溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）既是海洋中的正常菌群之一,也是其優(yōu)勢菌群之一,還是人類和海洋動物的重要病原菌。鞭毛、胞外多糖和生物膜與病原菌的粘附力、侵染力和致病力的強弱直接相關(guān)�！鱰ssJ是溶藻弧菌HN08155（WT）的tssJ基因缺失株。本試驗室之前的研究表明,溶藻弧菌tssJ對溶藻弧菌的鞭毛、水不溶性多糖和生物膜的形成具有正調(diào)控作用;對WT和△tssJ進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析表明,tssJ的缺失導(dǎo)致96個相關(guān)基因表達(dá)下調(diào),其中rpoN是眾多表達(dá)下調(diào)基因差異最大的基因之一,所以rpoN可能是這些表型改變的主要調(diào)控基因。為此,本文利用新型自殺質(zhì)粒pLP12構(gòu)建溶藻弧菌的rpoN基因缺失株（△rpoN）,通過分析WT、△tssJ和△rpoN的表型差異,確定溶藻弧菌rpoN基因的主要功能及其與tssJ之間的相互作用。通過測定WT、△tssJ和△rpoN的生長曲線,發(fā)現(xiàn)三種菌株的生長趨勢一致,并且都在22h達(dá)到生長極限;三者生長速度比較結(jié)果為WT>△tsJ>△rpoN。WT、△ tssJ和△rpoN的泳動能力為WT>△tssJ>△rpoN;鞭毛染色試... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１溶藻弧菌基因電泳檢測結(jié)果??

上游同源臂引物ｒｐｏｉＶ－ＵＦ和ｒｐｏＡ＾ＵＲ、下游同源臂引物／７Ｊ〇ｉＶ－ＤＦ和ｒ／Ｊｏ／Ｖ－ＤＲ，??以質(zhì)粒?／ｐｏＡ＾－ＴＶ?為模板、ＰｒｉｍｅＳＴＡＲ?Ｍａｘ?ＤＮＡ?Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ?擴增?ｒｐｏｉＶ■核心序列外??的兩側(cè)翼序列分別為４８２ｂｐ，４７６ｂｐ?（圖３）。??１??．?．?＇ｖｉｄ＇ｌ?ｅ＇?．ｉｓ＇？＇？；＂＊＊＊？??Ｍ５：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ５０００；泳道丨?Ｊ：１ＶＵ，ＮＤ??圖３?ｒ／ｗ／Ｖ基因的上下游同源臂電泳檢測結(jié)果??Ｆｉｇ．３?Ｔｈｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｔｅｓｔ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｉｒｐｏＮ?ｇｅｎｅ＇ｓ?ＮＤ?ａｎｄ?ＮＵ??１９??

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]廣西北部灣大宗海水養(yǎng)殖魚類卵形鯧鲹感染溶藻弧菌及其致病性研究[J]. 余慶,李菲,王一兵,覃仙玲,陳憲云,吳柳瑩,李鵬飛.  廣西科學(xué). 2018(01)
[2]細(xì)菌鞭毛運動、黏附和免疫逃逸機制的研究進(jìn)展[J]. 許綿,周明旭,朱國強.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2017(02)
[3]RpoN和RpoS參與細(xì)菌鞭毛合成與趨化調(diào)控的研究進(jìn)展[J]. 劉曉東,吳港,楊智敏,燕永亮,林敏,張云華.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(12)
[4]粵東養(yǎng)殖區(qū)分離的2株海洋弧菌及其胞外產(chǎn)物對皺紋盤鮑致死毒性的初步分析[J]. 房沙沙,林壯炳,邱礽,王劭雯,劉曉.  海洋科學(xué). 2013(08)
[5]細(xì)菌Ⅳ型分泌系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 趙紅慶,熊衍文,徐建國.  疾病監(jiān)測. 2012(11)
[6]溶藻弧菌對水產(chǎn)動物致病性及其防治的研究進(jìn)展[J]. 苑淑賓,朱愛意.  浙江海洋學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版). 2012(03)
[7]拮抗菌對病原性溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）粘附大黃魚（Pseudosciaena crocea）表皮粘液的影響[J]. 郭國軍,鄢慶枇,鄒文政,周仁孫,陳昌生,陳強.  海洋與湖沼. 2009(06)
[8]我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢[J]. 王武.  漁業(yè)致富指南. 2009(07)
[9]脂多糖快速銀染檢測方法的改良[J]. 徐先棟,謝珍玉,王世鋒,周永燦.  生物技術(shù)通報. 2009(03)
[10]不同環(huán)境條件對溶藻弧菌粘附大黃魚腸粘液的影響[J]. 鄢慶枇,陳強,鄒文政,馬甡,莊峙廈,王小如.  水產(chǎn)學(xué)報. 2006(02)

碩士論文
[1]溶藻弧菌野生株和突變株ΔtssJ的差異表達(dá)序列分析及其TssJ多抗制備[D]. 范雪亭.海南大學(xué) 2016
[2]tssJ基因?qū)θ茉寤【\動性和生物膜形成的影響[D]. 劉文竹.海南大學(xué) 2015
[3]溶藻弧菌毒力菌株基因缺失突變株的構(gòu)建及表型初步分析[D]. 李宏.海南大學(xué) 2013



本文編號：2966528