中華絨螯蟹EsDscam與病原的識(shí)別及其參于吞噬反應(yīng)的作用機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-27 09:04
中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)屬于甲殼類動(dòng)物,是一種重要的水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)蟹類,因其體內(nèi)富含大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)而被大眾所喜愛,但近些年來(lái),中華絨螯蟹因受到病原菌的感染,進(jìn)而導(dǎo)致其產(chǎn)量有所下降。細(xì)菌性疾病是中華絨螯蟹的主要病因,這類疾病均由于水體中的不同致病菌所導(dǎo)致,因此探究中華絨螯蟹抵御細(xì)菌的防御機(jī)制是目前亟待解決的重要科學(xué)問題,同時(shí)也為防治病害以及提高其免疫抗病能力提供理論支持。吞噬作用是無(wú)脊椎動(dòng)物先天免疫中非常重要的一種細(xì)胞免疫,外源病原體、細(xì)胞碎片以及凋亡細(xì)胞的清除過程都需要依靠吞噬作用來(lái)完成;然而,目前對(duì)于中華絨螯蟹吞噬作用的研究甚少,同時(shí)近些年來(lái),特異性的先天免疫以及免疫記憶現(xiàn)象在無(wú)脊椎動(dòng)物中被逐漸發(fā)現(xiàn),但這背后的分子機(jī)制卻并不清楚;唐氏綜合征細(xì)胞黏附分子Dscam作為免疫球蛋白超家族的成員,被發(fā)現(xiàn)在節(jié)肢動(dòng)物中具有超強(qiáng)的分子多樣性,同時(shí)還參于對(duì)不同病原體的防御以及吞噬作用,但目前關(guān)于其超強(qiáng)分子多樣性的原因以及如何調(diào)控吞噬作用的機(jī)制未見報(bào)道,因此,明確中華絨螯蟹EsDscam與不同細(xì)菌的結(jié)合方式以及調(diào)控吞噬作用的機(jī)制,將對(duì)闡明無(wú)脊椎動(dòng)物先天免疫特異性分子機(jī)制、進(jìn)一步完善...
【文章來(lái)源】:華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:172 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
第一節(jié) 無(wú)脊椎動(dòng)物的先天免疫
1.1 前言
1.2 物理防御
1.3 體液免疫
1.4 細(xì)胞免疫
第二節(jié) 免疫細(xì)胞吞噬作用的機(jī)理及研究概述
2.1 吞噬作用的基本原理及機(jī)制
2.2 調(diào)控吞噬作用的信號(hào)途徑及因素
2.3 無(wú)脊椎動(dòng)物吞噬作用研究進(jìn)展
第三節(jié)Dscam的發(fā)現(xiàn)、高度可變性及其功能
3.1 Dscam的發(fā)現(xiàn)
3.2 Dscam的高度可變性
3.3 Dscam的功能
第四節(jié) 節(jié)肢動(dòng)物的免疫記憶以及Dscam的免疫特異性研究概述
4.1 節(jié)肢動(dòng)物的免疫記憶
4.2 Dscam的免疫特異性研究
第五節(jié) 本課題研究目的、意義及研究方案
5.1 研究目的及意義
5.2 研究方案
第二章 不同的細(xì)菌誘導(dǎo)Es Dscam的上調(diào)表達(dá)及其亞型的特異性
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
第三節(jié) 結(jié)果
3.1 Es Dscam基因的可變剪切外顯子與內(nèi)含子以及其基因組結(jié)構(gòu)
3.2 Es Dscam基因在不同細(xì)菌刺激后的表達(dá)模式
3.3 Es Dscam抗體的制備及特異性檢測(cè)
3.4 EsDscam 蛋白在不同組織中的表達(dá)模式
3.5 分泌型Es Dscam在不同細(xì)菌刺激后的表達(dá)模式
3.6 Es Dscam的可變外顯子在應(yīng)對(duì)感染時(shí)的特異性表達(dá)
3.7 Es Dscam的 3D結(jié)構(gòu)以及epitope I和II的序列分析
第四節(jié) 討論
第三章 Es Dscam與病原特異性識(shí)別并促進(jìn)細(xì)菌的清除與吞噬
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
第三節(jié) 結(jié)果
3.1 epitope II與不同細(xì)菌的特異性結(jié)合
3.2 特異的Es Dscam重組蛋白的體外表達(dá)以及與細(xì)菌的特異性結(jié)合
3.3 特異的Es Dscam促進(jìn)血細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的清除
3.4 血淋巴中特異Es Dscam亞型的表達(dá)
3.5 特異的Es Dscam促進(jìn)血細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬
3.6 截?cái)嘈虴s Dscam重組蛋白與細(xì)菌的結(jié)合
3.7 截?cái)嘈虴s Dscam重組蛋白對(duì)血細(xì)胞的吞噬作用無(wú)影響
第四節(jié) 討論
第四章 跨膜型Es Dscam通過分泌型Es Dscam調(diào)控吞噬作用
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
第三節(jié) 結(jié)果
3.1 跨膜型Es Dscam調(diào)控血細(xì)胞的吞噬作用
3.2 跨膜型Es Dscam與分泌型Es Dscam發(fā)生共定位
3.3 跨膜型Es Dscam通過分泌型Es Dscam調(diào)控吞噬作用
3.4 跨膜型Es Dscam與分泌型Es Dscam通過同源親和相互作用
第四節(jié) 討論
第五章 博士在讀期間完成的其他工作
第一部分 中華絨螯蟹血細(xì)胞T7噬菌體展示文庫(kù)的構(gòu)建及互作基因的淘選
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
第三節(jié) 結(jié)果
第四節(jié) 討論
第二部分 中華絨螯蟹 β 型整合素Es Integrin的免疫效應(yīng)及調(diào)控吞噬作用的研究
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
第三節(jié) 結(jié)果
第四節(jié) 討論
第三部分 中華絨螯蟹B類清道夫受體Es SRBs的病原識(shí)別及調(diào)控吞噬作用的研究
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
第三節(jié) 結(jié)果
第四節(jié) 討論
本研究的結(jié)論、特色與創(chuàng)新點(diǎn)
1.本研究的結(jié)論
2.特色
3.創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]凡納濱對(duì)蝦T7噬菌體cDNA展示文庫(kù)的構(gòu)建[J]. 胡文燕,朱孟凱,鐘理,姚翠鸞. 集美大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(02)
[2]中華絨螯蟹圍食膜結(jié)構(gòu)觀察及其主要蛋白質(zhì)種類的鑒定[J]. 李婷,蔡春芳,朱健明,何捷,吳韜,葉元土. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2016(01)
[3]噬菌體展示技術(shù)系統(tǒng)發(fā)展進(jìn)展[J]. 孟繁梅,張朝輝,艾云燦. 遺傳. 2011(10)
[4]噬菌體展示技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 劉相葉,鄧洪寬,吳秀萍,王學(xué)林,于申業(yè),于艷玲,劉明遠(yuǎn). 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2008(01)
[5]T4噬菌體表面展示技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 吳健敏,涂長(zhǎng)春,任兆鈞. 病毒學(xué)報(bào). 2004(04)
[6]利用T4噬菌體展示豬瘟病毒E2抗原[J]. 吳健敏,任兆鈞,余興龍,涂長(zhǎng)春,張念祖. 中國(guó)生物工程雜志. 2004(11)
[7]植物免疫及其機(jī)制[J]. 袁秀云,謝慧玲. 生物學(xué)教學(xué). 2004(09)
[8]絲狀噬菌體與噬菌體展示技術(shù)[J]. 黃儀秀,朱圣庚. 微生物學(xué)通報(bào). 1997(05)
博士論文
[1]中華絨螯蟹免疫致敏現(xiàn)象及相關(guān)分子機(jī)制的初步研究[D]. 王晶晶.中國(guó)科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2013
碩士論文
[1]對(duì)蝦血細(xì)胞T7噬菌體展示文庫(kù)構(gòu)建及功能基因淘選[D]. 劉寧.山東大學(xué) 2006
本文編號(hào):3002791
【文章來(lái)源】:華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:172 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
第一節(jié) 無(wú)脊椎動(dòng)物的先天免疫
1.1 前言
1.2 物理防御
1.3 體液免疫
1.4 細(xì)胞免疫
第二節(jié) 免疫細(xì)胞吞噬作用的機(jī)理及研究概述
2.1 吞噬作用的基本原理及機(jī)制
2.2 調(diào)控吞噬作用的信號(hào)途徑及因素
2.3 無(wú)脊椎動(dòng)物吞噬作用研究進(jìn)展
第三節(jié)Dscam的發(fā)現(xiàn)、高度可變性及其功能
3.1 Dscam的發(fā)現(xiàn)
3.2 Dscam的高度可變性
3.3 Dscam的功能
第四節(jié) 節(jié)肢動(dòng)物的免疫記憶以及Dscam的免疫特異性研究概述
4.1 節(jié)肢動(dòng)物的免疫記憶
4.2 Dscam的免疫特異性研究
第五節(jié) 本課題研究目的、意義及研究方案
5.1 研究目的及意義
5.2 研究方案
第二章 不同的細(xì)菌誘導(dǎo)Es Dscam的上調(diào)表達(dá)及其亞型的特異性
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
第三節(jié) 結(jié)果
3.1 Es Dscam基因的可變剪切外顯子與內(nèi)含子以及其基因組結(jié)構(gòu)
3.2 Es Dscam基因在不同細(xì)菌刺激后的表達(dá)模式
3.3 Es Dscam抗體的制備及特異性檢測(cè)
3.4 EsDscam 蛋白在不同組織中的表達(dá)模式
3.5 分泌型Es Dscam在不同細(xì)菌刺激后的表達(dá)模式
3.6 Es Dscam的可變外顯子在應(yīng)對(duì)感染時(shí)的特異性表達(dá)
3.7 Es Dscam的 3D結(jié)構(gòu)以及epitope I和II的序列分析
第四節(jié) 討論
第三章 Es Dscam與病原特異性識(shí)別并促進(jìn)細(xì)菌的清除與吞噬
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
第三節(jié) 結(jié)果
3.1 epitope II與不同細(xì)菌的特異性結(jié)合
3.2 特異的Es Dscam重組蛋白的體外表達(dá)以及與細(xì)菌的特異性結(jié)合
3.3 特異的Es Dscam促進(jìn)血細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的清除
3.4 血淋巴中特異Es Dscam亞型的表達(dá)
3.5 特異的Es Dscam促進(jìn)血細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬
3.6 截?cái)嘈虴s Dscam重組蛋白與細(xì)菌的結(jié)合
3.7 截?cái)嘈虴s Dscam重組蛋白對(duì)血細(xì)胞的吞噬作用無(wú)影響
第四節(jié) 討論
第四章 跨膜型Es Dscam通過分泌型Es Dscam調(diào)控吞噬作用
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
第三節(jié) 結(jié)果
3.1 跨膜型Es Dscam調(diào)控血細(xì)胞的吞噬作用
3.2 跨膜型Es Dscam與分泌型Es Dscam發(fā)生共定位
3.3 跨膜型Es Dscam通過分泌型Es Dscam調(diào)控吞噬作用
3.4 跨膜型Es Dscam與分泌型Es Dscam通過同源親和相互作用
第四節(jié) 討論
第五章 博士在讀期間完成的其他工作
第一部分 中華絨螯蟹血細(xì)胞T7噬菌體展示文庫(kù)的構(gòu)建及互作基因的淘選
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
第三節(jié) 結(jié)果
第四節(jié) 討論
第二部分 中華絨螯蟹 β 型整合素Es Integrin的免疫效應(yīng)及調(diào)控吞噬作用的研究
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
第三節(jié) 結(jié)果
第四節(jié) 討論
第三部分 中華絨螯蟹B類清道夫受體Es SRBs的病原識(shí)別及調(diào)控吞噬作用的研究
第一節(jié) 前言
第二節(jié) 材料與方法
第三節(jié) 結(jié)果
第四節(jié) 討論
本研究的結(jié)論、特色與創(chuàng)新點(diǎn)
1.本研究的結(jié)論
2.特色
3.創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]凡納濱對(duì)蝦T7噬菌體cDNA展示文庫(kù)的構(gòu)建[J]. 胡文燕,朱孟凱,鐘理,姚翠鸞. 集美大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(02)
[2]中華絨螯蟹圍食膜結(jié)構(gòu)觀察及其主要蛋白質(zhì)種類的鑒定[J]. 李婷,蔡春芳,朱健明,何捷,吳韜,葉元土. 水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2016(01)
[3]噬菌體展示技術(shù)系統(tǒng)發(fā)展進(jìn)展[J]. 孟繁梅,張朝輝,艾云燦. 遺傳. 2011(10)
[4]噬菌體展示技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 劉相葉,鄧洪寬,吳秀萍,王學(xué)林,于申業(yè),于艷玲,劉明遠(yuǎn). 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2008(01)
[5]T4噬菌體表面展示技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 吳健敏,涂長(zhǎng)春,任兆鈞. 病毒學(xué)報(bào). 2004(04)
[6]利用T4噬菌體展示豬瘟病毒E2抗原[J]. 吳健敏,任兆鈞,余興龍,涂長(zhǎng)春,張念祖. 中國(guó)生物工程雜志. 2004(11)
[7]植物免疫及其機(jī)制[J]. 袁秀云,謝慧玲. 生物學(xué)教學(xué). 2004(09)
[8]絲狀噬菌體與噬菌體展示技術(shù)[J]. 黃儀秀,朱圣庚. 微生物學(xué)通報(bào). 1997(05)
博士論文
[1]中華絨螯蟹免疫致敏現(xiàn)象及相關(guān)分子機(jī)制的初步研究[D]. 王晶晶.中國(guó)科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2013
碩士論文
[1]對(duì)蝦血細(xì)胞T7噬菌體展示文庫(kù)構(gòu)建及功能基因淘選[D]. 劉寧.山東大學(xué) 2006
本文編號(hào):3002791
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