鯉春病毒（Spring Viremia of Carp Virus,SVCV）是一種彈狀病毒,主要發(fā)生于春季,它可以引起鯉科魚類的魚苗或成魚大規(guī)模暴發(fā)鯉春病毒血癥（SVC）。傳染性胰臟壞死病毒（Infectious Pancreatic Necrosis Virus,IPNV）為雙片段 RNA 病毒,引起傳染性胰臟壞死�。↖PN）,該病屬于世界性魚病,主要危害虹鱒、大西洋鮭、大菱鉀大西洋鱈等十余種常見養(yǎng)殖魚類的魚苗。兩種病毒均屬于傳染性病毒,疫情一旦發(fā)生,對漁業(yè)養(yǎng)殖造成嚴重危害。本研究中首先用海水鯉科魚類細胞系（FHM）對經(jīng)過純化的SVCV和IPNV凍存樣品進行增殖培養(yǎng)直至出現(xiàn)典型病變并收毒。通過設(shè)計的引物對兩種病毒進行基因擴增,得到片段大小為714bp的SVCV、224bp的IPNV。然后連接到pMD18-T載體上構(gòu)建重組質(zhì)粒并進行測序,測序結(jié)果經(jīng)NCBI在線nucleotide blast分析,再利用DNAStar構(gòu)建核酸進化樹,序列與SVCV糖蛋白核酸序列相似性高達99%,IPNV核苷酸同源率為79.9%-98.2%。將適量SVCV、IPNV細胞培養(yǎng)液喂養(yǎng)并注射進行人工感染。對出... 

【文章來源】：大連工業(yè)大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１患ＳＶＣＶ魚病癥??Ｆｉｇ．?１－１?Ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｓｉｇｎｓ?ｏｆ?ＳＶＣＶ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃａｒｐ??

第一章文獻綜述緊接著較小的魚苗中就會出現(xiàn)急性或者慢性發(fā)病癥狀，病集隊游動。發(fā)病后期，有時病魚表現(xiàn)出漫無目的急游、翻邊緣或者進出水口附近，反復(fù)如此運動直至死亡。病魚胸、基部有出血點。將被感染ＩＰＮＶ的死魚進行解剖，魚的肝和腺有出血以及少量壞死病灶，消化道內(nèi)沒有存留食物，有

⑵提�。遥危粒�??①分別取一支２０（ＶＬ病毒擴增液，兩支病魚樣品，和一支作為陰性對照的滅菌水。??②按照２．２．２．１提取ＲＮＡ。??（３）ＰＣＲ?檢測：??應(yīng)用ＲＴ－ＰＣＲ檢測ＳＶＣＶ、ＩＰＮＶ，反應(yīng)體系以及條件見２．２．２．２。反應(yīng)結(jié)束后，ＲＴ－ＰＣＲ??產(chǎn)物經(jīng)１．５％瓊脂糖凝膠電泳鑒定。觀察是否出現(xiàn)的目的片段。??３結(jié)果與討論??．?１病毒增殖結(jié)果??在本次試驗中選用了ＥＰＣ，?ＦＨＭ，?ＣＨＳＥ這三種不同的接毒細胞進行培養(yǎng)和接毒來??在不同的細胞中ＳＶＣＶ、ＩＰＮＶ感染情況。在這對三種細胞的培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)ＥＰＣ和??Ｍ的長勢比較良好，剛開始，一般在傳代之后的２ｄ左右細胞可以單層鋪滿培養(yǎng)瓶的??，可以再次進行傳代，而ＣＨＳＥ—般在４ｄ左右。但隨著傳代次數(shù)的增加細胞鋪滿底??時間則會加長。以下是ＥＰＣ，?ＦＨＭ，?ＣＨＳＥ這三種細胞單層鋪滿狀態(tài)的圖片。??

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3101894