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二種益生菌對(duì)軍曹魚幼魚生長(zhǎng)性能、免疫酶和消化酶活性、腸道菌群結(jié)構(gòu)及TLR9基因表達(dá)量的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-03-19 17:58
  本實(shí)驗(yàn)旨在研究持續(xù)性和非持續(xù)投喂枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌及其復(fù)合菌對(duì)軍曹魚幼魚生長(zhǎng)性能、免疫酶、消化酶、腸道菌群結(jié)構(gòu)及TLR9基因表達(dá)量的影響,為益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用提供指導(dǎo)。選取平均體重為22.0±0.15g的健康軍曹魚幼魚840尾,隨機(jī)分成7個(gè)處理(組號(hào):T0、T1、T2、T3、T4、T5、T6),每處理3重復(fù),重復(fù)40尾魚。T0組投喂基礎(chǔ)飼料,T1、T2、T3組前30d分別投喂含枯草芽孢桿菌1×107cfu/g、嗜酸乳桿菌1×107cfu/g、含枯草芽孢桿菌+嗜酸乳桿菌(1:1)2×107cfu/g的飼料,后20d投喂基礎(chǔ)飼料;T4、T5和T6組分別投喂T1、T2、T3組飼料50d,分別在0d、10d、20d、30d、40d、50d檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組血清LZM、SOD、ACP和AKP活性;在0d、30d、50d時(shí)獲取軍曹魚的腸道,通過高通量測(cè)序技術(shù)和PCR-DGGE技術(shù)分析其腸道菌群結(jié)構(gòu)與多樣性,并對(duì)優(yōu)勢(shì)菌群進(jìn)行物種注釋。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱重,計(jì)算各處理組的生長(zhǎng)性能,并測(cè)定肝臟和腸道淀粉酶、蛋白酶活性,測(cè)定軍曹魚TLR9基因在肝臟、腎臟、脾臟和腸道中的表達(dá)量。結(jié)果表明:T0、T1和T... 

【文章來源】:廣東海洋大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 軍曹魚生物學(xué)特征及養(yǎng)殖概況
        1.1.1 軍曹魚生物學(xué)特征
        1.1.2 軍曹魚養(yǎng)殖概況
    1.2 益生菌及其在魚類中的應(yīng)用
        1.2.1 益生菌的定義
        1.2.2 益生菌的特性及生理功能
        1.2.3 益生菌的作用機(jī)理
        1.2.4 益生菌在魚類中的應(yīng)用
        1.2.5 益生菌的研究及應(yīng)用中存在的問題
        1.2.6 展望
    1.3 魚類腸道菌群及研究技術(shù)
        1.3.1 魚類腸道菌群的形成
        1.3.2 魚類腸道菌群的數(shù)量和組成
        1.3.3 魚類腸道菌群對(duì)魚類機(jī)體健康的影響
        1.3.4 腸道菌群的分析技術(shù)
    1.4 研究目的及意義
2 二種益生菌對(duì)軍曹魚生長(zhǎng)性能、免疫酶及消化酶活性的影響
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)主要儀器
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 益生菌種類及增殖
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼料制作
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)用魚及飼養(yǎng)管理
        2.1.6 樣品采集及分析方法
        2.1.7 計(jì)算公式及統(tǒng)計(jì)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚生長(zhǎng)性能的影響
        2.2.2 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚血清免疫酶活性的影響
        2.2.3 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚消化酶活性的影響
    2.3 討論
        2.3.1 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚生長(zhǎng)性能的影響
        2.3.2 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚血清免疫酶的影響
        2.3.3 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚肝臟及腸道淀粉酶、蛋白酶活性的影響
    2.4 小結(jié)
3 二種益生菌對(duì)軍曹魚腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及儀器試劑
        3.1.2 樣品采集
        3.1.3 腸道菌群總DNA的提取
        3.1.4 細(xì)菌 16S rDNA V3區(qū)PCR擴(kuò)增
        3.1.5 細(xì)菌基因組總DNA 16S rDNA V3區(qū)擴(kuò)增片段DGGE分析
        3.1.6.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 腸道細(xì)菌總DNA瓊脂糖電泳結(jié)果
        3.2.2 細(xì)菌 16S rDNA V3區(qū)PCR擴(kuò)增瓊脂糖電泳
        3.2.3 腸道細(xì)菌DGGE電泳圖
        3.2.4 軍曹魚前腸菌群結(jié)構(gòu)分析
        3.2.5 軍曹魚后腸菌群結(jié)構(gòu)分析
    3.3 討論
        3.3.1 不同益生菌對(duì)軍曹魚幼魚前腸菌群結(jié)構(gòu)的影響
        3.3.2 不同益生菌對(duì)軍曹魚幼魚后腸菌群結(jié)構(gòu)的影響
    3.4 小結(jié)
4 二種益生菌對(duì)軍曹魚TLR9基因表達(dá)的影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及儀器試劑
        4.1.2 樣品組織的獲取
        4.1.3 組織總RNA的抽提
        4.1.4 總RNA完整性及濃度的檢測(cè)
        4.1.5 總RNA反轉(zhuǎn)成cDNA第一鏈
        4.1.6 TLR9基因表達(dá)量的測(cè)定
        4.1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 軍曹魚幼魚不同組織總RNA瓊脂糖電泳結(jié)果
        4.2.2 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚肝臟TLR9基因表達(dá)量的影響
        4.2.3 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚腎臟TLR9基因表達(dá)量的影響
        4.2.4 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚脾臟TLR9基因表達(dá)量的影響
        4.2.5 益生菌對(duì)軍曹魚幼魚腸道TLR9基因表達(dá)量的影響
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]飼料中補(bǔ)充有益菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦抗病力及其腸道微生物組成影響的研究[D]. 職通瑞.上海海洋大學(xué) 2014
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[4]魚類腸道可定植乳酸桿菌分子生態(tài)的研究[D]. 王雯雯.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
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[6]果寡糖、甘露寡糖和芽孢桿菌對(duì)牙鲆免疫功能和腸道微生態(tài)的影響[D]. 李富東.集美大學(xué) 2010
[7]餌料中添加芽孢桿菌對(duì)草魚生長(zhǎng)的影響及機(jī)理探討[D]. 陳南南.浙江大學(xué) 2010
[8]PCR-DGGE對(duì)六種淡水魚類腸道菌群結(jié)構(gòu)的比較研究[D]. 許振國(guó).曲阜師范大學(xué) 2009
[9]養(yǎng)殖魚腸道菌群分子生態(tài)的研究[D]. 黃光祥.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[10]益生素對(duì)異育銀鯽消化酶活性、腸道菌群及生產(chǎn)性能的影響[D]. 劉波.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004



本文編號(hào):3089980

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