西伯利亞鱘PYY和POMC基因克隆及其抑制攝食功能初步研究
發(fā)布時間:2021-01-01 08:26
阿片促黑色素皮質(zhì)激素原(Proopinmelanocortin,POMC)和肽YY(Pepide YY,PYY)分別是脊椎動物中樞和外周抑制攝食的關(guān)鍵因子。為研究西伯利亞鱘PYY和POMC在抑制攝食的分子水平調(diào)控中發(fā)揮的作用,本試驗采用PCR、克隆和RACE技術(shù)首次得到了西伯利亞鱘PYY的全序列以及POMC-A和POMC-B的部分序列。隨后采用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測了 PYY的組織表達(dá)以及餐前餐后和禁食對其表達(dá)的影響。最后再分別采用腹腔注射PYY和α-MSH,研究其對攝食量的影響。試驗首次得到西伯利亞鱘PYY全長cDNA序列并發(fā)現(xiàn)其在脊椎動物中具有較高保守性。組織表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)PYY在西伯利亞鱘腦和消化道中的表達(dá)量較高。餐前和餐后PYY mRNA在腦和十二指腸中的變化結(jié)果表明,在餐后3小時PYY mRNA有顯著的增加(p<0.001),說明PYY可能抑制西伯利亞鱘攝食。西伯利亞鱘15天的禁食和復(fù)投喂試驗,禁食組腦中的PYY mRNA表達(dá)量,在1、3、6、10和15天分別比對照組低2.4、1.7、2.0、2.2和2.1倍(p<0.001);復(fù)投喂后,PYY mRNA表達(dá)量相...
【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1總RNA電泳圖??Fig.?1?Agarose?electrophoresis?figure?of?l:otal?RNA??
圖2?SsPYY基因cDNA序列及推導(dǎo)的氨基酸序列??Fig.?2?Nucleotide?and?predic化d?amino?acid?sequences?of?SsPYY.??對SsPYY氨基酸序列進(jìn)行多重比較的結(jié)果表明,SsPYY氨基酸序列與其他物種??PYY的同源性較高(圖SsPYY的氨基酸序列與中華鮮(心皆mser?s/wew別PYY??的同源性最高為100%,與斑點雀錯巧/ms化W?ocwtow)?PYY的同源性為80.8%,??與拉蒂曼魚c/za/w削ae)PYY的同源性為78.8%,與大西洋蛙如)??PYY的同源性為76.9%煙4)。??
Fig.?4?Percen化ge?identities?of?PYY?amino?acids?sequences.??W?PYY家族成員的氨基酸序列為分子標(biāo)化用MEGA?5.1軟件中的鄰接法(N-J??法)構(gòu)建了西伯利亞解PYY氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹(圖5)。進(jìn)化樹結(jié)果表明,西伯??利亞得和中華鱷、斑點雀錯和拉蒂曼魚聚為一支,而與真骨魚類相互獨立。真骨魚類??中PYY分為PYYa和PYYb。??I?'"?Carassius?auratus?PYY??99?I?I?Danio?rerio?PY^?PYYa??,-?■?Ctenopharyngodon?idella?PYY??w???SUurus?mer蝕onal巧戶YY??I?Anguilla?japonica?PYY??w?I?I??I—millI?""?Sa。恚?safar?戶YY??心??61?■?Oreochronvs?niloticus?Pyy???I?PYYb??f?r ̄?Danio?rerio?PY?1??^?Ctenopharyngodon?idella?PY??97?I?Oreochromis?口"oticus?PY??I?1??JO0?I?f?"?Paralichthys?ohvaceus?PY??^?■?Dicentrarchus?labrax?PY?^???I…
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》管理下的鱘魚貿(mào)易及其資源保護(hù)[J]. 劉濤,樊恩源,邢迎春,劉寶祥. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(10)
[2]魚類攝食代謝和運動代謝研究進(jìn)展[J]. 付世建,曹振東,謝小軍. 動物學(xué)雜志. 2008(02)
博士論文
[1]南方鲇POMC、TSHβ亞基和SL cDNA克隆及垂體激素基因的時空表達(dá)[D]. 謝碧文.西南大學(xué) 2008
碩士論文
[1]稀有鮈鯽(Gobiocypris rarus)腦垂體結(jié)構(gòu)及POMC基因cDNA序列克隆和分析[D]. 劉小紅.西南大學(xué) 2010
本文編號:2951268
【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:63 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1總RNA電泳圖??Fig.?1?Agarose?electrophoresis?figure?of?l:otal?RNA??
圖2?SsPYY基因cDNA序列及推導(dǎo)的氨基酸序列??Fig.?2?Nucleotide?and?predic化d?amino?acid?sequences?of?SsPYY.??對SsPYY氨基酸序列進(jìn)行多重比較的結(jié)果表明,SsPYY氨基酸序列與其他物種??PYY的同源性較高(圖SsPYY的氨基酸序列與中華鮮(心皆mser?s/wew別PYY??的同源性最高為100%,與斑點雀錯巧/ms化W?ocwtow)?PYY的同源性為80.8%,??與拉蒂曼魚c/za/w削ae)PYY的同源性為78.8%,與大西洋蛙如)??PYY的同源性為76.9%煙4)。??
Fig.?4?Percen化ge?identities?of?PYY?amino?acids?sequences.??W?PYY家族成員的氨基酸序列為分子標(biāo)化用MEGA?5.1軟件中的鄰接法(N-J??法)構(gòu)建了西伯利亞解PYY氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹(圖5)。進(jìn)化樹結(jié)果表明,西伯??利亞得和中華鱷、斑點雀錯和拉蒂曼魚聚為一支,而與真骨魚類相互獨立。真骨魚類??中PYY分為PYYa和PYYb。??I?'"?Carassius?auratus?PYY??99?I?I?Danio?rerio?PY^?PYYa??,-?■?Ctenopharyngodon?idella?PYY??w???SUurus?mer蝕onal巧戶YY??I?Anguilla?japonica?PYY??w?I?I??I—millI?""?Sa。恚?safar?戶YY??心??61?■?Oreochronvs?niloticus?Pyy???I?PYYb??f?r ̄?Danio?rerio?PY?1??^?Ctenopharyngodon?idella?PY??97?I?Oreochromis?口"oticus?PY??I?1??JO0?I?f?"?Paralichthys?ohvaceus?PY??^?■?Dicentrarchus?labrax?PY?^???I…
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》管理下的鱘魚貿(mào)易及其資源保護(hù)[J]. 劉濤,樊恩源,邢迎春,劉寶祥. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(10)
[2]魚類攝食代謝和運動代謝研究進(jìn)展[J]. 付世建,曹振東,謝小軍. 動物學(xué)雜志. 2008(02)
博士論文
[1]南方鲇POMC、TSHβ亞基和SL cDNA克隆及垂體激素基因的時空表達(dá)[D]. 謝碧文.西南大學(xué) 2008
碩士論文
[1]稀有鮈鯽(Gobiocypris rarus)腦垂體結(jié)構(gòu)及POMC基因cDNA序列克隆和分析[D]. 劉小紅.西南大學(xué) 2010
本文編號:2951268
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