機(jī)能的影響
    1.4 模式生物—斑馬魚
    1.5 斑馬魚心血管發(fā)育
        1.5.1 斑馬魚心臟發(fā)育過程
        1.5.2 斑馬魚血管發(fā)育過程
        1.5.3 斑馬魚心血管發(fā)育研究現(xiàn)狀
第2章 緒論
    2.1 選題背景與意義
    2.2 研究內(nèi)容與技術(shù)路線
        2.2.1 研究內(nèi)容
        2.2.2 技術(shù)路線
第3章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、儀器及試劑
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.2 質(zhì)粒圖譜
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 主要試劑
        3.1.5 主要試劑配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 溶解氧條件的制備
        3.2.2 觀測胚胎外部形態(tài)
        3.2.3 cDNA的合成
        3.2.4 PCR擴(kuò)增目的基因
        3.2.5 目的片段的克隆
        3.2.6 重組質(zhì)粒的提取及純化
        3.2.7 地高辛探針的合成
        3.2.8 整胚原位雜交
        3.2.9 qPCR檢測
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
    4.1 低氧和高氧對(duì)胚胎形態(tài)發(fā)育的影響
        4.1.1 胚胎發(fā)育對(duì)低氧和高氧敏感的時(shí)間窗
        4.1.2 低氧和高氧對(duì)胚胎存活率的影響
        4.1.3 低氧和高氧對(duì)胚胎外部形態(tài)的影響
        4.1.4 低氧和高氧對(duì)胚胎體長的影響
        4.1.5 低氧和高氧對(duì)胚胎卵黃球（YB）及卵黃延伸（YE）的影響
        4.1.6 低氧和高氧對(duì)胚胎眼徑的影響
        4.1.7 低氧和高氧對(duì)胚胎心臟形態(tài)的影響
        4.1.8 低氧和高氧對(duì)胚胎血管形態(tài)的影響
    4.2 低氧和高氧對(duì)胚胎心臟、血管發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的影響
        4.2.1 總RNA的提取
        4.2.2 目的基因的擴(kuò)增
        4.2.3 陽性克隆篩選及鑒定
        4.2.4 DIG標(biāo)記RNA探針的合成
        4.2.5 心臟相關(guān)基因的整胚原位雜交
        4.2.6 血管相關(guān)基因的整胚原位雜交
        4.2.7 qPCR檢測心臟、血管發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)
    4.3 討論
        4.3.1 低氧和高氧對(duì)胚胎形態(tài)發(fā)育的影響
        4.3.2 低氧和高氧對(duì)胚胎心臟發(fā)育的影響
        4.3.3 低氧和高氧對(duì)胚胎血管發(fā)育的影響
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高溶氧量對(duì)西伯利亞鱘抗氧化酶活力及肝臟損傷相關(guān)指標(biāo)的影響[J]. 況新宇,王曉雯,朱華.  水產(chǎn)科技情報(bào). 2016(04)
[2]溫度對(duì)斑馬魚胚胎發(fā)育的影響[J]. 李忻林,董洪坪,王婷,黃四洲,蔡佩玲.  四川動(dòng)物. 2014(06)
[3]溶解氣體過飽和水體對(duì)胭脂魚血?dú)馄胶庥绊懗醪窖芯縖J]. 吳湘香,李云峰,張燕,茹輝軍,沈子偉,倪朝輝.  淡水漁業(yè). 2014(06)
[4]高氧對(duì)小鼠視網(wǎng)膜新生血管模型中根蛋白的影響[J]. 王龍梅,閆琳,楊俠,董曉光,徐海峰.  眼科新進(jìn)展. 2014(03)
[5]鯉魚胚胎發(fā)育與溫度和溶氧的關(guān)系[J]. 陳媛媛,邢娟娟,呂彬彬.  陜西水利. 2012(01)
[6]低氧和高氧對(duì)大菱鲆幼魚紅細(xì)胞核異常及氧化抗氧化平衡的影響[J]. 吳志昊,尤鋒,王英芳,文愛韻,馬得友,徐永立,張培軍.  上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(06)
[7]溶氧水平對(duì)黃顙魚稚魚攝食、生長及呼吸代謝的影響[J]. 楊凱,樊啟學(xué),張磊,楊磊,周華,李波,方巍.  淡水漁業(yè). 2010(02)
[8]斑馬魚胚胎早期血管系統(tǒng)的形成[J]. 楊婧,王志堅(jiān).  生命的化學(xué). 2009(02)
[9]溶解氧與養(yǎng)殖密度對(duì)褐牙鲆幼魚血細(xì)胞數(shù)量及血紅蛋白含量影響的研究[J]. 董曉煜,張秀梅,張沛東.  海洋水產(chǎn)研究. 2008(06)
[10]過飽和溶氧對(duì)大菱鲆生長及消化酶的影響[J]. 徐勇,曲克明,馬紹賽.  漁業(yè)現(xiàn)代化. 2008(04)

博士論文
[1]重金屬對(duì)斑馬魚的毒性效應(yīng)及作用機(jī)制研究[D]. 殷健.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2014
[2]高糖對(duì)斑馬魚胚胎心臟發(fā)育的影響及機(jī)制研究[D]. 梁進(jìn)濤.復(fù)旦大學(xué) 2010
[3]IGFBP-3在斑馬魚胚胎發(fā)育中的功能[D]. 李云.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2005

碩士論文
[1]限制溶解氧供應(yīng)對(duì)褐牙鲆幼魚生長的影響及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 李潔.中國海洋大學(xué) 2011
[2]生長抑素在斑馬魚胚胎發(fā)育中的時(shí)空表達(dá)及功能研究[D]. 陳桂來.西南大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3110122