海水養(yǎng)殖魚類經(jīng)常被病原微生物所感染,導(dǎo)致產(chǎn)量下降,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前魚類病害防治仍沒有有效的措施,原因之一是病原的致病機(jī)制和宿主的免疫防御機(jī)制尚未完全闡明。本文從病原和宿主免疫兩方面入手,研究了魚類常見病原菌熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）的致病機(jī)制和魚類宿主半滑舌鰨（Cynoglossus semilaevis）免疫因子（殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白BPI和B型甘露糖結(jié)合凝集素BML）的抗細(xì)菌感染功能。本文通過蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),首先比較了在正常和缺鐵培養(yǎng)環(huán)境中熒光假單胞菌TSS全菌蛋白的差異表達(dá)情況。在蛋白表達(dá)譜中發(fā)現(xiàn)了22個具有顯著性差異表達(dá)的蛋白,通過查閱文獻(xiàn)和結(jié)構(gòu)分析,選取了其中四個,即Hem O（血紅素加氧酶）、PspB（絲氨酸蛋白酶）、Sod（超氧化物歧化酶）和TfeR（Ton B依賴型外膜受體）,分別構(gòu)建了基因突變株,即TSS（35）hemO、TSS（35）pspB、TSS（35）sod和TSS（35）tfeR并進(jìn)行了功能研究。實(shí)驗(yàn)表明,與野生株TSS相比,TSS（35）hemO、TSS（35）pspB和TSS（35）tfeR在組織侵... 

【文章來源】：中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院海洋研究所)山東省

【文章頁數(shù)】：146 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

微生物鐵運(yùn)輸途徑

世界上已經(jīng)引發(fā)了高發(fā)病率和高死亡率。除了它們的核酸和核衣殼具，它們都具有一種非結(jié)構(gòu)性肽酶的多聚蛋白，這個蛋白屬于絲氨酸蛋 al., 2015；Reiser and Timm, 2009)。在某些病毒中，絲氨酸蛋白酶的被半胱氨酸巰基置換，如小核糖核酸病毒，但序列構(gòu)型仍保持同源(Pts, 1998)。例如登革熱病毒的這種酶中含有獨(dú)特的幾丁質(zhì)結(jié)合結(jié)構(gòu)域化合物結(jié)合結(jié)構(gòu)域）(Raut et al., 2015)，表明它們具有入侵昆蟲媒介酸蛋白酶與宿主甘露糖結(jié)合凝集素的相互作用表明了模式識別分子。在丙型肝炎病毒和流感病毒中，有報(bào)道稱甘露糖結(jié)合凝集素相關(guān)的蛋白酶（MASP-1）、2 型（MASP-2）或 3 型（MASP-3）通過對 C4 補(bǔ)體激活(Drentinetal.,2015；Saeedetal.,2013)。寡聚凝集素 Ficolins樣的長伸展結(jié)構(gòu)和具有凝集素活性的纖維蛋白樣球形結(jié)構(gòu)域）也是這復(fù)合物的一部分(Matsushita, 2009)。圖 1.2 展示了甘露糖結(jié)合凝集素酸蛋白酶介導(dǎo)的補(bǔ)體激活途徑。

釋放到細(xì)菌胞外環(huán)境中以獲得鐵或血紅素。目前報(bào)道的細(xì)菌胞外螯合蛋白只有革蘭氏陰性菌可以分泌，統(tǒng)稱為 Hemophores (Letoffe et4)。Hemophores 可以從血液結(jié)合素和血紅蛋白中獲得血紅素，并轉(zhuǎn)運(yùn)到特膜受體上(Wandersman and Delepelaire, 2004)。血紅素主要存在于血紅蛋白中和含有血紅蛋白攝取系統(tǒng)的革蘭氏陰性菌耶爾森菌屬(Rossi et al., 2001)、奈瑟氏菌屬(Turner et al., 1998)、志賀氏菌yckoffetal.,1998)和弧菌屬(O’Malleyetal.,1999)等。發(fā)生溶血后，結(jié)合血紅血清糖蛋白觸珠蛋白，可以為一些細(xì)菌包括流感嗜血桿菌(Whitbyetal.,2膜炎奈瑟氏球菌提供用于生存的鐵(Lewis et al., 1998)。迄今為止ophores 只存在于革蘭氏陰性致病菌中，并且目前 Hemophores 系統(tǒng)在流感菌(Cope et al., 1995)、銅綠假單胞菌(Létoffé et al., 1998)、鼠疫菌(Rossi e1)和粘質(zhì)沙雷氏菌(Letoffe et al., 1994)中研究比較透徹。


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