團(tuán)頭魴是我國重要的草食性經(jīng)濟(jì)魚類之一,目前由于過度捕撈等導(dǎo)致其野生種群數(shù)量急劇降低,種質(zhì)資源退化,故加強(qiáng)優(yōu)良品種的選育非常重要。而肌纖維的特性與動(dòng)物肉質(zhì)性狀緊密相關(guān),并且魚類肌纖維的發(fā)育與哺乳動(dòng)物有所不同:魚類肌纖維數(shù)目的增加會(huì)持續(xù)整個(gè)生命周期,而哺乳動(dòng)物肌纖維數(shù)目在出生前已固定,因此闡釋魚類肌纖維發(fā)育的變化規(guī)律及其分子機(jī)理對(duì)于揭示魚類經(jīng)濟(jì)性狀的遺傳規(guī)律及優(yōu)良品種的選育等具有重要作用。本研究采用組織學(xué)和免疫學(xué)等方法分析了團(tuán)頭魴肌纖維發(fā)育和肌衛(wèi)星細(xì)胞增值分化的規(guī)律;篩選出與團(tuán)頭魴肌纖維發(fā)育相關(guān)的肌源性調(diào)節(jié)因子（Myogenic regulatory factors,MRFs）;初步分析了團(tuán)頭魴MRFs家族成員的起源進(jìn)化及其在肌纖維發(fā)育中的作用;另外,分析了熱休克蛋白（Heat shock protein 70,HSP70）和脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）對(duì)團(tuán)頭魴肌肉發(fā)育的影響,以此來加深對(duì)魚類肌肉生長發(fā)育過程的認(rèn)識(shí),本研究主要結(jié)果如下:1.基于組織切片及免疫組化等方法顯示,隨團(tuán)頭魴肌纖維發(fā)育日齡的增加,魚體全長、體重、肌纖維長度、紅白肌纖維直徑和數(shù)目以及面積（增生... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：136 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 研究背景
    1 肌肉的起源和分類
        1.1 動(dòng)物的肌肉發(fā)育
        1.2 魚類的肌肉發(fā)育
        1.3 魚類骨骼肌的分類
    2 肌衛(wèi)星細(xì)胞的起源、分布及調(diào)控
        2.1 肌衛(wèi)星細(xì)胞的起源
        2.2 肌衛(wèi)星細(xì)胞的分布
        2.3 肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖和分化的調(diào)控
    3 肌源性調(diào)節(jié)因子（MRFs）家族的研究進(jìn)展
        3.1 MRFs的結(jié)構(gòu)
        3.2 MRFs在肌肉發(fā)育中的功能
        3.3 MRFs的表達(dá)模式
        3.4 MRFs家族的進(jìn)化研究
    4 肌肉發(fā)育的調(diào)控
        4.1 肌肉發(fā)育的正調(diào)控
        4.2 肌肉發(fā)育的負(fù)調(diào)控
    5 本研究的目的及意義
第二章 團(tuán)頭魴肌纖維不同生長發(fā)育階段變化規(guī)律的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 主要藥品及試劑
        2.3 儀器設(shè)備
        2.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 團(tuán)頭魴出膜后不同日齡紅肌纖維的變化規(guī)律
        3.2 團(tuán)頭魴出膜后不同日齡白肌纖維的變化規(guī)律
        3.3 團(tuán)頭魴出膜后不同日齡肌纖維超微結(jié)構(gòu)的變化規(guī)律
        3.4 1-齡和2-齡團(tuán)頭魴肌纖維及相關(guān)肌肉發(fā)育基因的變化規(guī)律
    4 討論
第三章 團(tuán)頭魴肌源性調(diào)節(jié)因子MRFs的克隆及表達(dá)
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 主要藥品及試劑
        2.3 目的基因中間片段的獲得
        2.4 5/3'-RACE擴(kuò)增
        2.5 序列分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 團(tuán)頭魴總RNA的提取
        3.2 團(tuán)頭魴MRFs基因家族序列的獲得
        3.3 氨基酸的序列和結(jié)構(gòu)分析
        3.4 目的基因在不同組織中的表達(dá)
        3.5 目的基因在不同發(fā)育時(shí)期中的表達(dá)
    4 討論
第四章 團(tuán)頭魴MRFs家族基因的進(jìn)化分析
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 序列檢索和基因預(yù)測(cè)
        2.2 聚類和進(jìn)化分析
        2.3 基因線性分析
        2.4 MRFs結(jié)構(gòu)域的進(jìn)化分析
    3 結(jié)果與分析
        3.1 兩側(cè)對(duì)稱動(dòng)物MRFs同源序列的聚類分析
        3.2 兩側(cè)對(duì)稱動(dòng)物MRFs同源序列的進(jìn)化分析
        3.3 有顎類脊椎動(dòng)物MRFs家族基因的復(fù)制和缺失分析
        3.4 串聯(lián)復(fù)制形成魚類兩個(gè)MyoD復(fù)制基因
        3.5 MRFs結(jié)構(gòu)域的進(jìn)化分析
    4 討論
第五章 不同因子對(duì)團(tuán)頭魴肌肉發(fā)育調(diào)控的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 主要藥品和試劑
        2.3 團(tuán)頭魴pET28a-HSP70原核表達(dá)載體構(gòu)建
        2.4 目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及優(yōu)化
        2.5 重組蛋白的ATP酶活性檢測(cè)
        2.6 團(tuán)頭魴HSP70蛋白腹腔注射
        2.7 團(tuán)頭魴LPS腹腔注射
        2.8 肌肉相關(guān)基因表達(dá)分析
        2.9 肌衛(wèi)星細(xì)胞分布規(guī)律的分析
        2.10 蛋白質(zhì)的提取和Western blot
    3 結(jié)果與分析
        3.1 團(tuán)頭魴pET28a-HSP70原核表達(dá)載體構(gòu)建
        3.2 目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)和純化
        3.3 HSP70重組蛋白的ATP酶活性檢測(cè)
        3.4 HSP70重組蛋白對(duì)團(tuán)頭魴肌肉中相關(guān)基因和蛋白表達(dá)量的影響
        3.5 HSP70重組蛋白對(duì)團(tuán)頭魴肌衛(wèi)星細(xì)胞分布規(guī)律及頻率的影響
        3.6 LPS對(duì)團(tuán)頭魴紅肌中相關(guān)基因表達(dá)量的影響
        3.7 LPS對(duì)團(tuán)頭魴白肌中相關(guān)基因表達(dá)量的影響
        3.8 LPS對(duì)團(tuán)頭魴肌衛(wèi)星細(xì)胞分布規(guī)律及頻率的影響
    4 討論
參考文獻(xiàn)
補(bǔ)充數(shù)據(jù)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3088668